Instrumentelle Analytik und Bioanalytik: Biosubstanzen, Trennmethoden, Strukturanalytik, Applikationen
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Berlin ; Heidelberg
Springer Spektrum
[2015]
|
| Ausgabe: | 3. Auflage |
| Schriftenreihe: | Springer-Lehrbuch
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltstext Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | XXXIX, 533 Seiten Illustrationen, Diagramme |
| ISBN: | 3662462540 9783662462546 |
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Datensatz im Suchindex
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INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
2 BIOMOLEKUELE 9
2.1 PROTEINE 9
2.1.1 AMINOSAEURESTRUKTUREN 10
2.1.1.1 ZWITTERIONENFORM UND PH-ABHAENGIGKEIT 12
2.1.1.2 PK-WERTE UND ISOELEKTRISCHER PUNKT 13
2.1.1.3 D- UND L-KONFIGURATION 14
2.1.2 PROTEINSTRUKTUREN 14
2.1.2.1 PEPTIDBINDUNG 14
2.1.2.2 SULFIDBINDUNG 15
2.1.2.3 AMINOSAEURESEQUENZ 15
2.1.2.4 PRIMAER-, SEKUNDAER-, TERTIAER- UND QUARTERNAERSTRUKTUR 18
2.1.2.5 A-HELIX UND SS-FALTBLATT 18
2.1.3 DENATURIERUNG UND REDENATURIERUNG 20
2.1.4 GLUTATHION- UND METALLOTHIONEINSTRUKTUREN 21
2.1.5 ANTIKOERPER, ANTIGENE 23
2.2 NUCLEINSAEUREN 25
2.2.1 STRUKTUREN 25
2.2.2 DOPPELHELIX, BASENPAARUNG UND REPLIKATION 28
2.2.3 TRANSLATION UND TRANSKRIPTION 31
2.2.4 DIE POLYMERASEKETTENREAKTION 31
2.3 GLYCOPROTEINE 34
2.3.1 STRUKTUREN 34
2.3.1.1 JV-GLYCOSIDISCHE BINDUNG 36
2.3.1.2 O-GLYCOSIDISCHE BINDUNG 38
2.3.2 ISOLIERUNG VON GLYCOPROTEINEN AUS MEMBRANEN 38
2.3.3 ENZYMATISCHE SEQUENZIERUNG DER GLYCANE 43
2.3.4 FREISETZUNG DER GLYCANE AUS PROTEINEN 46
2.3.4.1 ENZYMATISCHE ISOLIERUNG 46
2.3.4.2 HYDRAZINOLYSE 47
2.3.5 MARKIEREN DER GLYCANE 47
2.3.5.1 FLUORESZENZMARKIERUNG MIT 2-AB UND BAP 48
2.3.5.2 RADIOAKTIVE MARKIERUNG 49
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XVI IHALTSVERZEICHNIS
2.4 LIPIDE 50
2.4.1 STRUKTUREN 50
2.4.2 BIOSYNTHESEPROZESSE 54
2.4.2.1 CHOLESTERIN UND SQUALEN 54
2.4.2.2 CERAMID UND CEREBROSID 55
2.5 PHARMAKA, VITAMINE, FARBSTOFFE 56
2.5.1 PHARMAKA 56
2.5.2 WASSERLOESLICHE VITAMINE 58
2.5.3 FETTLOESLICHE VITAMINE 59
2.5.4 LEBENSMITTELFARBSTOFFE/AZOFARBSTOFFE 59
2.6 LITERATUR 61
3 PRAEANALYTISCHE METHODEN 63
3.1 EINFUHRUNG 63
3.2 EXTRAKTIONSTECHNIKEN 63
