Etablierung eines transgenen Mausmodells mit fluoreszierendem P2X2-Fusionsprotein:
Saved in:
| Main Author: | |
|---|---|
| Format: | Thesis Electronic Software eBook |
| Language: | German |
| Published: |
2013
|
| Subjects: | |
| Online Access: | Inhaltsverzeichnis |
| Physical Description: | 153, VII S. Ill., graph. Darst. 12 cm |
Staff View
MARC
| LEADER | 00000nmm a2200000 c 4500 | ||
|---|---|---|---|
| 001 | BV042017088 | ||
| 003 | DE-604 | ||
| 005 | 00000000000000.0 | ||
| 006 | a m||| 00||| | ||
| 007 | co|uuu---uuuuu | ||
| 008 | 140808s2013 gw |||| q||u| ||||||ger d | ||
| 015 | |a 14,H06 |2 dnb | ||
| 016 | 7 | |a 1050392779 |2 DE-101 | |
| 035 | |a (OCoLC)889537247 | ||
| 035 | |a (DE-599)DNB1050392779 | ||
| 040 | |a DE-604 |b ger |e rakddb | ||
| 041 | 0 | |a ger | |
| 044 | |a gw |c XA-DE | ||
| 049 | |a DE-355 | ||
| 084 | |a 610 |2 sdnb | ||
| 100 | 1 | |a Grohmann, Marcus |d 1979- |e Verfasser |0 (DE-588)1049594290 |4 aut | |
| 245 | 1 | 0 | |a Etablierung eines transgenen Mausmodells mit fluoreszierendem P2X2-Fusionsprotein |c vorgelegt von Marcus Grohmann |
| 264 | 1 | |c 2013 | |
| 300 | |a 153, VII S. |b Ill., graph. Darst. |c 12 cm | ||
| 336 | |b txt |2 rdacontent | ||
| 337 | |b c |2 rdamedia | ||
| 338 | |b cd |2 rdacarrier | ||
| 502 | |a Leipzig, Univ., Diss., 2014 | ||
| 655 | 7 | |0 (DE-588)4113937-9 |a Hochschulschrift |2 gnd-content | |
| 856 | 4 | 2 | |m DNB Datenaustausch |q application/pdf |u http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=027458854&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA |3 Inhaltsverzeichnis |
| 999 | |a oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-027458854 | ||
Record in the Search Index
| _version_ | 1804152432767270912 |
|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
INHALT
1 EINFUEHRUNG S.1
1.1 BEDEUTUNG VON SCHMERZ S.1
1.2 DEFINITION VON SCHMERZ S.2
1.3 VON DER NOZIZEPTION ZUR SCHMERZERFAHRUNG S.3
1.3.1 ANATOMIE DES SCHMERZES S.3
1.3.2 NOZIZEPTOREN S.7
1.4 REZEPTOREN DER
NOZIZEPTOREN S.8
1.4.1 DIETRANSIENTE-REZEPTOR-POTENZIAL (TRP)-FAMILIE S.8
1.4.2 PROTONEN-AKTIVIERTE LONENKANAELE S.9
1.4.3 SPANNUNGSABHAENGIGE KANAELE S.9
1.4.4 PURINERGE REZEPTOREN S.9
1.5 ATP EIN
EXTRAZELLULAERES SIGNALMOLEKUEL S.10
1.6 LONOTROPE P2X-REZEPTOREN S.13
1.7 P2X2-UNTEREINHEIT S.14
1.8 P2X-REZEPTOREN
AUF PRIMAEREN SENSORISCHEN
NEURONEN S.15
1.9 MODELLORGANISMEN FUER BIOLOGISCHE
FRAGESTELLUNGEN S.17
1.9.1 DIE MAUS ALS MODELLORGANISMUS S.18
1.9.2 DIE GENETISCHE MANIPULATION VON MAEUSEN S.18
1.10 ANWENDUNGEN REKOMBINANTER FUSIONSPROTEINE S.20
1.10.1 AFFINITAETS-TAGGING VON PROTEINEN S.21
1.10.2 FLUORESZENZMARKER S.21
HTTP://D-NB.INFO/1050392779
INHALTSVERZEICHNIS
2 ZIELSETZUNG 5.25
3 MATERIAL UND METHODEN S.27
3.1 MATERIAL S.27
3.1.1 CHEMIKALIEN S.27
3.1.2 VERBRAUCHSMATERIALIEN S.27
3.1.3 GERAETE S.27
3.1.4 ENZYME S.29
3.1.5 REAKTIONSSYSTEME S.29
3.1.6 VERWENDETE ORGANISMEN S.30
3.1.6.1 BAKTERIENSTAEMME S.30
