Renale Elektrolyt-Volumen-Homöostase und basolaterale Kaliumleitfähigkeit des distalen Konvoluts: ontogenetische und pathophysiologische Aspekte
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INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 5
1.1 GRUNDLAGEN DER NIERENFUNKTION S
1.2 BETEILIGUNG DER NIERE AN DER ELEKTROLYT-HOMOEOSTASE 5
1J ENTWICKLUNG DER NIERE 8
1.3.1 ORGANOGENESE UND MORPHOGENESE 8
1.3.2 FUNKTIONELLE REIFUNG 8
1.4 BEDEUTUNG DER KALIUMLEITFLHIGKEIT FOR DIE TRANSPORTFUNKTION DES
DISTALEN KONVOLUTS 11
1.5 KCNJ10 UND KCNJ16 - KALIUMEINWAERTSGLEICHRICHTER IM BASOLATERALEN DCT
13
1.5.1 EIGENSCHAFTEN UND REGULATION VON KCNJ10 UND KCNJ16 13
1.5.2 ORGANSPEZIFISCHE EXPRESSION UND FUNKTION VON KCNJ 10 UND KCNJ 16
14
1.5.3 KCNJIO-KNOCKOUT-MAUS UND IHR ZNS-PHAENOTYP 16
1.6 HERIDITAERE HYPOKALIAEMISCHE SALZVERLUST-TUBULOPATHIEN 17
1.6.1 ANTENATALES BAITTER-SYNDROM (BS TYP I UND II) 17
1.6.2 KLASSISCHES BARTTER-SYNDROM (BS TYP III) 18
1.6.3 BAITTER-SYNDROM MIT SENSORINEURALER TAUBHEIT (BS TYP IV) 18
1.6.4 GITELMAN-SYNDROM (GS) 18
1.7 EAST/SESAME- EINE *NEUE UND SELTENE TUBULOPATHIE 19
1.7.1 KLINISCHER BEFUND - NEUROLOGISCHE UND RENALE FUNKTIONSSTOERUNGEN 19
1.7.2 GENETISCHER ASPEKT - AUTOSOMAL-REZESSIVER EIBGANG UND
*LOSS-OF-FIINCTION DES KCNJ 10 20
1.7.3 FUNKTIONELLE ANALYSEN - GENMANIPULIERTE TIEIMODELLE UND HETEROLOGE
EXPRESSIONSSYSTEME 20
2 ZIELSETZUNG 22
2.1 POSTNATALE NIERENENTWICKLUNG 22
2.2 WARUM VERURSACHEN MUTATIONEN DES KCNJ10 EIN SALZVERLUSTSYNDROM? 22
3 MATERIAL UND METHODEN 24
3.1 MATERIAL 24
3.1.1 GERATE 24
3.1.2 VEIBRAUCHSMATERIAL 25
3.1.3 CHEMIKALIEN, ENZYME, KITS 25
3.1.4 PUFFER UND LOSUNGEN 2T_
1
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INHALTSVERZEICHNIS
3.1.5 OLIGONUKLEOTIDE 28
3.1.6 PLASMIDE 28
3.1.7 ANTIKOERPER / FLUORESZENZFARBSTOFFE 29
3.1.8 MAUSE. ZELLEN 29
3.1.9 SOFTWARE UND ONLINE-DIENSTE 29
3.2 TIEREXPERIMENTE 30
3.2.1 VERSUCHSTIERE UND GENOTYPISIERUNG DER KCNJIO-KNOCKOUT-MAUS 30
3.2.2 ENTWICKLUNGSSTUDIEN AN WILDTYP-MAUSEN UND KCNJ1O-KNOCKOUT-MSUSEN
31
3.2.3 STATISTISCHE AUSWERTUNG UND DARSTELLUNG DER DATEN 31
U HISTOLOGISCHE VERFAHREN 32
3.3.1 GEWEBEFIXIERUNG DURCH ARTERIELLE PERFUSION 32
3.3.2 IMMUN
FLUORESZENZFAERBUNGEN AUF GEFRIERSCHNITTEN 33
3.3.3 HAEMATOXYLIN/EOSIN-FAERBUNG (HE-FAERBUNG) AUF PARAFFIN SCHNITTEN 33
3.3.4 MIKROSKOPIE 34
3.4 MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN 35
3.4.1 POLYMERASEKETTENREAKTION 35
3.4.2 RESTRIKTIONSVEIDAU UND DEPHOSPHORYLIERUNG 36
3.4.3 LIGATION 37
3.4.4 TRANSFORMATION 37
3.4.5 OBERNACHTKULTUREN 38
3.5 ZELLKULTUR 39
3.5.1 AUSSAEEN 39
3.3.2 TRANSFEKTION 39
3.6 ELEKTROPBYSIOLOGIE-PATCH-CLAMP-TECHNIK 41
3.6.1 WHOLE-CELL-EXPERIMENTE 41
3.6.2 EINZELKANAL-EXPERIMENTE 42
