Klinische Prüfung der Eignung von Virus-ähnlichen Partikeln (virus-like particles, VLP) als Impfstoff gegen die Nestlings-krankheit der Wellensittiche (Melopsittacus undulatus SHAW, 1805):
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| Published: |
Gießen
VVB Laufersweiler Verlag
2017
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS....................................................................................................
I
TABELLENVERZEICHNIS................................................................................................V
ABBILDUNGSVERZEICHNIS.........................................................................................
VII
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
........................................................................................
IX
1
EINLEITUNG............................................................................................................1
2 LITERATU
RUEBERSICHT..............................................................................................
3
2.1 HERKUNFT, HALTUNG, ZUCHT UND KRANKHEITEN DES
WELLENSITTICHS.........3
2.2 POLYOMA
VIREN..............................................................................................
7
2.2.1 AETIOLOGIE UND
TAXONOMIE.............................................................................................
7
2.2.2 STRUKTUR UND GENOM VON POLYOMA VIREN
..................................................................
9
2.2.2.1 MORPHOLOGIE UND GENOMSTRUKTUR DER AVIAEREN
POLYOMAVIREN......................9
2.2.2.2 REPLIKATIONSZYKLUS DER POLYOM AVIREN
............................................................
10
2.2.3 WIRTSPEKTRUM VON POLYOMA VIRE N
.............................................................................11
2.2.3.1 POLYOMAVIREN DER
SAEUGETIERE............................................................................12
2.2.3 2 AVIAERE POLYOMAVIREN (A P V
)..............................................................................12
2.2.3.3 UNTERSCHIEDE ZWISCHEN SAEUGER- UND AVIAEREN POLYOMAVIREN
...................
16
2.2.4 EPIDEMIOLOGIE DER A P V
..............................................................................................17
2.2.5 TENAZITAET DES A P V
......................................................................................................
17
2.2.6
PATHOGENESE.................................................................................................................18
2.2.7 KLINISCHE
SYMPTOMATIK...............................................................................................19
2.2.8
PATHOLOGIE......................................................................................................................21
2.2.9
DIAGNOSTIK......................................................................................................................21
2.2.9.1 SEROLOGISCHE NACHWEISMETHODEN
..................................................................
22
2.2.9 2 POLYMERASE CHAIN REACTION (P C R
)................................................................23
2.2.9.2.1 KONVENTIONELLE P C R
.......................................................................................23
2.2.9.2 2 REAL-TIME P C R
.................................................................................................
23
2.2.9.2 3 HIGH-RESOLUTION MELTING ANALYSIS (H R M
).................................................. 24
2.2.10
DIFFERENZIALDIAGNOSEN................................................................................................24
2.2.11 THERAPIE UND
PROPHYLAXE.........................................................................................
25
2.3
IMMUNISIERUNG..........................................................................................26
2.3.1 AKTIVE
IMMUNISIERUNG................................................................................................27
2.3.1.1
LEBENDIMPFSTOFFE.................................................................................................
26
2.3.1.2
INAKTIVSTIMPFSTOFFE................................................................................................30
2.3.1.3 VIRUS-LIKE
PARTICLES-LMPFSTOFFE...........................................................................
32
2.3.1.3.1 VIRUS-LIKE PARTICLES-IMPFSTOFF AUS A P V
.........................................................33
2.3.1.4 VIRUS-LIKE PARTICLES-LMPFETOFFE GEGEN WEITERE VIRUSKRANKHEITEN
..............
34
2.3.2
ADJUVANZIEN..................................................................................................................35
2.3.3 IMPFSTOFFE ZUR VERHUETUNG VON APV-LNFEKTIONEN
...................................................
37
2.3.3.1 IMPFSTOFFE ZUR PROPHYLAXE VON A P V-LNFEKTIONEN
.........................................
37
2.3.3 2 VAKZINEN AUF DER BASIS VON DELETIONSM
UTANTEN.........................................38
2.3.3.3 IMPFSTOFFE GEGEN G H P V
.....................................................................................39
2.3.4 IM
PFSCHAEDEN................................................................................................................
39
2.4 DAS IMMUNSYSTEM DER VOEGEL
...............................................................
40
2.4.1 DIE UNSPEZIFISCHE IM M
UNABWEHR...........................................................................41
2.4.2 DIE SPEZIFISCHE
ABWEHR.............................................................................................43
2.4.2.1 DIE HUMORALE
ABWEHR.........................................................................................44
2.4.2.2 DIE ZELLULAERE A BW
EHR..........................................................................................
46
2.4.2.2.1 C D 8-T-Z
ELLEN...................................................................................................47
2 .4 .2 2 .2 C D 4-T-Z
ELLEN...................................................................................................48
2.4.2.2.3
ZYTOKINE.............................................................................................................46
2.4.2.2.4
LNTERFERON-Y.......................................................................................................49
2.4.2.3 ZUSAMMENWIRKEN VON HUMORALER UND ZELLULAERER A BW EHR
.........................
