Verhaltensbiologische Untersuchungen über die Langzeitauswirkungen von experimentellem Schädel-Hirn-Trauma in der Maus:
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| Published: |
Gießen
DVG Service
2015
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
XI
INHALTSVERZEICHNIS
I. EINLEITUNG
II. LITERATURUEBERSICHT
1. SCHAEDEL-HIRN-TRAUMA
1.1. EPIDEMIOLOGIE
1.2. KLINISCHE BEDEUTUNG
1.3. PATHOPHYSIOLOGIE 5
1.4. TIEREXPERIMENTELLE ERFORSCHUNG DES SCHAEDEL-HIM-TRAUMAS 6
2. FUNKTIONEN BETROFFENER HIRNSTRUKTUREN 8
2.1. ZENTRALE REGULATION DER MOTORIK 8
2.2. MOTOIKORTEX 9
2.3. SOMATOSENSIBLER KORTEX 9
2.4. ANATOMISCHE GRUNDLAGEN DES GEDAECHTNISSES 10
2.5. LIMBISCHES SYSTEM 10
2.6. HIPPOCAMPUS 11
2.7. AMYGDALA 11
3. ORGANISCHE PSYCHISCHE STOERUNGEN NACH SCHAEDEL-HIRN-TRAUMA 13
3.1. PSYCHOSYNDROM NACH SCHAEDEL-HIRN-TRAUMA 13
3.2. ANGSTSTOERUNG 14
3.3. SCHIZOPHRENIE 14
3.4. DEPRESSION 15
3.5. LEICHTE KOGNITIVE STOERUNGEN 15
4. EPILEPSIE 17
III. MATERIAL 19
1. MATERIALLISTEN 19
2. VERSUCHSTIERE 25
3. GENEHMIGUNG DES TIERVERSUCHS 25
IV. METHODEN 26
1. STUDIENPLANUNG 26
1.1. GRUPPENBESCHREIBUNG 26
HTTP://D-NB.INFO/1074197356
XII
INHALTSVERZEICHNIS
1.2. GRUPPENGROESSEN/GESAMTFALLZAHL 26
1.3. ZEITLICHE VERSUCHSABFOLGE 27
2. HALTUNGSBEDINGUNGEN 28
3. INDUKTION EINES EXPERIMENTELLEN SCHAEDEL-HIRN-TRAUMAS MIT DEM
CONTROLLED
CORTICAL IMPACT -MODELL 29
3.1. OPERATIONSVOIBEREITUNG 29
3.2. OPERATION 29
3.2.1. EINLEITUNGEN/NARKOSE 29
3.2.2. CONTROLLED CORTICAL IMPACT (CC1) 30
3.2.3. SHAM 31
3.3. POSTOPERATIVE BEOBACHTUNGSPHASE 31
4. VERHALTENSBIOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN 32
4.1. MOTORISCHE KOORDINATION UND KOMBINATIONSTESTS ZUR ALLGEMEINEN
VERHALTENSBEURTEILUNG 32
4.1.1. NEUROLOGICAL DEFICIT SCORE (NDS) 32
4.1.2. ROTAROD 34
4.1.3. CATWALK XT 34
4.2. DEPRESSIONS-AEHNLICHES, SCHIZOPHRENIE-AEHNLICHES, ANGST-ASSOZIIERTES
UND
SOZIALES VERHALTEN 36
4.2.1. ANGST-ASSOZIIERTES VERHALTEN, MOBILITAET UND AKTIVITAET 36
4.2.1.1. ELEVATED PLUS MAZE (EPM) 36
4.2.1.2. OPEN FIELD (OF) 36
4.2.2. SOZIALVERHALTEN 37
4.2.2.1. SOCIAL INTERACTION (SI) = CRAWLEY BOX 37
4.2.3. SCHIZOPHRENIE-AEHNLICHES VERHALTEN 37
4.2.3.1. PREPULSE INHIBITION OF ACOUSTIC STARTIE RESPONSE (PPI) 37
4.2.4. DEPRESSIONS-AEHNLICHES VERHALTEN 39
4.2.4.1. TAIL SUSPENSION (TS) 39
4.3. KOGNITIVE FAEHIGKEITEN 39
4.3.1. MORRIS WATER MAZE (MWM) 39
4.3.2. FEAR CONDITIONING (FC) 40
4.4. VISUELLE WAHRNEHMUNG 41
4.4.1. VISUAL CLIFF TEST 41
4.5. KRAMPFHEIGUNG 42
INHALTSVERZEICHNIS XIII
4.5.1. MESSUNG PENTYLENTETRAZOL-INDUZIERTER KRAMPFANFALLE (PTZ) 42
5. TOETUNG UND PRAEPARATION 43