3.2.1 SOXHLET-EXTRAKTION 65
3.2.2 FLIISSIG-FLUESSIG-EXTRAKTION 66
3.2.3 MIKROWELLENUNTERSTUETZTE EXTRAKTION 67
3.2.4 ULTRASCHALLUNTERSTUETZTE EXTRAKTION 68
3.2.5 UEBERKRITISCHE FLUIDEXTRAKTION 68
3.2.6 HEADSPACE- UND PURGE-AND-TRAP-TECHNIK 69
3.2.7 BESCHLEUNIGTE LOESUNGSMITTELEXTRAKTION 71
3.2.8 FESTPHASENEXTRAKTION 72
3.2.8.1 EIGENSCHAFTEN UND STRUKTUR VON SILICAGELEN 72
3.2.8.2 POLYMERMATERIALIEN 73
3.2.8.3 PRINZIP DER FESTPHASENEXTRAKTION 74
3.2.8.4 SORBENTIEN UND TRENNSYSTEME IN DER SPE 78
3.2.8.4.1 SPE MIT NORMALPHASEN (ADSORPTIONS-SPE) 78
3.2.8.4.2 SPE MIT CHEMISCH GEBUNDENEN PHASEN 79
3.2.8.4.3 SPE MIT REVERSED-PHASE-MATERIALIEN 80
3.2.8.4.4 SPE MIT ANIONENAUSTAUSCHERN 80
3.2.8.4.5 SPE MIT KATIONENAUSTAUSCHERN 81
3.2.9 MATRIX SOLID PHASE DISPERSION 81
3.2.10 FESTPHASENMIKROEXTRAKTION 82
3.2.11 MICROEXTRACTION BY PACKED SORBENTS (MEPS) 85
3.2.12 LIQUID-PHASE MICROEXTRACTION (LPME) 87
3.2.12.1 SINGLE-DROP MICROEXTRACTION (SDME) 87
3.2.12.2 HOLLOW-FIBRE LPME (HF-LPME) 88
3.2.12.3 DISPERSIVE LIQUID-LIQUID MICROEXTRACTION (DLLME) 89
3.2.13 STIR BAR SORPTIVE EXTRACTION (SBSE) 90
3.2.14 DISPOSIBLE PIPETTE EXTRACTION (DPX) 91
[HALTSVERZEICHNIS XVII
3.3 REINIGUNG, ANREICHERUNG VON BIOMOLEKUELEN 92
3.3.1 LYSO2YMBEHANDLUNG 92
3.3.2 AUSSALZEN 93
3.3.3 LYOPHILISATEN 94
3.3.4 DIALYSE 95
3.3.5 ULTRAZENTRIFUGATION 96
3.3.6 BATCH-ADSORPTION 98
3.3.7 FLUESSIG-FLUESSIG-EXTRAKTION - ERHALT DER BIOLOGISCHEN AKTIVITAET 99
3.3.8 FILTRATION 100
3.3.8.1 MIKROFILTRATION 101
3.3.8.2 ULTRAFILTRATION 101
3.3.9 MAGNETIC BEADS 102
3.3.10 RESTRICTED ACCESS MATERIAL (RAM) 103
3.3.11 MOLECULAR IMPRINTING POLYMERS (MIP) 104
3.4 LITERATUR 105
4 CHROMATOGRAPHIE-1: LC - HPLC - UHPLC 107
4.1 EINFUHRUNG UND SYSTEMATIK 107
4.2 SAEULENFLIISSIGCHROMATOGRAPHIE 108
4.2.1 GRUNDLAGEN DES TRENNPROZESSES 109
4.2.1.1 DARSTELLUNG DES TRENNEFFEKTES IN EINER CHROMATOGRAPHIESAEULE 109
4.2.1.2 PEAKVERBREITERUNG IN DER SAEULE UND VAN-DEEMTER-GLEICHUNG 110
4.2.1.3 PEAKVERBREITERUNG AUSSERHALB DER SAEULE 113
4.2.1.4 KENNGROESSEN UND AUSSAGEN DES CHROMATOGRAMMS 113
4.2.2 APPARATIV-METHODISCHE GRUNDLAGEN 117
4.2.2.1 AUFBAU EINER HPLC-APPARATUR 117
4.2.2.1.1 HOCHDRUCKPUMPEN 118
4.2.2.1.2 INJEKTIONSSYSTEME 120
4.2.2.1.3 TRENNSAEULEN UND STATIONAERE PHASEN 120