3.1.6.2 EUKARYONTISCHE ZELLLINIEN S.30
3.1.6.3 XENOPUS LAEVIS OOZYTEN S.30
3.1.6.4 MAUSLINIEN S.31
3.1.7 PLASMIDE S.32
3.1.8 OLIGONUKLEOTIDE S.32
3.1.9 ANTIKOERPER S.37
3.1.10 DATENBANKEN UND SOFTWARE S.37
3.1.11 PUFFER, MEDIEN UND LOESUNGEN S.38
3.2 METHODEN S.38
3.2.1 STERILISATION S.38
3.2.2 MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN S.38
3.2.2.1 KONZENTRATIONSBESTIMMUNG VON NUKLEINSAEUREN S.39
3.2.2.2 DNA-AMPLIFIKATION MITTELS POLYMERASE KETTENREAKTION S.39
3.2.2.3 DNA-VERDAU MIT RESTRIKTIONSENDONUKLEASEN S.40
3.2.2.4 ERZEUGUNG VON NICHT-KOHAESIVEN DNA-FRAGMENTEN S.40
3.2.2.5 DEPHOSPHORYLIERUNG VON DNA-ENDEN S.40
3.2.2.6 LIGATIONSREAKTION S.41
INHALTSVERZEICHNIS
3.2.2.7 KLONIERUNG VON PCR-FRAGMENTEN S.41
3.2.2.8 TRANSFORMATION VON COLI S.41
3.2.2.9 KRYOKONSERVIERUNG VON E. COLI-KLONEN S.43
3.2.2.10 PRAEPARATION VON PLASMID-DNA AUS
E. COLI
S.43
3.2.2.11 PRAEPARATION GENOMISCHER DNA S.44
3.2.2.12 PRAEPARATION VON BAC-DNA ZUM SCREENING S.44
3.2.2.13 BAC-DNA PRAEPARATION FUER PRONUKLEUS-INJEKTIONEN S.45
3.2.2.14 PRAEPARATION VON RNA AUS MAUSGEWEBE S.45
3.2.2.15 AUFTRENNUNG VON NUKLEINSAEUREN S.46
3.2.2.16 DNA-ISOLATION AUS AGAROSEGELEN S.47
3.2.2.17 DNA-SEQUENZIERUNG S.47
3.2.2.18 CDNA-SYNTHESE S.47
3.2.2.19 CRNA-SYNTHESE S.47
3.2.2.20 REVERSE TRANSKRIPTASE (RT)-PCR S.48
3.2.2.21 KLONIERUNGSSTRATEGIEN S.48
3.2.2.22 ORTSGERICHTETE MUTAGENESE S.49
3.2.2.23 HOMOLOGE REKOMBINATION IM COLI STAMM SW102 S.51
3.2.3 PROTEINBIOCHEMISCHE METHODEN S.51
3.2.3.1 MIKROINJEKTION VON CRNA IN OOCYTEN VON XENOPUS LAEVIS S.51
3.2.3.2 METABOLISCHE MARKIERUNG VON PROTEINEN IN OOZYTEN S.52
3.2.3.3 OBERFLAECHENMARKIERUNG VON PROTEINEN IN OOZYTEN S.52
3.2.3.4 NICKEL-CHELAT-AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE S.52
3.2.3.5 STREPTAVIDIN-AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE S.54
3.2.3.6 GEWINNUNG VON PROTEINEXTRAKTEN S.54
3.2.3.7 POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE (PAGE) S.55
3.2.3.8 COOMASSIE-FAERBUNG VON POLYACRYLAMID-GELEN S.57
3.2.3.9 ELEKTROTRANSFER AUF POLYVINYLIDENFLUORID-MEMBRANEN S.57
3.2.3.10 IMMUNBLOT-ANALYSE (WESTERN BLOT) S.58
3.2.4 ERZEUGUNG UND HALTUNG TRANSGENER MAEUSE S.58
3.2.4.1 MANIPULATION DES MAUSEMBRYOS S.58
INHALTSVERZEICHNIS
3.2.4.2 BIOPSIEN ZUR GENOTYPISIERUNG S.59
3.2.5 IMMUNHISTOCHEMISCHETECHNIKEN S.59
3.2.5.1 FIXATION VON MAUSGEWEBE DURCH KARDIALE PERFUSION S.59
3.2.5.2 IMMERSIONSFIXIERUNG VON GEHIRNEN S.60
3.2.5.3 HERSTELLUNG VON SCHNITTPRAEPARATEN S.60
3.2.5.4 IMMUNHISTOCHEMISCHE ANALYSE VON GEWEBESCHNITTEN S.60
3.2.5.5 TYRAMID-SIGNALVERSTAERKUNG S.61
3.2.5.6 IMMUNZYTOCHEMISCHE FAERBUNGEN S.61
3.2.6 ZELLKULTURTECHNIKEN S.62
3.2.6.1 PRIMAERZELLKULTUREN AUS HINTERWURZELGANGLIEN S.62
3.2.6.2 KRYOKONSERVIERUNG VON EUKARYONTISCHEN ZELLLINIEN S.63
3.2.6.3 TRANSFEKTION ADHAERENTER ZELLEN S.63
3.2.6.4 PFA-FIXIERUNG VON ZELLEN IN KULTUR S.64
3.2.7 MIKROSKOPISCHE TECHNIKEN S.64
3.2.7.1 EPIFLUORESZENZMIKROSKOPIE S.64
3.2.7.2 KONFOKALMIKROSKOPIE S.65