6. KRYOSEKTION 44
7. HISTOLOGISCHE FAERBUNG UND AUSWERTUNG 45
7.1. NISSL-FAERBUNG 45
7.2. BESTIMMUNG DES SCHADENVOLUMENS 45
7.3. LBA-1
-FAERBUNG 46
7.4. BESTIMMUNG DER MIKROGLIAZELLAKTIVIERUNG 47
8. MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN 49
8.1. RIBONUKLEINSAEURE-EXTRAKTION 49
8.2. C DNA-SYNTHETISIERUNG 50
8.3. POFYMERASEKETTENREAKTION (PCR) 51
8.4. QUANTITATIVE ECHTZEIT-PCR (REAL-TIME PCR) 52
9. STATISTISCHE DATENAUSWERTUNG 54
V. ERGEBNISSE 55
1. KOERPERGEWICHTSKONTROLLE 56
2. VERHALTENSBIOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN 58
2.1. NEUROLOGICAL DEFICIT SCORE (NDS) 58
2.1.1. CCI VS. SHAM ZUM FRUEHEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 58
2.1.2. CCI VS. SHAM ZUM SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 59
2.1.3. VERGLEICH DER UNTERSUCHUNGSZEITPUNKTE 60
2.2. ROTAROD 61
2.2.1. CCI VS. SHAM ZUM FRUEHEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 61
2.2.2. CCI VS. SHAM ZUM SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 61
2.2.3. VERGLEICH DER UNTERSUCHUNGSZEITPUNKTE 61
2.3. CATWALK XT 62
2.3.1. CCI VS. SHAM ZUM FRUEHEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 62
2.3.2. CCI VS. SHAM ZUM SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 64
2.3.3. VERGLEICH DER UNTERSUCHUNGSZEITPUNKTE 65
2.4. ELEVATED PLUS MAZE (EPM) 66
2.4.1. CCI VS. SHAM ZUM FRUEHEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 66
2.4.2. CCI VS. SHAM ZUM SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 66
XIV
INHALTSVERZEICHNIS
2.4.3. VERGLEICH DER UNTERSUCHUNGSZEITPUNKTE 66
2.5. OPEN FIELD (OF) 68
2.5.1. CCI VS. SHAM ZUM FRUEHEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 68
2.5.2. CCI VS. SHAM ZUM SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 68
2.5.3. VERGLEICH DER UNTERSUCHUNGSZEITPUNKTE 68
2.6. SOCIAL INTERACTION (SI) = CRAWLEY BOX 70
2.6.1. CCI VS. SHAM ZUM FRUEHEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 70
2.6.2. CCI VS. SHAM ZUM SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 70
2.6.3. VERGLEICH DER UNTERSUCHUNGSZEITPUNKTE 70
2.7. PREPULSE INHIBITION OF ACOUSTIC STARTIE RESPONSE (PPI) 72
2.7.1. CCI VS. SHAM ZUM FRUEHEN UND SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 72
2.7.2. VERGLEICH DER UNTERSUCHUNGSZEITPUNKTE 72
2.8. TAIL SUSPENSION (TS) 73
2.8.1. CCI VS. SHAM ZUM FRUEHEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 73
2.8.2. CCI VS. SHAM ZUM SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 73
2.8.3. VERGLEICH DER UNTERSUCHUNGSZEITPUNKTE 73
2.9. MORRIS WATER MAZE (MWM) 74
