Metastasierungsassoziiertes MicroRNA-Expressionsmuster im Klarzelligen Nierenzellkarzinom:
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| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 4
1. ZUSAMMENFASSUNG 6
2. EINLEITUNG 8
2.1 NIERENZELLKARZINOME 8
2.1.1 EPIDEMIOLOGIE UND AETIOLOGISCHE FAKTOREN 8
2.1.2 DIAGNOSTIK 9
2.1.2.1 SYMPTOME 9
2.1.2.2 BILDGEBENDE VERFAHREN 10
2.1.2.3 BIOPSIEN 11
2.1.2.4 HISTOLOGIE UND GENETIK 11
2.1.2.5 STADIENEINTEILUNG UND MALIGNITAETSGRAD 14
2.1.3 PROGNOSE 16
2.1.4 THERAPIE 17
2.1.4.1 THERAPIE DES LOKALISIERTEN NIERENZELLKARZINOMS 17
2.1.4.2 THERAPIE DES METASTASIERTEN NIERENZELLKARZINOMS 18
2.2 MICRORNAS 21
2.2.1 BIOGENESE 21
2.2.2 REGULATION 23
2.2.3 FUNKTION 24
2.2.4 MICRORNAS IN MALIGNEN TUMOREN 26
2.2.5 MICRORNAS IN NIERENZELLKARZINOMEN 27
2.2.6 MOLEKULARE VERAENDERUNGEN IN METASTASIERTEN NIERENZELLKARZINOMEN 28
3. ZIELE DER ARBEIT 29
4. METHODIK 30
4.1 CHEMIKALIEN UND GERAETE 30
4.1.1 CHEMIKALIEN UND REAGENZIEN 30
4.1.2 GERAETE UND PROGRAMME 30
4.2 PATIENTENKOLLEKTIV UND GEWEBEPROBEN 31
4.3 METHODEN 32
4.3.1 HAEMATOXYLIN-EOSIN-FAERBUNG UND LICHTMIKROSKOPISCHE BEURTEILUNG 33
4.3.2 GESAMT-RNA-ISOLIERUNG 33
4.3.3 REINHEITSBESTIMMUNG, QUANTITATIVE UND QUALITATIVE ANALYSE DER
GEWONNENEN GESAMT-RNA 34
4.3.4 MICRORNA-MICROARRAY-ANALYSE 36
4.3.5 QUANTITATIVE ECHTZEIT-POLYMERASE-KETTENREAKTION 37
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4.3.6 BIOSTATISTISCHE AUSWERTUNG DER EXPRESSIONSANALYSEN 38
4.3.7 ZELLKULTUR 39
4.3.7.1 ZELLLINIE 40
4.3.7.2 AUFTAUEN DER ZELLEN 40
4.3.7.3 PASSAGIEREN DER ZELLEN 40
4.3.7.4 EINFRIEREN DER ZELLEN 41
4.3.7.5 BESTIMMEN DER ZELLZAHL 41
4.3.7.6 TRANSFEKTION DER ZELLEN 41
4.3.7.7 ISOLIERUNG VON GESAMT-RNA AUS TRANSFIZIERTEN ZELLEN 42
4.3.7.8 ECHTZEIT-ZELLFUNKTIONSANALYSE: PROLIFERATION UND ADHAERENZ 43
4.3.7.9 ECHTZEIT-ZELLFUNKTIONSANALYSE: MIGRATION 43
4.3.7.10 ZELLFUNKTIONSANALYSE: INVASION 44
4.3.7.11 BIOSTATISTISCHE AUSWERTUNG DER ZELLKULTUR 44
5. ERGEBNISSE 46
5.1 MICRORNA-MICROARRAY-ANALYSE 46
5.2 QUANTITATIVE ECHTZEIT-POLYMERASE-KETTENREAKTION-VALIDIERUNG 58
5.3 KORRELATION DER MICRORNA-EXPRESSION ZUR PROGNOSE 61
5.4 ZELLKULTUR 67
5.4.1 TRANSIENTE TRANSFEKTION 68
5.4.2 ADHAERENZ UND PROLIFERATION 71
5.4.3 MIGRATION 74
5.4.4 INVASION 75
6. DISKUSSION 77
6.1 MICRORNA-MICROARRAY-ANALYSE UND QUANTITATIVE ECHTZEIT-POLYMERASE-
KETTENREAKTION-VALIDIERUNG 77
6.2 PROGNOSTISCHE AUSSAGEKRAFT DER MITTELS QUANTITATIVER ECHTZEIT-
POLYMERASE-KETTENREAKTION VALIDIERTEN MICRORNAS 88
6.3 FUNKTIONELLE RELEVANZ VON MIR-30C-5P IM METASTASIERUNGSPROZESS 89
7. SCHLUSSFOLGERUNGEN UND AUSBLICK 93
8. LITERATUR- UND QUELLENVERZEICHNIS 95
9. ANHANG 112
9.1 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 112
9.2 TABELLENVERZEICHNIS 113
9.3 EHRENWOERTLICHE ERKLAERUNG 114
9.4 DANKSAGUNG 115
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