Nachweis und Charakterisierung von Autoantikörpern gegen das Protein YB-1 bei onkologischen Patienten:
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| Published: |
2013
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS XI
1 EINLEITUNG 1
1.1 DAS HUMANE Y-BOX PROTEIN 1 (YB-1) 1
1.1.1 DIE KAELTESCHOCK-PROTEINE 1
1.1.2 DIE STRUKTURDOMAENEN VON YB-1 1
1.1.3 INTERAKTION VON YB-1 MIT DNA UND RNA 2
1.2 YB-1 IN DER TUMORGENESE 4
1.2.1 DIE ROLLE VON YB-1 IN DER TUMORGENESE 4
1.2.2 INTERAKTION VON YB-1 MIT P53 UND EGFR 5
1.2.3 DAS INTRAZELLULAERE VERTEILUNGSMUSTER VON YB-1 UND DESSEN
PROGNOSTISCHER WERT 7
1.2.4 DIE ROLLE VON YB-1 IN DER ENTSTEHUNG VON ARZNEIMITTELRESIS-
TENTEN TUMOREN 8
1.2.5 NEUE THERAPIEANSAETZE MIT YB-1 8
1.3 AUTOANTIKOERPER GEGEN TUMORPROTEINE BEIM MENSCHEN 9
2 ZIEL UND HINTERGRUND DER ARBEIT 11
3 MATERIAL UND METHODEN 13
3.1 HISTOLOGIE UND FAERBEPROTOKOLL 13
3.1.1 VORBEREITUNG DER SCHNITTE 13
3.1.2 FAERBEVORGANG 14
3.1.3 IMMUNREAKTIVER SCORE 14
3.2 HERSTELLUNG DES REKOMBINANTEN YB-L-PROTEINS (RYB-1) IG
3.2.1 HITZESCHOCKTRANSFORMATION VON BAKTERIEN 16
3.2.2 RESTRIKTIONSVERDAU VON DNA-PLASMIDEN 17
3.2.3 PROTEINHERSTELLUNG 19
3.2.4 PROTEINBESTIMMUNG NACH BRADFORD 21
3.3 HERSTELLUNG VON YB-L-GFP-FUSIONSPROTEINEN 22
3.3.1 PLASMIDE 22
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VIII
INHALTSVERZEICHNIS
3.3.2 TRANSFORMATION VON BAKTERIEN 22
3.3.3 MAXI-PREP 22
3.3.4 KALZIURN-PHOSPHAT-TRANSFEKTION VON HEK293T-ZELLEN 23
3.3.5 HERSTELLUNG VON ZELLLYSATEN 24
3.4 WESTERN BLOT 25
3.4.1 STRIPPING 29
3.4.2 COOMASSIE-FAERBUNG 29
3.5 ELISA (ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY) 29
3.G STATISTISCHE AUSWERTUNG 30
4 ERGEBNISSE 33
4.1 IMMUNHISTOCHEMISCHE UNTERSUCHUNG VON TUMOREN 33
4.1.1 WIE IST DAS EXPRESSIONSMUSTER VON YB-1 IN TUMORZELLEN VER
SCHIEDENER SOLIDER TUMORE UND IST EIN NUKLEARES AUFTRETEN
PROGNOSTISCH UNGUENSTIG? 34
4.1.2 WERDEN DIE KAELTESCHOCKPROTEINE DNA-BINDENDES PROTEIN A
(DBPA) UND YB-1 KONKORDANT EXPRIMIERT UND KORRELIERT DIES
MIT DER PROGNOSE DER TUMORERKRANKUNG? 3G
4.1.3 KORRELIERT DAS VORKOMMEN VON YB-L/PL8 IM SERUNI DER PATI
ENTEN MIT DER YB-L-EXPRESSION IM TUMORGEWEBE? 41
4.2 AUTOANTIKOERPER GEGEN YB-1 BEI TUMORPATIENTEN 42
4.2.1 LIEGEN AUTOANTIKOERPER GEGEN DAS VOLLLAENGEN-YB-L-PROTEIN
BEI KOLLEKTIVEN VON TUMORPATIENTEN BEZIEHUNGSWEISE NICHT-
TUMORPATIENTEN VOR? 43
4.2.2 CHARAKTERISIERUNG DES BINDUNGSEPITOPS DER YB-L-AUTOANTIKOERPER 47
4.2.3 LIEGEN BEI NICHT-TUMORPATIENTEN AUTOANTIKOERPER GEGEN YB-
1I_57-GFP VOR? 55
4.2.4 AUTOANTIKOERPER GEGEN YB-LI
_57
-GFP BEI AUTOIMMUNERKRAN-
KUNGEN UND IGA-NEPLIRITIS 5G
4.2.5 AUTOANTIKOERPER GEGEN YB-LI
_
5
7
-GFP BEI TUMORPATIENTEN UND
IHRE WERTIGKEIT ALS DIAGNOSTISCHE MARKER FUER TUMORERKRANKUNGEN 58
4.2.G TITERVERLAUF VON YB-L
1
_57
-GFP-AUTOANTIKOERPERN BEI TUMOR
ERKRANKUNGEN UNTER CHEMOTHERAPIE 69
4.2.7 KLASSIFIZIERUNG DER YB-LI_57-GFP-AUTOANTIKOERPER NACH IGG-
SUBKLASSEN 71
4.2.8 AUFTRETEN VON YB-LI
_57
-GFP-AUTOANTIKOERPERN IN ABHAENGIG
KEIT VON DEM PROTEINFRAGMENT YB-L/PL8 73
5 DISKUSSION 75
INHALTSVERZEICHNIS
IX
6 ZUSAMMENFASSUNG 83
7 LITERATURVERZEICHNIS 85
8 ANHANG 99
8.1 MATERIALIEN 99
8.2 HISTOLOGIE 105
8.3 ZUSAETZLICHE ABBILDUNGEN 105
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