4.2.2.1.4 SAEULENFIILLTECHNIK 121
4.2.2.1.5 DETEKTOREN MIT MIKRODURCHFLUSSKUEVETTE 123
4.2.2.2 PRAKTISCHE PROBLEME DER HPLC-TRENNUNGEN 124
4.3 TRENNSYSTEME - STATIONAERE PHASEN 128
4.3.1 NORMALPHASENCHROMATOGRAPHIE 128
4.3.2 CHEMISCH MODIFIZIERTE STATIONAERE PHASEN 128
4.3.4 CHIRALE TRENNSYSTEME 131
4.4 NEUE ENTWICKLUNGEN IN DER FLUESSIGCHROMATOGRAPHIE 133
4.4.1 ULTRA FAST HPLC (UHPLC) 134
4.4.1.1 PUMPEN IN DER UHPLC 134
4.4.1.2 INJEKTOREN IN DER UHPLC 135
XVIII IHALTSVERZEICHNIS
4.4.1.3 SAEULEN UND TRENNPHASEN IN DER UHPLC 135
4.4.1.4 DETEKTOREN IN DER UHPLC 138
4.4.2 CORE SHELL MATERIALIEN 139
4.4.3 MONOLITHISCHE TRENNSAEULEN 140
4.4.4 HYDROPHILIC INTERACTION LIQUID CHROMATOGRAPHY (H1LIC) 140
4.5 LITERATUR 142
5 CHROMATOGRAPHIE-2: IONEN VS. BIOMOLEKUELE 145
5.1 GEMEINSAMKEITEN UND UNTERSCHIEDE 145
5.2 FLFISSIGCHROMATOGRAPHIE VON IONEN 146
5.2.1 IONENAUSSCHLUSSCHROMATOGRAPHIE 146
5.2.2 IONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE 147
5.2.3 LONENCHROMATOGRAPIE 150
5.2.4 LONENPAARCHROMATOGRAPHIE 153
5.2.5 LIGANDENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE 154
5.2.6 ANIONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE (HPAEC-PAD) 156
5.3 BIOCHROMATOGRAPHIE 158
5.3.1 CHROMATOGRAPHIE AN HYDROXYLAPATIT 160
5.3.2 GROESSENAUSSCHLUSSCHROMATOGRAPHIE 161
5.3.3 IONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE 164
5.3.4 HYDROPHOBE WECHSELWIRKUNGS-CHROMATOGRAPHIE 165
5.3.5 AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE 167
5.3.6 LEKTINCHROMATOGRAPHIE 169
5.3.7 METALLCHELATCHROMATOGRAPHIE (IMAC) 170
5.3.8 KOVALENTE CHROMATOGRAPHIE 172
5.3.9 CHROMATOGRAPHIE AN POROESEN GLASKUGELN 175
5.3.10 PERFUSIONSCHROMATOGRAPHIE 176
5.4 LITERATUR 177
6 CHROMATOGRAPHIE-3: LC/HPTLC-GC 179
6.1 EINFUHRUNG UND SYSTEMATIK 179
6.2 DC UND HPTLC 180
6.2.1 TRENNSYSTEME 180
6.2.2 PROBENAUFGABE, ENTWICKLUNG UND VISUALISIERUNG 181
6.2.3 AUSWERTUNG VON DC-CHROMATOGRAMMEN 182
6.2.4 APPLIKATIONEN 183
IHALTSVERZEICHNIS XIX
6.3 GC UND CGC 186
6.3.1 AUFBAU EINES GASCHROMATOGRAPHEN 186
6.3.2 TRAEGERGASE 187
6.3.3 INJEKTIONSSYSTEME 187
6.2.4 TRENNSAEULEN UND STATIONAERE PHASEN 188
6.3.5 DETEKTOREN 190
6.3.5.1 FLAMMENIONISATIONSDETEKTOR 192
6.3.5.2 MASSENSPEKTROMETRISCHER DETEKTOR 193
6.3.5.3 ELEKTRONENEINFANGDETEKTOR 193