50
3 MATERIAL UND
METHODEN.................................................................................51
3.1
MATERIAL.....................................................................................................
51
3.1.1 WELLENSITTICHE FUER ZUCHT, IMMUNISIERUNG UND BELASTUNGSINFEKTIONEN
...........
51
3.1.2 EMBRYONIERTE SPF-HUEHNEREIER FUER DIE HERSTELLUNG VON HEF-KULTUREN
.........
53
3.1.3 AVIAERES POLYOMAVIRUS FUER BELASTUNGSINFEKTION UND V N T S
................................
53
3.1.4 MEDIEN, LOESUNGEN UND
REAGENZIEN......................................................................
53
3.1.5 GERAETE UND
VERBRAUCHSMATERIALIEN.......................................................................
54
3.2
METHODEN.................................................................................................
56
3.2.1 HALTUNGSBEDINGUNGEN DER ERWORBENEN W ELLENSITTICHE
.....................................
56
3.2.2 UNTERSUCHUNGEN AN DEN ERWORBENEN ADULTEN WELLENSITTICHEN
.......................
57
3.2.3 EIGENE ZUCHT MIT DEN ERWORBENEN 28 W
ELLENSITTICHEN.....................................57
3.2.4 GENEHMIGUNG DES TIERVERSUCHS UND BILDUNG DER WELLENSITTICHGRUPPEN
FUER
DIE
VERSUCHE................................................................................................................58
3.2.5 HERSTELLUNG DES VLP-IMPFENTIGENS
........................................................................
59
3.2.6
ZELLKULTUREN..................................................................................................................
60
3.2.6.1 HERSTELLUNG DER PRIMAEREN
HEF-KULTUREN........................................................60
3.2.6.2 SUBKULTIVIEREN DER PRIMAEREN
HEF-KULTUREN...................................................61
3.2.7 HERSTELLUNG DER VIRUSSTAMMSUSPENSION AUS B F D V -5
......................................
61
3.2.6 TITRATION DER VIRUSSUSPENSION DES STAMMES BFDV -5
.......................................62
3.2.9 HERSTELLUNG DER VLP-VAKZINE AUS APV-LSOLAT B FD V
-5.....................................62
3.2.10 VAKZINATION DER ADULTEN WEIBLICHEN WELLENSITTICHE
............................................
63
3.2.11 UEBERWACHUNG DER IMPFLINGE HINSICHTLICH IMPFREAKTIONEN
.................................
64
3.2.12 BLUTENTNAHMEN BEI WELLENSITTICHEN UND SERUMGEWINNUNG
.............................
64
3.2.12.1 BLUTPROBENENTNAHMEN VON ALLEN ADULTEN W ELLENSITTICHEN
.......................
64
3.2.12.2 SERUM GE WIN NUNG AUS VOLLBLUT ADULTER WELLENSITTICHE
..............................
65
3.2.12.3 BLUTPROBENENTNAHMEN BEI WELLENSITTICHKUEKEN
...........................................
65
3.2.12.4 SERUMGEWINNUNG AUS VOLLBLUT VON WELLENSITTICHKUEKEN
............................
68
3.2.13 ENTNAHME VON DOTTER AUS UNBEFRUCHTETEN EIERN
................................................
69
3.2.13.1 AUFBEREITUNG DER DOTTERPROBEN FUER DIE V N T S
..............................................71
3.2.14
BELASTUNGSINFEKTIONEN...............................................................................................
72
3.2.14.1 BELASTUNGSINFEKTION DER GEIMPFTEN WELLENSITTICHHENNEN
.........................
72
3.2.14.2 BELASTUNGSINFEKTION DER KUEKEN VON GEIMPFTEN H EN
NEN...........................72
3.2.14.3 POSITIVKONTROLLEN - NICHT GEIMPFTE WELLENSITTICHE UND KUEKEN ON
NICHT
GEIMPFTEN
HENNEN..................................................................................................73
3.2.14.4 NEGATIVKONTROLLEN - SEPARAT GEHALTENE, NICHT GEIMPFTE MAENNLICHE
WELLENSITTICHE.........................................................................................................
73
3.2.14.5 UEBERWACHUNG DER INFIZIERTEN WELLENSITTICHE
................................................
73
3.2.15 TITRATION DES TESTVIRUS UND V N T
............................................................................
73
3.2.16 AUFBEREITUNG DER ORGANE ZUR VIRUSREISOLIERUNG
.................................................
75
3.2.17 REAL-TIME P C R
...........................................................................................................76
3.2.17.1 EINSTELLUNG DER
SPEZIFITAETSGRENZE...................................................................
76
3.2.17.2 ISOLIERUNG DER VIRALEN D N S
...............................................................................
77
3.2.17.3 REAL-TIME P C R
..................................................................................................
77
3.2.18 HISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNG VERAENDERTER O RGANE
..........................................
77
3.3 STATISTISCHE ANALYSE
...............................................................................
