Holdings: Zytotoxizität und Apoptoseinduktion durch das Alkylphosphocholin Erufosin bei chronischer lymphatischer Leukämie in vitro

Zytotoxizität und Apoptoseinduktion durch das Alkylphosphocholin Erufosin bei chronischer lymphatischer Leukämie in vitro:

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Bibliographic Details
Main Author:	Königs, Sonja Katharina 1984- (Author)
Format:	Thesis Book
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Published:	Köln 2017
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adam_text	INHALTSVERZEICHNIS INHALTSVERZEICHNIS................................................................................................7 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS............................................................................................... 10 1 EINLEITUNG.......................................................................................................................14 1.1 APOPTOSE................................................................................................................14 1.1.1 DER EXTRINSISCHE W E G ..................................................................................15 1.1.3 DER MITOCHONDRIALE W EG .......................................................................... 15 1.1.2 DIE CASPASEN-KASKADE .............................................................................. 16 1.2 DIE CHRONISCHE LYMPHATISCHE LEUKAEMIE..........................................................16 1.2.1 GRUNDLAGEN................................................................................................... 17 1.2.2 PROGNOSTISCHE MARKER BEI DER CLL...........................................................18 1.2.2.1 ZYTOGENETIK......................................................................................... 18 1.2.2.3 CD38-EXPRESSION..................................................................................19 1.2.2.4 ZAP-70-EXPRESSION .............................................................................. 19 1.2.2.5 WEITERE FAKTOREN..................................................................................20 1.2.3 THERAPIE DER C L L ........................................................................................ 20 1.3 ALKYLPHOSPHOCHOLINE...........................................................................................21 1.3.1 ENTWICKLUNG UND CHEMISCHE STRUKTUR ....................................................... 21 1.3.2 POTENTIELLE WIRKMECHANISMEN...................................................................23 2 METHODIK...................................................................................................................... 25 2.1 MATERIALIEN......................................................................................................... 25 2.1.1 G ERAETE............................................................................................................25 2.1.2 VERBRAUCHSMATERIAL..................................................................................... 27 2.1.3 CHEMIKALIEN, BIOREAGENZIEN UND FERTIG ZUM GEBRAUCH ERHAELTLICHE BAUKAESTEN............................................................................................................... 26 2.1.4 IMMUNREAGENZIEN, PROTEINE, INHIBITOREN..................................................30 2.1.5 ANTIBIOTIKA...................................................................................................... 31 2.1.6 ANTIKOERPER...................................................................................................... 31 2.1.7 PUFFERLOESUNGEN............................................................................................. 32 2.1.8 VERWENDETE SOFTWARE...................................................................................34 2.2 METHODEN........................................................................................................... 35 2.2.1 PROBENGEWINNUNG........................................................................................35 2.2.2 ISOLIERUNG VON LEUKOZYTEN..........................................................................35 2.2.2.1 ISOLIERUNG VON LEUKOZYTEN AUS PERIPHEREM BLUT............................35 2.2.2.2 B-ZELL-ISOLIERUNG AUS VOLLBLUT VON CLL-PATIENTEN ......................... 36 2.2.2.4 ISOLIERUNG VON GESUNDEN T-ZELLEN AUS LEUKOZYTENKONZENTRATEN37 2.2.3 ZELLZAHLBESTIMMUNG.................................................................................... 37 2.2.4 DURCHFLUSSZYTOMETRIE (FACS)....................................................................37 2.2.4.1 MESSUNG VON OBERFLAECHENANTIGENEN ............................................... 38 2.2.4 2 INTRAZELLULAERE MESSUNG VON Z A P 70.................................................36 2.2.5 MESSUNG DES ZELLUEBERLEBENS....................................................................39 2.2.5.1 MESSUNG DES ZELLUEBERLEBENS MITTELS XXT-ASSAY...........................39 2.2.5.2 MESSUNG DER APOPTOSE MITTELS DURCHFLUSSZYTOMETRIE .................. 40 2.2.6 BEHANDLUNG DER ZELLEN MIT ERUFOSIN UND FLUDARABIN.............................40 2.2.6.1 BEHANDLUNG MIT ERUFOSIN..................................................................... 40 2.2.6 2 BEHANDLUNG MIT FLUDARABIN ................................................................ 41 2.2.6.3 KOMBINATIONSEXPERIMENTE..................................................................41 2.2.7 NACHWEIS VON PROTEINEN............................................................................. 42 2.2.7.1 HERSTELLUNG VON PROTEINLYSATEN ......................................................... 42 2.2.7 2 PROTEINKONZENTRATIONSBESTIMMUNG....................................................42 2.2.7.3 SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE (SDS-PAGE) VON PROTEINEN............................................................................................................. 42 2.2.7 4 WESTERN BLOT..........................................................................................44 2.2.6 MESSUNG DER PHOSPHOLIPASE A2-AKTIVITAET ............................................... 45 2.2.6 STATISTIK........................................................................................................... 45 2.2.6.1 DOSIS-WIRKUNGSKURVEN UND ISOBOLOGRAMME .................................. 45 2.2.6.2 SIGNIFIKANZTESTS..................................................................................... 47 3 ERGEBNISSE............. 3.1 PATIENTENDATEN..................................................................................................... 48 3.2 WIRKUNG VON ERUFOSIN AUF CLL-ZELLEN SOWIE PBMC UND B-ZELLEN VON GESUNDEN SPENDERN..................................................................................................49 3.3 PHOSPHORYLIERUNG VON AKT UNTER ERUFOSINBEHANDLUNG ................................. 52 3.4 ERUFOSIN UND LIPASE-AKTIVITAET............................................................................53 3.4.1. LIPOPROTEINLIPASE.........................................................................................53 3.4.2 CYTOSOLISCHE PHOSPHOLIPASE A 2 ............................................................. 54 3.5 CASPASENAKTIVIERUNG DURCH ERUFOSIN .............................................................. 55 3.5.1 SPALTUNG DER POLY-ADP-RIBOSE-POLYMERASE..........................................55 3.5.2 CASPASENINHIBITION DURCH Z-VAD-FMK ...................................................... 56 3.6 KOMBINATION VON ERUFOSIN MIT FLUDARABIN ...................................................... 57 3.6 KORRELATION DER IN VITRO DATEN MIT KLINISCHEN PROGNOSEFAKTOREN ................. 60 4 DISKUSSION....................................................................................................................62 4.1 APOPTOSEINDUKTION UND WIRKMECHANISMUS VON ERUFOSIN ............................ 62 4.2 AUSBLICK UND ZUKUENFTIGE KLINISCHE BEDEUTUNG VON ERUFOSIN.........................64 5 ZUSAMMENFASSUNG..................................................................................................... 67 6 LITERATURVERZEICHNIS.................................................................................................... 66 7 VORABVEROEFFENTLICHUNG VON ERGEBNISSEN.................................................................80 6 LEBENSLAUF.................................................................................................................... 61
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