6.3.5.4 THERMOIONISCHER DETEKTOR 194
6.3.5.5 WAERMELEITFAEHIGKEITSDETEKTOR 196
6.3.5.6 GC-DETEKTOREN IM VERGLEICH 197
6.3.6 GRUNDLAGEN DES TRENNPROZESSES 198
6.3.7 OPTIMIERUNG GASCHROMATOGRAPHISCHER TRENNUNGEN 199
6.3.8 APPLIKATIONEN 200
6.4 LITERATUR 201
7 QUALITAETSSICHERUNG IN DER ANALYTIK (LC, GC) 203
7.1 QUALITAETSBEGRIFF- WAS IST QUALITAET? 203
7.2 DEFINITIONEN ZUR QUALITAETSSICHERUNG 203
7.3 FEHLER, MITTELWERT, STANDARDABWEICHUNG 203
7.4 KENNGROESSEN DER GENAUIGKEIT 204
7.5 KENNGROESSEN DER KALIBRIERUNG UND KALIBRIERFUNKTION 204
7.6 RIICKFUHRBARKEIT 205
7.7 STANDARD-ADDITIONSVERFAHREN 205
7.8 BEREICHSGRENZEN DER METHODE 207
7.9 TRENNSCHAERFE 207
7.10 LITERATUR 208
8 ELEKTROPHORESE 209
8.1 EINFUEHRUNG UND HISTORISCHES 209
XX IHALTSVERZEICHNIS
8.2 THEORIE DER ELEKTROPHORESE 210
8.3 SLAB GEL ELEKTROPHORESE 211
8.3.1 TRAEGERFREIE VERSUS SLAB GEL ELEKTROPHORESE 211
8.3.2 ZONENELEKTROPHORESE 213
8.3.3 SERUMEIWEISSELEKTROPHORESE 214
8.3.4 DISK-ELEKTROPHORESE 217
8.3.5 ISOTACHOPHORESE 219
8.3.6 SDS-POLYACRYLAMID-GEL-ELEKTROPHORESE 220
8.3.7 ISOELEKTRISCHE FOKUSSIERUNG 224
8.4 KAPILLARELEKTROPHORESE 226
8.4.1 APPARATIVE GRUNDLAGEN 226
8.4.1.1 AUFBAU EINER KAPILLARELEKTROPHORESE-APPARATUR 226
8.4.1.2 INJEKTIONSTECHNIKEN 227
8.4.1.3 TRENNKAPILLAREN 228
8.4.1.4 DETEKTION 229
8.4.2 TRENNPHAENOMENE 230
8.4.2.1 ELEKTROPHORESEPRINZIP 230
8.4.2.2 ELEKTROOSMOTISCHER FLUSS 231
8.4.3 TRENNMECHANISMEN 234
8.4.3.1 KAPILLARZONENELEKTROPHORESE 234
8.4.3.2 KAPILLARGELELEKTROPHORESE 234
8.4.3.3 KAPILLAR-ISOTACHOPHORESE 235
8.4.3.4 ISOELEKTRISCHE FOKUSSIERUNG IN KAPILLAREN 236
8.4.3.5 MICELLARE ELEKTROKINETISCHE CHROMATOGRAPHIE 237
8.4.4 CE-APPLIKATIONEN 240
8.5 KAPILLAR-ELEKTROCHROMATOGRAPHIE 242
8.6 LITERATUR 243
9 ATOMSPEKTROSKOPIE 245
9.1 EINFUEHRUNG IN DIE ATOMSPEKTROSKOPIE 245
9.2 ATOMEMISSIONSSPEKTROSKOPIE 247
9.2.1 FLAMMEN-ATOMEMISSIONSSPEKTROSKOPIE 247
9.2.2 INDUKTIV-GEKOPPELTES PLASMA - OES 248
9.3 ATOMABSORPTIONSSPEKTROMETRIE 250
9.3.1 AUFBAU EINES AAS-GERAETES 250
9.3.1.1 FUNKTIONSWEISE EINER HOHLKATHODENLAMPE 251
9.3.2 ATOMISIERUNG 251
9.3.2.1 FLAMMEN-
ABSORPTIONSSPEKTROMETRIE 251
IHALTSVERZEICHNIS XXI
9.3.2.2 GRAPHITROHR-TECHNIK 252
9.3.2.3 HYDRID-TECHNIK IN DER AAS 254
9.3.3 MONOCHROMATOR UND DETEKTOR 254