2.9.1. CCI VS. SHAM ZUM FRUEHEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 74
2.9.2. CCI VS. SHAM ZUM SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 76
2.9.3. VERGLEICH DER UNTERSUCHUNGSZEITPUNKTE 78
2.10. FEAR CONDITIONING (FC) 79
2.10.1. CCI VS. SHAM ZUM FRUEHEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 79
2.10.2. CCI VS. SHAM ZUM SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 79
2.10.3. VERGLEICH DER UNTERSUCHUNGSZEITPUNKTE
2.11. VISUAL CLIFF TEST
2.11.1. CCI VS. SHAM ZUM SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT
2.12. MESSUNG PENTYLENTETRAZOL-INDUZIERTER KRAMPFANFAELLE (PTZ).
2.12.1. CCI VS. SHAM ZUM FRUEHEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT
2.12.2. CCI VS. SHAM ZUM SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT
2.12.3. VERGLEICH DER UNTERSUCHUNGSZEITPUNKTE
3. HISTOLOGISCHE FAERBUNG UND AUSWERTUNG
3.1. BESTIMMUNG DES SCHADENVOLUMENS
3.1.1. CCI VS. SHAM ZUM FRUEHEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT
3.1.2. CCI VS. SHAM ZUM SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT
INHALTSVERZEICHNIS XV
3.1.3. VERGLEICH DER UNTERSUCHUNGSZEITPUNKTE 85
3.2. BESTIMMUNG DER MIKROGLIAZELLAKTIVIERUNG 87
3.2.1. CCI VS. SHAM ZUM FRUEHEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 87
3.2.2. CCI VS. SHAM ZUM SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 88
3.2.3. VERGLEICH DER UNTERSUCHUNGSZEITPUNKTE 88
4. MOLEKULARBIOLOGISCHE ERGEBNISSE 89
4.1. EXPRESSION DES GENS LLLSS 89
4.1.1. CCI VS. SHAM ZUM FRUEHEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 89
4.1.2. CCI VS. SHAM ZUM SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 89
4.1.3. VERGLEICH DER UNTERSUCHUNGSZEITPUNKTE 89
4.2. EXPRESSION DES GENS I!6 91
4.2.1. CCI VS. SHAM ZUM FRUEHEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 91
4.2.2. CCI VS. SHAM ZUM SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 91
4.2.3. VERGLEICH DER UNTERSUCHUNGSZEITPUNKTE 91
4.3. EXPRESSION DES GENS GFAP 92
4.3.1. CCI VS. SHAM ZUM FRUEHEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 92
4.3.2. CCI VS. SHAM ZUM SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 92
4.3.3. VEIGLEICH DER UNTERSUCHUNGSZEITPUNKTE 92
4.4. EXPRESSION DES GENS LEN2 93
4.4.1. CCI VS. SHAM ZUM FRUEHEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 93
4.4.2. CCI VS. SHAM ZUM SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 93
4.4.3. VERGLEICH DER UNTERSUCHUNGSZEITPUNKTE 93
4.5. EXPRESSION DES GENS GADD45B 95
4.6. EXPRESSION DES GENS GAP43 96
4.6.1. CCI VS. SHAM ZUM FRUEHEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 96