4 ERGEBNISSE S.66
4.1 P2X2-CDNA-KONSTRUKTE S.66
4.1.1 AUSWAHL DER AFFINITAETS-TAGS S.67
4.1.2 AUSWAHL DES FLUORESZENZPROTEINS S.68
4.1.3 HETEROLOGE EXPRESSION IN
XENOPUSLAEVIS OOCYTEN
S.68
4.1.4 ERZEUGUNG VON MURINEN P2X2-REZEPTOR CDNA-KONSTRUKTEN S.70
4.1.5 HETEROLOGE EXPRESSION IN HEK293-ZELLKULTUR S.72
4.2 REKOMBINATIONSVERMITTELTE GENETISCHE
MUTAGENESE S.75
4.2.1 AUSWAHL DES BAC-KLONS S.76
4.2.2 VERIFIZIERUNG DES BAC-KLONS S.76
4.2.3 HOMOLOGE REKOMBINATION S.78
4.2.3.1 POSITIVSELEKTION AUF MINIMALMEDIUM S.79
INHALTSVERZEICHNIS
4.2.3.2 NEGATIVSELEKTION MIT DESOXYGALAKTOSE-MEDIUM S.81
4.2.3.3 SEGREGATION DER BACS IN DEN POSITIVEN MISCHKLONEN S.82
4.3 DNA-AUFREINIGUNG FUER DIE MIKROINJEKTION S.83
4.4 DNA-MIKROINJEKTION DES
BAC-KONSTRUKTS
S.85
4.5 GENOTYPISIERUNG S.85
4.6 RNA DES
TRANSGENEN REZEPTORS S.86
4.7 AFFINITAETSCHROMATOGRAFIE DES
FUSIONSPROTEINS S.87
4.8 SCREENING
NACH
DEM TRANSGENEN REZEPTOR
EX VIVO S.89
4.8.1 PRIMAERZELLKULTUR VON GANGLIEN DES HINTERHORNS S.89
4.8.2 VERGLEICH DER EXPRESSION DES FUSIONSPROTEINS S.92
4.9 IMMUNHISTOCHEMISCHE DARSTELLUNG DER FUSIONS-UNTEREINHEIT S.94
4.9.1 DARSTELLUNG IM HINTERWURZELGANGLION S.94
4.9.2 EXPRESSION IM ZENTRALNERVENSYSTEM S.94
4.9.2.1 EXPRESSION DES FUSIONSPROTEINS IM RUECKENMARK S.95
4.9.2.2 EXPRESSION IN DER MEDULLA OBLONGATA S.96
4.9.2.3 EXPRESSION IM KLEINHIRN S.97
4.9.2.4 EXPRESSION IM HIPPOCAMPUS S.101
5 DISKUSSION S.103
5.1 MODIFIKATIONEN AM P2X2-REZEPTOR S.104
5. 7. 7
XENOPUSLEAVIS
OOZYTEN-EXPRESSIONSMODELL S.104
5.1.2 EXPRESSION IN HEK293-ZELLKULTUR S.105
5.2 GENERIERUNG DES
P2X2-STEP-HIS-TAGRFP
MAUSMODELLS S.106
5.2.1 AUSWAHL DES BAC S.107
5.2.2 DAS REKOMBINATIONSSYSTEM S.108
INHALTSVERZEICHNIS
5.3 AUSWAHL
EINER TRANSGENEN
MAUSLINIE S.110
5.4 NUTZUNG DES
MAUSMODELLS FUER
BIOCHEMISCHE ANALYSEN S.110
5.5 LOKALISIERUNG
DES
FLUORESZENZPROTEINS
IM MAUSMODELL S.112
5.6 LOKALISATION
DER P2X2-UNTEREINHEIT IN BEZUG
AUF SCHMERZ S.113
5.6.1 P2X2-EXPRESSION IN HINTERWURZELGANGLIEN S.114
5.6.2 P2X2 ENTHALTENDE REZEPTOREN IM RUECKENMARK S.115
5.6.3 DAS FUSIONSPROTEIN IM DORSALEN VAGUS-KOMPLEX S.116
5.6.4 EXPRESSION DER P2X2-UNTEREINHEIT IN STRUKTUREN DES CEREBELLUMS
S.118
5.6.5 HIPPOCAMPALE EXPRESSION VON P2X2-FUSIONS-UNTEREINHEITEN S.119
5.7 AUSBLICK:
SCHMERZMODELLE AN TRANSGENEN TIEREN S.120
6 ZUSAMMENFASSUNG / ABSTRACT
S.122
7 VERWENDETE ABKUERZUNGEN
S.128
8 LITERATUR
S.133
9 ABBILDUNGSVERZEICHNIS
S.152
10 TABELLENVERZEICHNIS
S.153
ANHANG
I
SELBSTSTAENDIGKEITSERKLAERUNG XN
|
| any_adam_object | 1 |
| author | Grohmann, Marcus 1979- |
| author_GND | (DE-588)1049594290 |
| author_facet | Grohmann, Marcus 1979- |
| author_role | aut |
| author_sort | Grohmann, Marcus 1979- |
| author_variant | m g mg |
| building | Verbundindex |
| bvnumber | BV042017088 |
| ctrlnum | (OCoLC)889537247 (DE-599)DNB1050392779 |
| discipline | Medizin |
| format | Thesis Electronic Software eBook |