9.3.4 AENDERUNG DER SPEKTRENVERLAEUFE IN DER AAS 255
9.3.5 QUALITATIVE UND QUANTITATIVE ANALYSE VON ELEMENTEN 256
9.4 ICP - MS 258
9.4.1 PRINZIPIELLER AUFBAU EINES ICP-MS-GERAETES 258
9.4.2 ATOMISIERUNG IM ICP-MS 259
9.4.3 INTERFACE IM ICP-MS 260
9.4.4 QUADRUPOL ALS TRENNSYSTEM IM ICP-MS 261
9.4.5 DETEKTION 261
9.5 LITERATUR 262
10 MOLEKUELSPEKTROSKOPIE 263
10.1 EINFUHRUNG IN DIE SPEKTROSKOPIE 263
10.2 UV/VIS-SPEKTROSKOPIE 264
10.2.1 WELLE-TEILCHEN-DUALISMUS DES LICHTES 265
10.2.2 SPEKTRALBEREICHE UND SPEKTRENSTRUKTUREN 267
10.2.3 KOMPLEMENTAERFARBEN UND CHROMOPHORE 269
10.2.4 VERSCHIEBUNGEN DER WELLENLAENGEN IM SPEKTRUM 272
10.2.5 WECHSELWIRKUNGEN ZWISCHEN STRAHLUNG UND SUBSTANZ 274
10.2.6 LAMBERT-BEER'SCHES GESETZ 275
10.2.7 AUFBAU EINES SPEKTRALPHOTOMETERS 277
10.2.8 APPLIKATIONEN 279
10.3 FLUORESZENZSPEKTROSKOPIE 281
10.4 INFRAROTSPEKTROSKOPIE 283
10.4.1 HISTORISCHES 283
10.4.2 METHODISCHE UND THEORETISCHE GRUNDLAGEN 283
10.4.2.1 INFRAROTSTRAHLUNG IM ELEKTROMAGNETISCHEN SPEKTRUM 284
10.4.2.2 MOLEKUELSCHWINGUNGEN UND -ROTATIONEN 285
10.4.2.3 HANTELMODELL 287
10.4.2.4 HARMONISCHER/ ANHARMONISCHER OSZILLATOR, AUSWAHLREGELN 288
10.4.2.6 GERAETEAUFBAU UND PROBENPRAEPARATION 290
10.4.3 FOURIERTRANSFORMSPEKTROSKOPIE (FTIR) 292
10.4.4 AUSGEWAEHLTE INFRAROTSPEKTREN 294
10.4.4.1 IR-SPEKTRUM VON PARAFFIN 294
10.4.4.2 IR-SPEKTRUM VON ACETON 295
10.4.4.3 IR-SPEKTREN VON ASCORBINSAEURE 296
10.4.4.4 IR-SPEKTREN VON FOLIEN 298
XXII IHALTSVERZEICHNIS
10.5 KERNMAGNETISCHE RESONANZSPEKTROSKOPIE 300
10.5.1 MAGNETFELD, KERNANREGUNG UND KERNSPIN 300
10.5.2 RESONANZBEDINGUNG 304
10.5.3 RELAXATION 305
10.5.4 IMPULSVERFAHREN 306
10.5.5 CHEMISCHE VERSCHIEBUNG 306
10.5.6 SPIN-SPIN-KOPPLUNG 307
10.5.7 AUFBAU EINES NMR-SPEKTROMETERS 309
10.5.8 STRUKTURAUFKLAERUNG 310
10.6 LITERATUR 313
11 MASSENSPEKTROMETRIE 315
11.1 AUFBAU EINES MASSENSPEKTROMETERS 315
11.1.1 EINLASSSYSTEM 316
11.1.2 IONENQUELLE 317
11.1.3 TRENNSYSTEM 318
11.1.4 DETEKTOR (,AUFFANGER") 319
11.1.5 MASSENSPEKTRUM 319
11.2 HARTE IONISATIONSARTEN 320
11.3 WEICHE IONISATIONEN 322
11.3.1 THERMOSPRAY IONISATION 322
11.3.2 CHEMISCHE IONISATION 322
11.3.3 FAST ATOM BOMBARDEMENT 323
11.3.4 FELDIONISATION 324
11.3.5 FEIDDESORPTION 324
11.3.6 ELECTROSPRAY 324
