Thrombozytenaktivierung als Modulator eines chronischen Leberschadens:
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2015
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
1.1 LEBERFIBROSE UND MEDIZINISCHE BEDEUTUNG 2
1.1.1 DEFINITION 2
1.1.2 EPIDEMIOLOGIE 2
1.1.3 PATHOPHYSIOLOGIE 3
1.1.4 KLINIK 6
1.1.5 THERAPIEOPTIONEN UND AUSBLICK 7
1.2 EINFLUSS VON CHEMOKINEN AUF DIE ENTWICKLUNG
EINER LEBERFIBROSE 8
1.3 ROLLE DER THROMBOZYTEN UND IHRER MEDIATOREN
AUF DIE ENTWICKLUNG EINER LEBERFIBROSE 9
1.3.1 THROMBOZYTENAKTIVIERUNG 10
1.3 2 PRO-FIBROTISCHE EFFEKTE UND EINFLUSS AUF DIE LEBERSCHAEDIGUNG 10
1.3.2 1 FREIGESETZTE CHEMOKINE UND IHRE BEDEUTUNG 11
1.3.2.2 DAS CHEMOKIN CXCL4 12
1.3 2.3 DAS CHEMOKIN RANTES 13
1.3.3 EINFLUSS AUF REGENERATION DES LEBERGEWEBES 13
1.3.4 ZUSAMMENFASSUNG DER ROLLE VON THROMBOZYTEN 14
1.4 JUNCTIONAL ADHESION MOLECULE A (JAM-A) 15
2 ZIELSETZUNG 18
3 MATERIAL UND METHODEN 20
3.1 MATERIALEN 20
3.1.1 LISTE DER VERWENDETEN LABORGERAETE 20
3.1.2 LISTE DER VERWENDETEN GEBRAUCHSMATERIALIEN 20
3.1.3 LISTE DER VERWENDETEN CHEMIKALIEN 21
3.1.4 LISTE DER VERWENDETEN SONDEN 23
3.1.5 LISTE DER VERWENDETEN ANTIKOERPER 23
3.1.6 LISTE DER VERWENDETEN PRIMER 23
3.1.7 LISTE DER VERWENDETEN STAMMLOESUNGEN, PUFFER UND MEDIEN 23
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INHALTSVERZEICHNIS
3.2 METHODEN UND VERSUCHSBESCHREIBUNGEN 24
3.2.1 IN VIVO MAUS- EXPERIMENTE 24
3.2.2 GENERIERUNG DER PF4-CRE
+
JAM-A
,LOX
LOX
-MAUS 25
3.2.3 HALTUNG UND VERSORGUNG DER TIERE 26
3.2.4 INDUKTION DES LEBERSCHADENS DURCH TETRACHLORKOHLENSTOFF 26
3.2.5 EINTEILUNG DER TIERE 26
3.2.6 GENOTYPISIERUNG DER TIERE 27
3.2.7 HYDROXYPROLINMETHODE ZUR BIOCHEMISCHEN BESTIMMUNG
DES FIBROSEGRADES 30
3.2.8 RNA- ISOLATION 32
3.2.9 REVERSE TRANSKRIPTASE; CDNA-SYNTHESE 33
3.2.10 QUANTITATIVE REAL-TIME-PCFL/GEN-EXPRESSIONSANALYSE 34
3.2.11 PROTEINISOLATION 36
3.2.12 NEUTROPHILENFAERBUNG 37
3.2.13 JAM-A-FAERBUNG 38
3.2.14 THROMBOZYTENFAERBUNG 38
3.2.15 NACHWEIS DER EXPRESSION VON JAM-A AUF ENDOTHELZELLEN 38
3.2.16 IMMUNZELLISOLATION MITTELS DURCHFLUSSZYTOMETRIE (FACS) 39
3.2.17 STATISTISCHE METHODEN 40
4 ERGEBNISSE 41
4.1 SINUSOIDALE ENDOTHELZELLEN EXPRIMIEREN JAM-A 41
4.2 NACH CHRONISCHER LEBERSCHAEDIGUNG WIRD DIE JAM-A-
EXPRESSION AUF ENDOTHELZELLEN HOCHREGULIERT 41
4.3 EINE TOXISCHE LEBERSCHAEDIGUNG FUEHRT ZU PLAETTCHENADHAESION
UND -AGGREGATION IM MAUSMODELL 42
4.4 DER KNOCK-OUT DES ADHAESIONSMOLEKUELS JAM-A AUF
THROMBOZYTEN FUEHRT ZU EINER VERMINDERTEN FIBROSIERUNG IM
MAUSMODELL 44
4.5 DIE GENETISCHE DELETION VON JAM-A AUF THROMBOZYTEN FUEHRT
ZU EINER VERAENDERTEN EXPRESSION VON FIBROSE- ASSOZIIERTEN
GENEN 45
4.6 DIE VERHINDERUNG DER INTERAKTION ZWISCHEN THROMBOZYTEN
UND ENDOTHEL VIA JAM-A-KONTAKT FUEHRT ZU EINER
REDUZIERTEN INFILTRATION VON NEUTROPHILEN GRANULOZYTEN 48
S II
INHALTSVERZEICHNIS
4.7 DER KNOCKOUT VON JAM-A AUF THROMBOZYTEN FUEHRT ZU EINER
REDUZIERTEN IMMUNZELLINFILTRATION 50
5 DISKUSSION 53
5.1. BESCHREIBUNG DER ERGEBNISSE 54
5.1.1 ENDOTHELZELLEN PRAESENTIEREN JAM-A 55
5.1.2 NACH LEBERSCHAEDIGUNG KOMMT ES ZU EINER ZUNAHME
DER JAM-A-EXPRESSION 55
5.1.3 WAEHREND EINER CHRONISCHER LEBERSCHAEDIGUNG KOMMT ES ZUR
THROMBOZYTENADHAESION AM ENDOTHEL 56
5.1.4 DIE JAM-A DEFIZIENZ AUF THROMBOZYTEN FUEHRT ZU EINER
VERMINDERTEN FIBROSIERUNG 58
5.1.5 EINE INHIBIERUNG DES JAM-A KONTAKTS ZWISCHEN
THROMBOZYTEN UND ENDOTHELZELLEN FUEHRT ZUR REDUKTION
FIBROSE-ASSOZIIERTER GENE 58
5.1.6 DIE GENETISCHE DELETION VON JAM-A AUF THROMBOZYTEN IST MIT
EINER VERMINDERTEN REKRUTIERUNG VON ENTZUENDUNGSZELLEN
ASSOZIIERT
5.1.6.1 ABNAHME DER NEUTROPHILEN GRANULOZYTEN
5.1.6.2 ABNAHME DER T-ZELLEN
5.1.6.3 ABNAHME DER MAKROPHAGEN
5.2 KLINISCHE BEDEUTUNG DER GEWONNEN ERGEBNISSE
5.3 EINSCHRAENKUNGEN UND MOEGLICHE KRITIKPUNKTE
5.4 ZUSAMMENFASSUNG DER DISKUSSION
6 ZUSAMMENFASSUNG
7 LITERATURVERZEICHNIS
8 ANHANG
8.1 DANKSAGUNG
8.2 ERKLAERUNG ZUR DATENAUFBEWAHRUNG
8.3 EIDESSTATTLICHE ERKLAERUNG GEMAESS § 5 ABS. (1) UND
§ 11 ABS. (3) 12. DER PROMOTIONSORDNUNG
8.4 LEBENSLAUF
61
61
62
63
63
66
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79
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82
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