| fullrecord | <?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?><collection xmlns="http://www.loc.gov/MARC21/slim"><record><leader>01254nmm a2200337 c 4500</leader><controlfield tag="001">BV042017088</controlfield><controlfield tag="003">DE-604</controlfield><controlfield tag="005">00000000000000.0</controlfield><controlfield tag="006">a m||| 00||| </controlfield><controlfield tag="007">co|uuu---uuuuu</controlfield><controlfield tag="008">140808s2013 gw |||| q||u| ||||||ger d</controlfield><datafield tag="015" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">14,H06</subfield><subfield code="2">dnb</subfield></datafield><datafield tag="016" ind1="7" ind2=" "><subfield code="a">1050392779</subfield><subfield code="2">DE-101</subfield></datafield><datafield tag="035" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">(OCoLC)889537247</subfield></datafield><datafield tag="035" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">(DE-599)DNB1050392779</subfield></datafield><datafield tag="040" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">DE-604</subfield><subfield code="b">ger</subfield><subfield code="e">rakddb</subfield></datafield><datafield tag="041" ind1="0" ind2=" "><subfield code="a">ger</subfield></datafield><datafield tag="044" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">gw</subfield><subfield code="c">XA-DE</subfield></datafield><datafield tag="049" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">DE-355</subfield></datafield><datafield tag="084" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">610</subfield><subfield code="2">sdnb</subfield></datafield><datafield tag="100" ind1="1" ind2=" "><subfield code="a">Grohmann, Marcus</subfield><subfield code="d">1979-</subfield><subfield code="e">Verfasser</subfield><subfield code="0">(DE-588)1049594290</subfield><subfield code="4">aut</subfield></datafield><datafield tag="245" ind1="1" ind2="0"><subfield code="a">Etablierung eines transgenen Mausmodells mit fluoreszierendem P2X2-Fusionsprotein</subfield><subfield code="c">vorgelegt von Marcus Grohmann</subfield></datafield><datafield tag="264" ind1=" " ind2="1"><subfield code="c">2013</subfield></datafield><datafield tag="300" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">153, VII S.</subfield><subfield code="b">Ill., graph. Darst.</subfield><subfield code="c">12 cm</subfield></datafield><datafield tag="336" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">txt</subfield><subfield code="2">rdacontent</subfield></datafield><datafield tag="337" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">c</subfield><subfield code="2">rdamedia</subfield></datafield><datafield tag="338" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">cd</subfield><subfield code="2">rdacarrier</subfield></datafield><datafield tag="502" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">Leipzig, Univ., Diss., 2014</subfield></datafield><datafield tag="655" ind1=" " ind2="7"><subfield code="0">(DE-588)4113937-9</subfield><subfield