11.3.7 CHEMISCHE IONISATION UNTER ATMOSPHAERENDRUCK 325
11.3.8 ATMOSPHAERENDRUCK PHOTOIONISATION 325
11.3.9 MATRIX UNTERSTUETZTE LASER DESORPTION/IONISATION 325
11.4 SPEKTROMETERTYPEN 326
11.4.1 MAGNETFELD-SEKTORFELD-MASSENSPEKTROMETER 326
11.4.2 FLUGZEITMASSENSPEKTROMETER 327
11.4.3 QUADRUPOLMASSENSPEKTROMETER 328
11.4.4 IONENFALLEN-MASSENSPEKTROMETER 328
11.4.5 TANDEMMASSENSPEKTROMETER 329
11.5 SPEKTRENVERGLEICH: HARTE VS. WEICHE IONISATION 330
11.6 FRAGMENTIERUNGEN IN DER MASSENSPEKTROMETRIE
331
IHALTSVERZEICHNIS XXIII
11.7 LASER DESORPTIONS/IONISATIONS - MS 335
11.7.1 AUFBAU VON MALDI-TOF-MS-GERAETEN 336
11.7.2 PROBENPRAEPARATION 338
11.7.3 MOLEKULARGEWICHTSBESTIMMUNG MITTELS MALDI-MS 340
11.8 LITERATUR 341
12 KOPPLUNGSTECHNIKEN 343
12.1 EINFUHRUNG UND SYSTEMATIK 343
12.2 PROBENVORBEREITUNG - TRENNMETHODE 345
12.2.1 HEAD-SPACE - GC UND PURGE-AND-TRAP - GC 345
12.2.2 SPE - GC UND SPE - LC 345
12.2.3 SPME - GC UND SPME - LC 347
12.3 TRENNMETHODE - TRENNMETHODE 348
12.3.1 LC-TLC 348
12.3.2 LC - LC (SAEULENSCHALTTECHNIK) 349
12.3.3 GC - GC (SAEULENSCHALTTECHNIK) 352
12.3.4 IEF
- SDS-PAGE 353
12.3.5 MS-MS 354
12.4 TRENNMETHODE - MASSENSPEKTROMETRIE 355
12.4.1 GASCHROMATOGRAPHIE - MASSENSPEKTROMETRIE 355
12.4.2 FLUESSIGCHROMATOGRAPHIE - MASSENSPEKTROMETRIE 356
12.4.2.1 *KLASSISCHE" LC-MS-KOPPLUNGEN 357
12.4.2.1.1 MOVING-BELT INTERFACE 357
12.4.2.1.2 N-LC-DIREKTEINLASS-MS 358
12.4.2.1.3 LC-THERMOSPRAY-MS 359
12.4.2.1.4 LC-FAST-ATOM-BOMBARDEMENT-MS 361
12.4.2.1.5 LC-PARTICLE-BEAM-MS 361
12.4.2.2 LC - ATMOSPHAERENDRUCK - MS 363
12.4.2.3 LC - ELECTROSPRAY - MS 365
12.4.2.4 APPLIKATIONEN DER LC - MS - KOPPLUNGEN 367
12.4.3 LC - MALDI - TOF - MS 369
12.4.4 CE-MS 370
12.5 TRENNMETHODE - SPEKTROSKOPIE 371
12.5.1 LC-DAD 371
12.5.2 LC-PER-VIS 374
12.5.3 CGC-FTIR 375
.12.5.4 LC-NMR 377
12.6 LITERATUR 379
XXIV IHALTSVERZEICHNIS
13 OMICS-PROTEOMICS 381
13.1 EINFUEHRUNG IN DIE *OMICS"-TECHNIKEN 381
13.2 DAS PROTEOM UND SEINE BEEINFLUSSUNG 382
13.3 PROTEOMICS VS. *KLASSISCHE" PROTEINANALYTIK 383
13.4 STRATEGIEN IN DER PROTEOM-ANALYTIK 383
13.4.1 ZWEIDIMENSIONALE ELEKTROPHORESE 385
13.4.2 MALD1 - TOF - MS UND PEPTIDE MASS FINGERPRINTING (PMF) 386
13.4.3 LC-ESI-MS/MS 390
13.4.4 AUSBLICK ZUR PROTEOMANALYTIK 393
13.5 LITERATUR 393
