Stimulation des programmierten Zelltodes humaner Erythrozyten durch Ribavirin:
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Tübingen
2016
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| adam_text | STIMULATION DES PROGRAMMIERTEN ZELLTODES
HUMANER ERYTHROZYTEN DURCH RIBAVIRIN
INAUGURAL-DISSERTATION
ZUR ERLANGUNG DES DOKTORGRADES
DER MEDIZIN
DER MEDIZINISCHEN
FAKULTAET
DER EBERHARD KARLS UNIVERSITAET
ZU TUEBINGEN
VORGELEGT VON
OSWALD
*
GERGELY
2016
INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG......................................................................................................1
1.1 APOPTOSE - PROGRAMMIERTER
ZELLTOD....................................................... 1
1.1.1 GEWEBSHOMOEOSTASE
............................................................................
1
1.1.2 DEFINITION DER
APOPTOSE.......................................................................2
1.1.3 AUSLOESUNG DER
APOPTOSE......................................................................2
1.1.4 BEDEUTUNG DER
APOPTOSE.....................................................................2
1.1.5 MORPHOLOGISCHE UND BIOCHEMISCHE MERKMALE DER APOPTOSE..* 5
1.1.6 SIGNALWEGE DER
APOPTOSE....................................................................6
1.1.7 CASPASE UNABHAENGJGE ZELLTODFORMEN
................................................
8
1.2
ERYTHROZYTEN..............................................................................................1
.
1.2.1
MORPHOLOGIE.......................................................................................11
1.2.2
ERYTHROPOJESE......................................................................................
12
1.2.3 ENERGIESTOFFWECHSEL
...........................................................................
13
1.2.4 DAS
HAEMOGLOBIN.................................................................................14
1.2.5 PATHOPHYSIOLOGIE DER ERYTHROZYTEN
....................................................
14
1.2.6 ABBAU DER
ERYTHROZYTEN.....................................................................
15
1.3
ERYPTOSE....................................................................................................
15
1.3.1 BEGRIFFSABGRENZUNG
............................................................................
15
1.3.2 KENNZEICHEN DER ERYPTOSE
..................................................................
16
1.3.3 BEDEUTUNG DER
ERYPTOSE....................................................................
17
1.3.4 SIGNALWEGE DER
ERYPTOSE...................................................................
19
1.4
RIBAVIRIN....................................................................................................23
1.4.1 PHARMAKOLOGISCHE EIGENSCHAFTEN VON RIBAVIRIN 23
1.4.2 KLINISCHE
ANWENDUNG..........................................................................25
1.4.3 NEBENWIRKUNG UND KONTRAINDIKATION
..................................................
28
1.5 INHIBITION DER
ERYPTOSE...........................................................................
28
1.5.1 INHIBITOREN DES ERSTEN
SJGNALWEGES...................................................29
1.5.2 INHIBITOREN DES ZWEITEN SIGNALWEGES DER
ERYPTOSE...**..*..*. 29
1.5.3 WEITERE
INHIBITOREN............................................................................30
1.6 ANISSAEURE (M*ANISIC
ACID)......................................................................31
1.6.1
STRUKTUR...............................................................................................
31
1.6.2 NATUERLICHES VORKOMMEN VON ANISSAEURE
............................................
32
1.6.3 WIRKUNG VON ANIS UND
ANISSAEURE.......................................................33
1.7
FRAGESTELLUNG...........................................................................................
33
2 MATERIAL UND
METHODEN............................................................................34
2.1
ERYTHROZYTEN.............................................................................................
34
2.2 VENVENDETE
SUBSTANZEN........................................................................
34
2.3 VERWENDETE
LOESUNGEN...........................................................................
36
2.3.1 RINGER-LOESUNG
...................................................................................
36
2.3.2 CALCIUMFREIE
RINGER-LOESUNG.............................................................