code="a">Hochschulschrift</subfield><subfield code="2">gnd-content</subfield></datafield><datafield tag="856" ind1="4" ind2="2"><subfield code="m">DNB Datenaustausch</subfield><subfield code="q">application/pdf</subfield><subfield code="u">http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=027458854&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA</subfield><subfield code="3">Inhaltsverzeichnis</subfield></datafield><datafield tag="999" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-027458854</subfield></datafield></record></collection> |
| genre | (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content |
| genre_facet | Hochschulschrift |
| id | DE-604.BV042017088 |
| illustrated | Illustrated |
| indexdate | 2024-07-10T01:10:37Z |
| institution | BVB |
| language | German |
| oai_aleph_id | oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-027458854 |
| oclc_num | 889537247 |
| open_access_boolean | |
| owner | DE-355 DE-BY-UBR |
| owner_facet | DE-355 DE-BY-UBR |
| physical | 153, VII S. Ill., graph. Darst. 12 cm |
| publishDate | 2013 |
| publishDateSearch | 2013 |
| publishDateSort | 2013 |
| record_format | marc |
| spelling | Grohmann, Marcus 1979- Verfasser (DE-588)1049594290 aut Etablierung eines transgenen Mausmodells mit fluoreszierendem P2X2-Fusionsprotein vorgelegt von Marcus Grohmann 2013 153, VII S. Ill., graph. Darst. 12 cm txt rdacontent c rdamedia cd rdacarrier Leipzig, Univ., Diss., 2014 (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=027458854&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
| spellingShingle | Grohmann, Marcus 1979- Etablierung eines transgenen Mausmodells mit fluoreszierendem P2X2-Fusionsprotein |
| subject_GND | (DE-588)4113937-9 |
| title | Etablierung eines transgenen Mausmodells mit fluoreszierendem P2X2-Fusionsprotein |
| title_auth | Etablierung eines transgenen Mausmodells mit fluoreszierendem P2X2-Fusionsprotein |
| title_exact_search | Etablierung eines transgenen Mausmodells mit fluoreszierendem P2X2-Fusionsprotein |
| title_full | Etablierung eines transgenen Mausmodells mit fluoreszierendem P2X2-Fusionsprotein vorgelegt von Marcus Grohmann |
| title_fullStr | Etablierung eines transgenen Mausmodells mit fluoreszierendem P2X2-Fusionsprotein vorgelegt von Marcus Grohmann |
| title_full_unstemmed | Etablierung eines transgenen Mausmodells mit fluoreszierendem P2X2-Fusionsprotein vorgelegt von Marcus Grohmann |
| title_short | Etablierung eines transgenen Mausmodells mit fluoreszierendem P2X2-Fusionsprotein |
| title_sort | etablierung eines transgenen mausmodells mit fluoreszierendem p2x2 fusionsprotein |
| topic_facet | Hochschulschrift |
| url | http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=027458854&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA |
| work_keys_str_mv | AT grohmannmarcus etablierungeinestransgenenmausmodellsmitfluoreszierendemp2x2fusionsprotein |