14 SENSITIVE UND SPEZIFISCHE BIOANALYTIK 395
14.1 BIOSENSOREN 395
14.1.1 EINFUEHRUNG 395
14.1.2 LACTATSENSOR 397
14.1.3 GLUCOSESENSOR 398
14.2 IMMUNOASSAYS 399
14.2.1 EINFUEHRUNG 399
14.2.2 IMMUNOASSAY VERSUS IMMUNOSENSOR 399
14.2.3 RADIO-IMMUNOASSAY 400
14.2.4 ENZYM-IMMUNOASSAY 401
14.2.5 ENZYMGEKOPPELTER IMMUNABSORPTIONS-TEST 402
14.2.5.1 KOMPETITIVER ELISA-TEST 402
14.2.5.2 NICHT-KOMPETITIVER ELISA-TEST 403
14.2.6 HIV-TEST 404
14.2.7 SCHWANGERSCHAFTS-TEST 405
14.2.8 ELISPOT-TEST 406
14.2.9 DROGENTEST 406
14.1 LITERATUR 407
IHALTSVERZEICHNIS XXV
15 SPEZIELLE UND ANGEWANDTE BIOANALYTIK 409
15.1 PHARMAKA-ANALYTIK MITTELS HPLC-METHODEN 410
15.1.1 WAS SIND ARZNEIMITTEL - WAS SIND DROGEN? 410
15.1.2 SAURE RP-HPLC VON PHARMAKA 410
15.1.3 IONENPAAR-HPLC 411
15.1.4 KAPILLARELEKTROPHORESE 412
15.2 DROGEN-ANALYTIK 413
15.2.1 LEGALE VS. ILLEGALE DROGEN 413
15.2.2 EINFUEHRUNG IN DIE DROGENANALYTIK 413
15.2.3 HPLC-ANALYTIK VON DROGEN 415
15.2.4 BESTIMMUNG VON COCAIN (HAAR-ANALYSE) 416
15.2.5 WISSENSWERTES UEBER COCAIN 419
15.3 POLYCHLORIERTE DIBENZO-P-DIOXINE/DIBENZOFURANE 420
15.3.1 VORKOMMEN, EIGENSCHAFTEN 420
15.3.2 PROBLEMATIK DER DIOXIN-BESTIMMUNG 421
15.3.3 AUFARBEITUNG UND GC-MS-ANALYTIK VON DIOXINEN 422
15.3.4 TOXIZITAET VON DIOXINEN 425
15.4 AMINOSAEUREANALYTIK MIT FLUESSIGCHROMATOGRAPHIE 426
15.4.1 PROBLEMATIK DER AMINOSAEUREANALYTIK 426
15.4.2 POST COLUMN DERIVATISATION 427
15.4.2.1 DERIVATISIERUNG MIT NINHYDRIN 428
15.4.2.2 DERIVATISIERUNG MIT FLUORESCAMIN 429
15.4.3 PRE COLUM DERIVATISATION 429
15.4.3.1 ORFAO-PHTHALDIALDEHYD 430
15.4.3.2 PHENYLISOTHIOCYANAT 430
15.4.3.3 FLUORENYLMETHOXYCARBONYLCHLORID 431
15.4.3.4 DABSYLCHLORID 431
15.4.3.5 DANSYLCHLORID 431
15.4.4 CHROMATOGRAMME VON AMINOSAEURE-TRENNUNGEN 432
15.5 METALLOTHIONEINE, THIOLSPECIES IN ZELLEN 433
15.5.1 METALLOTHIONEINE 433
15.5.2 PHYTOCHELATINE 435
15.5.3 GLUTATHION UND THIOLSPECIES 437
15.5.4 DERIVATISIERUNG UND DETEKTION VON THIOLSPECIES 439
15.5.4.1 ELLMAN'S-REAGENZ 439
15.5.4.2 SANGER'S REAGENZ 440
15.5.4.3 SUBSTITUIERTE MALEINIMIDE 440
15.5.4.4 MONOBROMBIMAN 441
15.5.4.5 O-PHTHALALDEHYD 441
15.5.4.6 ELEKTROCHEMISCHE DETEKTION 442
XXVI IHALTSVERZEICHNIS
15.5.5 HPLC VON THIOLEN UND DISULFIDEN 443
15.5.5.1 KOVALENTE CHROMATOGRAPHIE 443