3.6.3 ERHEBUNG UND DARSTELLUNG DER DATEN 42
4 ERGEBNISSE 43
4.1 ENTWICKLUNGSPROFIL VON WILDTYP-MLUSEN 43
4.1.1 KORPERWACHSTUM 43
4.1.2 MORPHOLOGIE UND TRANSPORTPIOTEINEXPRESSION IN DER NIERE 44
4.1.2.1 MORPHOLOGIE 44
4.1.2.2 ENTWICKLUNG DER TRANSPORTPROTEINEXPRESSION 46
4.1.3 RENALE AUSSCHEIDUNGSFUNKTION: KREATININ UND KATIONEN 53
4.1.3.1 KREATININ 53
4.1.3.2 KATIONEN 53
2
INHALTSVERZEICHNIS
4.2 RENALER PHLNOTYP DER KCNJIO-KNOCKOUT-MAUS 56
4.2.1 OBERLEBEN UND KORPERWACHSTUM - WILDTYPEN, HETEROZYGOTE UND
KNOCKOUTS 36
4.2.2 MOIPHOLOGIE EINER KCNJ IO-KNOCKOUT-NIERE 37
4.2.3 RENALE AUSSCHEIDUNGSLIINKTION - WILDTYPEN, HETEROZYGOTE UND
KNOCKOUTS 37
4.2.3.1 KREATININ 58
4.2.3.2 KATIONEN 58
4.3 ELEKTROPHYSIOLOGIE - HKCNJIO, HKCNJ16 UND DIE MUTATION HKCNJIO R65P
60
4.3.1 WHOLE-CELL-EXPERIMENTE: MEMBRANPOTENTIAL UND BARIUM-EFFEKT 60
4.3.2 EINZELKANAL-EXPERIMENTE: EINZELKANALSTROM UND
OFLENWAHRSCHEINLICHKEIT 63
S DISKUSSION 64
5.1 DYNAMIK DER RENALEN ENTWICKLUNG BEI C57BL6-MIUSEN 64
5.1.1 VERSUCHSTIER MAUS 64
5.1.2 STRUKTURELLE UND FUNKTIONELLE ONTOGENESE DER NIERE 64
5.1.2.1 RENALER WASSERMETABOLISMUS 63
5.1.2.2 RENALE ELEKTROLYTAUSSCHEIDUNG 66
5.1.2.3 KREATININKONZENTRATION - EIN KRITISCHER PARAMETER 69
5.1.2.4 SCHLUSSFOLGERUNG 69
5.2 PHYSIOLOGISCHE UND PATHOLOGISCHE EIGENSCHAFTEN DER KALIUMKANLLE KCNJ
10 UND KCNJ16 70
5.2.1 BEDEUTUNG DES KCNJ10 UND KCNK16 FUER DIE RENALE
ELEKTROLYTHOMOOSTASE 70
5.2.2 ENTWICKLUNGSABHAENGIGE EXPRESSION VON KCNJ10 UND KCNJ 16 IN DER
NIERE VON WT-MAEUSEN 72
3.2.3 RENALER PHAENOTYP DER KCNJIO-KNOCKOUT-MAUS 73
5.2.3.1 POSTNATALE ENTWICKLUNG UND NEPHIOGENESE 73
3.2.3.2 RENALE AUSSCHEIDUNGSFUNKTION 74
5 J ELEKTROPHYSIOLOGISCHE UND BIOCHEMISCHE ASPEKTE EINIGER EAST/SESAM
E-MUTANTEN,
INSBESONDERE KCNJ 10 R65P 78
5.3.1 ELEKTROPHYSIOLOGISCHE EIGENSCHAFTEN DER MUTANTE KCNJ 10 R65P SOWIE
DER EINFLUSS DER
HETEROMERBILDUNG MIT KCNJ 16 WT 78
5.3.2 EAST/SESAME-MUTATIONEN DER ERSTEN TRANSMEMBIANDOMANE -
LOKALISATION, FUNKTION UND
PROTEIN ALIGNMENT 79
3.3.3 EINIGE EAST/SESAME-MUTATIONEN VERANDERN DIE PH-SENSITIVITFLT 81
6 ZUSAMMENFASSUNG 84
7 LITERATURVERZEICHNIS 86
8 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 96
3
INHALTSVERZEICHNIS
9 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 98
10 ANHANG 100
10.1 BISHERIGE VEROEFFENTLICHUNGEN UND KONGRESSBEITRLGE 100
10.2 LEBENSLAUF 101
10J EIDESSTATTLICHE ERKLAERUNG 103
11 DANKSAGUNG 104
4
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| topic | Kaliumion (DE-588)4163080-4 gnd Elektrolytgleichgewicht (DE-588)4151827-5 gnd Niere (DE-588)4042270-7 gnd |
| topic_facet | Kaliumion Elektrolytgleichgewicht Niere Hochschulschrift |
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