Die Rolle der Tyrosinphosphorylierungsmotive des Onkoproteins CagA von Helicobacter pylori:
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2014
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| adam_text | AUS DEM MAX VON PETTENKOFER-INSTITUT
FUER HYGIENE UND MEDIZINISCHE MIKROBIOLOGIE
LEHRSTUHL BAKTERIOLOGIE
DIREKTOR: PROF. DR. DR. J. HEESEMANN
DIE ROLLE DER
TYROSINPHOSPHORYLIERUNGSMOTIVE
DES ONKOPROTEINS CAGA
VON
HELICOBACTER PYLORI
DISSERTATION
ZUM ERWERB DES DOKTORGRADES DER MEDIZIN
AN DER MEDIZINISCHEN FAKULTAET DER
LUDWIG-MAXIMILIANS-UNIVERSITAET MUENCHEN
VORGELEGT VON
FLORIAN GILG
AUS MEMMINGEN
2014
HTTP://D-NB.INFO/1058456431
INHALTSVERZEICHNIS
IV
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
1.1 BEDEUTUNG VON INFEKTIONSKRANKHEITEN 1
1.2 ENTDECKUNG UND EPIDEMIOLOGIE VON HELICOBACTER PYLORI 1
1.3 PATHOGENESE H. PYLORI ASSOZIIERTER KRANKHEITEN 2
1.4 DIAGNOSTIK UND THERAPIE 4
1.5 VIRULENZFAKTOREN VON H. PYLORI. 4
1.6 DIE CAG-PATHOGENITAETSINSEL UND DAS CAGA PROTEIN 6
1.7 MONGOLISCHER GERBIL (MERIONES UNGUICULATUS) ALS MODELLTIER 8
1.8 ZIELSETZUNG 9
2 MATERIAL UND METHODEN 10
2.1 MATERIAL 10
2.1.1 BAKTERIENSTAEMME 10
2.1.2 ZELLLINIE 12
2.1.3 PLASMIDE UND VEKTOREN 12
2.1.4 OLIGONUKLEOTIDE 13
2.1.5 ANTIKOERPER 14
2.1.6 ENZYME UND PROTEINE 15
2.1.7 MOLEKULARGEWICHTSMARKER 15
2.1.8 NAEHRMEDIEN UND PLATTEN 15
2.1.9 ANTIBIOTIKA UND ZUSAETZE 16
2.1.10 PUFFER UND LOESUNGEN 16
2.1.11 CHEMIKALIEN 18
2.1.12 GERAETE UND APPARATUREN 18
2.1.13 VERBRAUCHSMITTEL 19
2.2 METHODEN 19
2.2.1 ARBEITEN MIT TIEREN 19
2.2.2 ARBEITEN MIT BAKTERIEN 20
2.2.3 ARBEITEN MIT ZELLKULTUREN 22
2.2.4 ARBEITEN MIT DNA 24
2.2.5 ARBEITEN MIT PROTEINEN 28
2.2.6 IL8-ELISA 31
3 ERGEBNISSE 32
3.1 GERICHTETE MUTAGENESE VON CHROMOSOMALEM CAGA 32
3.1.1 PLATZIERUNG DER RPSL-ERM-KASSETTE IN DER EPIYA-REGION VON CAGA 33
3.1.2 KONSTRUKTION DER CAGA 3 REPEAT REGIONS MIT UNTERSCHIEDLICHER
ANZAHL
AN EPIYA MOTIVEN 34
3.1.3 TRANSFORMATION DER KONSTRUKTE PFGL UND PFG2 34
3.2 KOMPLEMENTATION MIT MUTAGENISIERTEM CAGA MITTELS INTRINSISCHEM
PLASMID 36
3.2.1 HERSTELLUNG DER CAGA VARIANTEN AUF DEM PLASMID PLH 36
3.2.2 TRANSFORMATION DER PLASMIDE IN H. PYLORI COG^-DELETIONSMUTANTEN 37
INHALTSVERZEICHNIS V
3.2.3 KOLONISIERUNGSVERSUCHE IM MONGOLISCHEN GERBIL 40
3.3 CHARAKTERISIERUNG KLINISCHER H. PYLORI ISOLATE 41
3.3.1 KOLONISIERUNG IM MONGOLISCHEN GERBIL 41
3.3.2 EXPRESSIONSANALYSEN VON CAGA UND VACA GENEN 42
3.3.3 GENETISCHE KARTIERUNG DER CAGA UND VACA SEQUENZEN 44
3.3.4 CAGA TYROSINPHOSPHORYLIERUNG 46
3.3.5 11-8 INDUKTION IN VITRO 46
3.3.6 NIGERIANISCHES PATIENTENISOLAT H. PYLORI 1-20A 48
3.3.7 ZUSAMMENFASSUNG DER CHARAKTERISIERUNG VERWENDETER STAEMME 50
4 DISKUSSION 52
4.1 KLONIERUNGEN IN H. PYLORI B8 52
4.2 KOLONISIERUNGSFAHIGKEIT VON H. PYLORI B8 53
4.3 EINORDNUNG DER ARBEIT IM KONTEXT ZUR AKTUELLEN LITERATUR 57
4.4 AUSBLICK 58
5 ZUSAMMENFASSUNG 59
6 LITERATURVERZEICHNIS 60
7 ANHANG 70
8 LEBENSLAUF FEHLER! TEXTMARKE NICHT DEFINIERT.
9 DANKSAGUNGEN 73
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