78
4
ERGEBNISSE......................................................................................................80
4.1 KLINISCHE UNTERSUCHUNG DER WELLENSITTICHE NACH IMMUNISIERUNG .80
4.1.1 KLINISCHE UNTERSUCHUNGEN DER ADULTEN WELLENSITTICHE
......................................
80
4.1.2 KLINISCHE UNTERSUCHUNGEN DER KUEKEN VON IMMUNISIERTEN H ENNEN
..............
82
4.2 ANTIKOERPERBILDUNG DER GEIMPFTEN ADULTEN WELLENSITTICHHENNEN
....
85
4.2.1 SEROKONVERSION DER WELLENSITTICHHENNEN
.............................................................
85
4.2.1.1 IN DER 30 PG-VLP-G
RUPPE.................................................................................
85
4.2.1.2 IN DER 120 PG-VLP-G
RUPPE..............................................................................87
4.3 ANTIKOERPERTITER IM DOTTER GEIMPFTER HENNEN
.......................................
89
4.4 MATERNALE ANTIKOERPERTITER IN SEREN DER WELLENSITTICHKUEKEN
............
91
4.5 BELASTUNGSINFEKTION DER ADULTEN WELLENSITTICHE MIT DEM
APV-LSOLAT BFD
V-5.................................................................................
93
4.5.1 VIRUSAUSSCHEIDUNG NACH DER
BELASTUNGSINFEKTION.............................................94
4.5.1.1 KLOAKALE AUSSCHEIDUNG DES TESTVIRUS BEI NICHT GEIMPFTEN UND
NICHT
TESTINFIZIERTEN ADULTEN MAENNLICHEN WELLENSITTICHE
..........................................
94
4.5.1.2 KLOAKALE APV-AUSSCHEIDUNG BEI UNGEIMPFTEN UND INFIZIERTEN
ADULTEN
W
ELLENSITTICHEN.......................................................................................................
95
4.5.1.3 KLOAKALE VIRUSAUSSCHEIDUNG DER MIT 30 PG VLP GEIMPFTEN UND
TESTINFIZIERTEN WEIBLICHEN W
ELLENSITTICHE...........................................................97
4.5.1.4 KLOAKALE VIRUSAUSSCHEIDUNG DER MIT 120 PG GEIMPFTEN UND
TESTINFIZIERTEN
WEIBLICHEN W ELLENSITTICHE
.....................................................................................
99
4.5.1.5 KLOAKALE VIRUSAUSSCHEIDUNG UND -PERSISTENZ DER KUEKEN UNGEIMPFTER
H EN
NEN....................................................................................................................102
4.5.1.6 KLOAKALE AUSSCHEIDUNG UND VI MS PERSISTENZ DER KUEKEN VON HENNEN,
DIE MIT 30 PG ANTIGEN GEIMPFT
WURDEN.............................................................106
4.5.1.7 KLOAKALE AUSSCHEIDUNG UND VIRUS PERSISTENZ DER KUEKEN VON HENNEN,
DIE
MIT 120 PG ANTIGEN GEIMPFT W U RD EN
................................................................
107
4.5.2 GEWICHTSENTWICKLUNG VDN WELLENSITTICHKUEKEN NACH INFEKTION MIT
BFDV-5 109
4.5.3 ERGEBNISSE DER HISTOLOGISCHEN UNTERSUCHUNG VON O
RGANEN.........................112
5
DISKUSSION.....................................................................................................113
5.1 EIGNUNG DER
WELLENSITTICHE..................................................................114
5.2 VERTRAEGLICHKEIT DES
IMPFSTOFFES............................................................115
5.3 ANTIKOERPERBILDUNG BEI GEIMPFTEN
WELLENSITTICHHENNEN...................116
5.4 ANTIKOERPERTITER IM DOTTER GEIMPFTER HENNEN
.....................................
117
5.5 MATERNALE ANTIKOERPER IM BLUTSERUM DER KUEKEN
...............................
116
5.6 GEWICHTSENTWICKLUNG VON WELLENSITTICHKUEKEN
.................................
119
5.7 EIGNUNG DES EINGESETZTEN APV-LSOLATS BFDV-5
.............................
119
5.8 KLOAKALE VIRUSAUSSCHEIDUNG UND VIRUSPERSISTENZ IN ORGANEN.... 120
5.9 KLOAKALE VIRUSAUSSCHEIDUNG UND SYMPTOME DER WELLENSITTICH
KUEKEN.........................................................................................................121
5.10 HISTOLOGISCH-PATHOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN
...............................
122
5.11
FAZIT.....................................................................................................
122
6
ZUSAMMENFASSUNG......................................................................................
124
7 S
UMMARY........................................................................................................126
8
LITERATURVERZEICHNIS.....................................................................................
126
9
DANKSAGUNG.................................................................................................
144
10 EIDESSTATTLICHE
ERKLAERUNG........................................................................145
11 WISSENSCHAFTLICHE
BEITRAEGE...................................................................146
11.1
KONGRESSBEITRAEGE..............................................................................146
11.2
PREISE..................................................................................................
146
|
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