15.5.5.2 *SAURE" REVERSED-PHASE-HPLC 445
15.5.5.3 ELECTROSPRAY-MS VON GLUTATHION UND METABOLITEN 447
15.5.5.4 ANALYSE BIOLOGISCHER MATRICES 448
15.5.6 KAPILLARELEKTROPHORESE VON THIOLEN UND DISULFIDEN 450
15.5.7 KAPILLARELEKTROPHORESE VON PHYTOCHELATINEN 452
15.6 NUCLEOBASEN UND NUCLEOSIDE IN ZELLEN UND GEWEBEN 455
15.6.1 REVERSED-PHASE- UND IONENPAARCHROMATOGRAPHIE 456
15.6.2 KAPILLARELEKTROPHORESE 458
15.7 ZUCKER IN HYDROLYSATEN UND LEBENSMITTELN 459
15.7.1 CHROMATOGRAPHIE AN AMINOPHASEN 459
15.7.2 HPAEC-PAD-TECHNIK 463
15.7.3 KAPILLARELEKTROPHORESE 465
15.8 ZUCKERANALYTIK UND LACTOSEINTOLLERANZ 466
15.8.1 WAS IST LACTOSEINTOLERANZ 466
15.8.2 ANALYTIK VON GLUCOSE, GALACTOSE UND LACTOSE 468
15.8.3 ENZYMATISCHER ABBAU VON LACTOSE IN MILCH 469
15.9 SAEUREN IN BIOTECHNOLOGISCHEN PROZESSEN 471
15.9.1 ORGANISCHE SAEUREN IN FERMENTATIONSMEDIEN 471
15.9.1.1 IONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE VON ORGANISCHEN SAEUREN 473
15.9.1.2 IONENAUSSCHLUSSCHROMATOGRAPHIE VON ORGANISCHEN SAEUREN 475
15.9.2 FETTSAEUREN IN HEFEN UND BAKTERIEN 477
15.9.2.1 MODIFIZIERUNGEN UND KAPILLARGASCHROMATOGRAPHIE 479
15.9.2.2 KAPILLARGASCHROMATOGRAPHIE - MASSENSPEKTROMETRIE 482
15.10 ENZYME THERMOPHILER MIKROORGANISMEN 483
15.10.1 ISOLIERUNG DER ENZYMFRAKTIONEN 483
15.10.2 BIOCHROMATOGRAPHIE 485
15.11 NUCLEOTIDE IN GEWEBEN UND VON DNA-SPALT-PRODUKTEN 488
15.11.1 IONENPAARCHROMATOGRAPHIE 490
15.11.2 KAPILLARGELELEKTROPHORESE VON DNA-FRAGMENTEN 491
15.12 GLYCAN-STRUKTUREN VON GLYCOPROTEINEN 495
15.12.1 PROFILANALYSEN DER GLYCANE 497
15.12.1.1 MONOSACCHARID-MAPPING MITTELS HPAEC-P AD 497
15.12.1.2 N-GLYCAN-TRENNUNGEN MIT SPEZIELLEN HPLC-METHODEN 498
15.12.2 STRUKTURANALYSEN DER GLYCANE 500
15.12.2.1 GC-MS UND METHYLIERUNGSANALYSE 500
15.12.2.2 FAST-ATOM-BOMBARDEMENT 502
15.12.2.3 LC-ELECTROSPRAY-MS 503
IHALTSVERZEICHNIS XXVII
15.12.2.4 MALD1-T0F-MS 503
15.12.2.5 MALDI-PSD-TOF-MS 505
15.12.2.6 'H-NMR 509
15.13 PHOSPHOLIPIDE IN BIOLOGISCHEN EXTRAKTEN 511
15.13.1 FLUESSIGCHROMATOGRAPHIE 511
15.13.2 NMR-SPEKTROSKOPIE 515
15.14 LITERATUR 519
KAPITEL 15.5 519
KAPITEL 15.6 520
KAPITEL 15.7 521
KAPITEL 15.9 521
KAPITEL 15.10 522
KAPITEL 15.11 523
KAPITEL 15.12 524
KAPITEL 15.13 525 |
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