37
2.3.3 ANNEXINW
ASCHPUFFER........................................................................38
2.3.4 GLUCOSEFREIE
RINGER-LOESUNG.............................................................
38
2.3.5 HYPEROSMOLARE
RINGER-LOESUNG.........................................................39
2.3.6 PBS-WASCHPUFFER39
.......................................................**............*
2.3.7 RJNDERALBUMIN B S A
...........................................................................39
2.4
METHODEN..................................................................................................
40
2.4.1 DIE FACS-ANALYSE (DURCHFLUSSZYTOMETRIE)
.....................................
40
2.4.2 VORBEREITUNGEN ZU DEN MESSUNGEN
.................................................
42
2.4.3 ANNEXIN-MESSUNG UND FORWARD
SCATTER...........................................42
2.4.4 INTRAZELLULAERE
CALCIUM-MESSUNG........................................................43
2.4.5
CERAMID-MESSUNG.............................................................................
44
45
...........................................
2.4.6
FOTOMETRISCHE MESSUNG DER HAEMOLYSE
45
.*******.*****
*
VITRO
*
ON DER ERYPTOSE
*T*B*2.5
STIMULATION UND *NH
46
..................
2.5.1
STIMULATION DER ERYPTOSE DURCH LONOMYCIN
46
2.5,2
STIMULATION DER ERYPTOSE DURCH HYPEROSMOLAREN SCHOCK
46
.*. . ..*.*...*
EENTZUG
*
2.5.3
STIMULATION DER ERYPTOSE DURCH ENERG
47
...**...........*
2.5.4
STIMULATION DER ERYPTOSE DURCH OXIDATIVEN STRESS
47
......................................................................................................
2.6
STATISTIK
47
...................................................................................................
3
ERGEBNISSE
47
....................................................
3.1
RIBAVIRIN ALS AUSLOESER DER ERYPTOSE
47
............................................................
3.1.1
PHOSPHATIDYLSERIN-EXPOSITJON
*5
......................................................................................
3.1.2
FORWARD SCATTER
53
.....................................................................................................
3.1.3
FLUO-3-FLUORESZENZ
56
.....................................................................................................
3.1.4
CERAMID-BILDUNG
58
.................................................................................................
3.1.5
HAEMOLYSE
59
.....................................................................................................
3.1
*6
CALCIUM-ENTZUG
61
..............
3.2
VERSUCH DER INHIBITION DER ERYPTOSE DURCH M-ANISSAURE
61
......................................................................................................
3.2.1
LONOMYCIN
64
.........................................................................
3.2.2
HYPEROSMOLARER SCHOCK
66
.....................................................................................................
3.2.3
ENERGIEENTZUG
68
...................................................................................
3.2.4
OXIDATIVER S TRESS
70
...........................................
N
*
*
SSAEU
*
E AUF RBAV
*
3.2.5
WIRKUNG VON M-AN
73
...................................................................................................
4
DISKUSSION
73
N AUF DEN PROGRAMMIERTEN ZELLTOD HUMANER
*
*
*BAV*4.1
EINFLUSS VON R
73
.....................................................................................
]60[
ERYTHROZYTEN
76
********
4.2
EINFLUSS VON M-ANISSAURE AUF DEN PROGRAMMIERTEN ZELLTOD
76
............................................................................
HUMANER ERYTHROZYTEN
4.3 MEDIZINISCHE RELEVANZ
*
SCHLUSSFOLGERUNG UND AUSBLICK.............. 77
5
ZUSAMMENFASSUNG.....................................................................................79
6
LITERATUR........................................................................................................
81
7
ANHANG.........................................................................................................
90
7.1
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS.........................................................................90
7.2
PUBLIKATIONSVERZEICHNIS.........................................................................95
7.3 ERKLAERUNG ZUM *GENANTEIL DER
DISSERTATIONSSCHRIFT....................... 96
7.4
DANKSAGUNG.............................................................................................
97
7.5
LEBENSLAUF................................................................................................
98
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