4.6.2. CCI VS. SHAM ZUM SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 96
4.6.3. VERGLEICH DER UNTERSUCHUNGSZEITPUNKTE 96
4.7. EXPRESSION DES GENS LLCAM 97
4.7.1. CCI VS. SHAM ZUM FRUEHEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 97
4.7.2. CCI VS. SHAM ZUM SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 97
4.7.3. VERGLEICH DER UNTERSUCHUNGSZEITPUNKTE 97
4.8. EXPRESSION DES GENS ARGL 98
4.8.1. CCI VS. SHAM ZUM FRUEHEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 98
4.8.2. CCI VS. SHAM ZUM SPAETEN UNTERSUCHUNGSZEITPUNKT 98
XVI
INHALTSVERZEICHNIS
4.8.3. VERGLEICH DER UNTERSUCHUNGSZEITPUNKTE 98
VI. DISKUSSION 99
1. KOERPERGEWICHTSKONTROLLE 99
2. VERHALTENSBIOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN 100
2.1. MOTORISCHE KOORDINATION UND KOMBINATIONSTESTS ZUR ALLGEMEINEN
VERHALTENSBEURTEILUNG 100
2.1.1. NEUROLOGICAL DEFICIT SCORE (NDS) 100
2.1.2. ROTAROD 100
2.1.3. CATWALK XT 101
2. J .4. SCHLUSSFOLGERUNG: MOTORISCHE KOORDINATION 102
2.2. DEPRESSIONS-AEHNLICHES, SCHIZOPHRENIE-AEHNLICHES, ANGST-ASSOZIIERTES
UND
SOZIALES VERHALTEN 103
2.2.1. ELEVATED PLUS MAZE (EPM) 103
2.2.2. OPEN FIELD (OF) 103
2.2.3. SOCIAL INTERACTION (SI) = CRAWLEY BOX 104
2.2.4. PREPULSE INHIBITION OF ACOUSTIC STARTIE RESPONSE (PPI) 105
2.2.5. TAIL SUSPENSION (TS) 105
2.2.6. SCHLUSSFOLGERUNG: DEPRESSIONS-AEHNLICHES, SCHIZOPHRENIE-AEHNLICHES,
ANGST
ASSOZIIERTES UND SOZIALES VERHALTEN 106
2.3. KOGNITIVE FAEHIGKEITEN 107
2.3.1. MORRIS WATER MAZE (MWM) 107
2.3.2. FEAR CONDITIONING (FC) 108
2.3.3. SCHLUSSFOLGERUNG: KOGNITIVE FAEHIGKEITEN 109
2.4. VISUELLE WAHRNEHMUNG 110
2.4.1. VISUAL CLIFF TEST 110
2.5. KRAMPFNEIGUNG 110
2.5.1. MESSUNG PENTYLENTETRAZOL-INDUZIERTER KRAMPFANFALLE (PTZ) 110
3. HISTOLOGISCHE FAERBUNG UND AUSWERTUNG 112
3.1. BESTIMMUNG DES SCHADENVOLUMENS 112
3.2. BESTIMMUNG DER MIKROGLIAZELLAKTIVIERUNG 112
4. MOLEKULARBIOLOGISCHE GENEXPRESSION 114
4.1. INFLAMMATIONSMARKER 114
4.1.1. ILLSS 114
INHALTSVERZEICHNIS XVII
4.1.2. 116 114
4.2. ASTROZYTENMARKER 115
4.2.1. GFAP 115
4.2.2. LCN2 116
4.3. PLASTIZITAETSMARKER 117
4.3.1. GADD45B 117
4.4. MARKER FUER NEURITENWACHSTUM 118
4.4.1. GAP43 118
4.4.2. LLCAM 118
4.5. MIKROGLIAMARKER 119
4.5.1. ARG1 119
5. UEBERGREIFENDER VERGLEICH DER ERGEBNISSE MIT VORHANDENEN
ERKENNTNISSEN 121
6. VALIDITAETSBEURTEILUNG DER ANGEWANDTEN METHODEN 124
VII. ZUSAMMENFASSUNG 126
VIII. SUMMARY 129
IX. ANHANG 131
1. ABBILDUNGSVERZEICHNIS 131
2. TABELLENVERZEICHNIS 134
3. LITERATURVERZEICHNIS 135
X. DANKSAGUNG 177
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