Etablierung eines In-Vitro-Spermien-Penetrationstests zur Analyse boviner Samenzellen:
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Giessen
Laufersweiler
2014
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG UND FRAGESTELLUNG 1
2 LITERATURUEBERSICHT 2
2.1 IN-VITRO-PENETRATIONSTESTS ZUR BEURTEILUNG DER SAMENZELLQUALITAET 2
2.1.1 IN-VITRO-PENETRATIONSTESTS IN DER HUMANMEDIZIN 2
2.1.2 IN-VITRO-PENETRATIONSTESTS IN DER VETERINAERMEDIZIN 12
3 MATERIAL UND METHODEN 18
3.1 HERSTELLUNG DER POLYACRYLAMID-GELE 18
3.1.1 HERSTELLUNG DES 2 %-IGEN POLYACRYLAMID-GELS (PAG 2) 18
3.1.2 HERSTELLUNG DES 1,9 %-IGEN POLYACRYLAMID-GELS (PAG 1,9) 19
3.1.3 HERSTELLUNG DER PUFFERLOESUNGEN 19
3.1.3.1 HERSTELLUNG VON PUFFER 1 19
3.1.3.2 HERSTELLUNG VON PUFFER
II 19
3.1.3.3 HERSTELLUNG VON PUFFER III 20
3.1.3.4 HERSTELLUNG DER PHOSPHATGEPUFFERTEN SALZLOESUNG ZUR DIALYSE 20
3.2 HERSTELLUNG DER AGAROSE-GELE 21
3.2.1 HERSTELLUNG DES 0,1 %-IGEN AGAROSE-GELS 21
3.2.2 HERSTELLUNG DES 0,2 %-IGEN AGAROSE-GELS 21
3.2.3 HERSTELLUNG DES 0,3 %-IGEN AGAROSE-GELS 22
3.2.4 HERSTELLUNG DES 0,4 %-IGEN AGAROSE-GELS 22
3.2.5 HERSTELLUNG DES 0,5 %-IGEN AGAROSE-GELS 22
3.2.6 HERSTELLUNG DER PHOSPHATGEPUFFERTEN SALZLOESUNG 22
3.3 SPERMAVORBEREITUNG 23
3.3.1.1 VERSUCHSAUFBAU I - VORBEREITUNG UND
UNTERSUCHUNG DES
TIEFGEFRIERSPERMAS 23
3.3.1.2 LICHTMIKROSKOPISCHE BEURTEILUNG DES SPERMAS IM EOSIN-AUSSTRICH
.. 24
3.3.1.3 COMPUTERGESTUETZTE SPERMAANALYSE 24
3.3.2 VERSUCHSAUFBAU II - NATIVSPERMA 26
3.3.2.1 GEWINNUNG UND
UNTERSUCHUNG DER EJAKULATE 26
3.3.2.2 EINFRIEREN DES FRISCHSPERMAS 27
3.4 MIGRATIONSTEST 28
3.4.1 AUSWAHL DER GEEIGNETEN KAPILLAREN 28
I
HTTP://D-NB.INFO/1049465628
3.4.2 DURCHFUEHRUNG DES MIGRATIONSTESTS MITTELS POLYACRYLAMID-GEL 28
3.4.3 DURCHFUEHRUNG DES MIGRATIONSTESTS MITTELS AGAROSE-GEL 30
3.4.4 AUSWERTUNG DES MIGRATIONSTESTS 31
3.5 STATISTISCHE AUSWERTUNG 35
4 ERGEBNISSE 37
4.1 VORVERSUCHE 37
4.1.1 SCHWIERIGKEITEN BEI DER HERSTELLUNG DER SYNTHETISCHEN MEDIEN 37
4.1.2 BILDUNG VON LUFTBLASEN 37
4.1.3 AUSWAHL DER GEEIGNETEN PAILLETTEN/KAPILLAREN 38
4.2 HAUPTVERSUCHE 39
4.2.1 VERSUCHSAUFBAU I - TIEFGEFRIER-SAMEN 39
4.2.1.1 SPERMATOLOGISCHE PARAMETER 39
4.2.1.2 PENETRATIONSTEST IN AGAROSE-GEL 40
4.2.1.3 PENETRATIONSTEST IN POLYACRYLAMID-GEL 44
4.2.1.3.1 UNTERSCHIED ZWISCHEN ANSATZ 1 UND ANSATZ 2 44
4.2.1.3.2 ERGEBNISSE DES PENETRATIONSTESTS IN BEZUG AUF DIE EINZELNEN
MEDIEN 44
4.2.1.3.3 KORRELATIONEN ZWISCHEN DEN AUSWERTMETHODEN 53
4.2.1.3.4 KORRELATIONEN ZWISCHEN DEN AUSWERTMETHODEN UND PARAMETERN
DER SPERMATOLOGISCHEN UNTERSUCHUNG 56
4.2.2 VERSUCHSAUFBAU II - NATIVSPERMA 62
4.2.2.1 EINFLUSS DER BEHANDLUNG DER EJAKULATE 62
4.2.2.2 ERGEBNISSE DES PENETRATIONSTESTS VOR UND NACH KRYOKONSERVIERUNG.
69
5 DISKUSSION 74
5.1 DISKUSSION DER FRAGESTELLUNG 74
5.2 DISKUSSION DER METHODE 75
5.3 DISKUSSION DER ERGEBNISSE 78
5.3.1 PENETRATIONSMEDIUM 78
5.3.2 AUSWERTUNG DES PENETRATIONSTESTS 79
5.3.3 AUSWERTMETHODEN UND SPERMATOLOGISCHE UNTERSUCHUNG 80
5.3.4 PUFFER 82
5.3.5 BEHANDLUNG DER SAMENZELLEN 83
5.3.6 ERGEBNISSE DES PENETRATIONSTESTS VOR UND NACH
KRYOKONSERVIERUNG.... 84
II
5.3.7 EMPFEHLUNG ZUR DURCHFUEHRUNG
DES KAPILLARPENETRATIONSTESTES 86
5.3.8 WEITERER FORSCHUNGSBEDARF 86
6 ZUSAMMENFASSUNG 87
7 SUMMARY 89
8 LITERATURVERZEICHNIS 91
III
|
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