Expression von PAR-1, Tissue Factor und Thrombomodulin auf Primärtumorzellen: Einfluss von Thrombin und Faktor Xa auf die Tumorzellbiologie
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INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG UND FRAGESTELLUNG SEITE 1
1.1. KLINISCHER HINTERGRUND UND EXPERIMENTELLES MODELL SEITE 1
1.2. DAS GERINNUNGSSYSTEM SEITE 2
1.3. AKTIVIERUNG DES GERINNUNGSSYSTEMS DURCH TISSUC FACTOR SEITE 3
1.4. DIE SCRINPROTEASCN DES GERINNUNGSSYSTEMS VERMITTELN ZELLBIOLOGISCHC
EFFEKTE SEITE 4
1.4.1. THROMBIN SEITE 4
1.4.2. FAKTOR XA SEITE 5
1.5. NACHWEIS EINES AKTIVEN GERINNUNGSSYSTEMS IN MALIGNEN ERGUESSEN SEITE
6
1.6. THROMBIN-BINDCNDE STRUKTUREN DES GERINNUNGSSYSTEMS SEITE 7
1.6.1. THROMBOMODULIN SEITE 7
1.6.2. PAR-1 (PROTEINASE ACTIVATED REEEPTOR TYPE 1) SEITE 9
1.7. DIE ROLLE VON VASCULAR-ENDOTHCLIAL-GROWTH-FACTOR (VEGF) BEI
MALIGNEN ERKRANKUNGEN SEITE 11
1.8. MODELL ZUR ENTSTEHUNG MALIGNER ERGUESSE SEITE 13
1.9. FRAGESTELLUNG UND ZIELE SEITE 14
2. MATERIAL UND METHODEN SEITE 16
2.1. MATERIAL SEITE 16
2.1.1. GERAETE SEITE 16
2.1.2. LABORBEDARF SEITE 18
2.1.3. MEDIEN, PUFFER, CHEMIKALIEN UND VCRBRAUCHSMATCRIALIEN SEITE 19
2.1.4. TESTKITS UND PRIMER SEITE 21
2.1.5. ANTIKOERPER UND ISOTYPEN SEITE 22
2.1.6. ZCLLLINICN SEITE 22
2.2. METHODEN SEITE 23
2.2.1. ZELLKULTUR SEITE 23
2.2.2. ANFERTIGEN VON ZYTOPRAEPARATEN SEITE 25
2.2.3. DURCHFLUSSZYTOMCTRIC (FACS-ANALYSE) SEITE 25
2.2.4. RNA-ISOLICRUNG SEITE 30
2.2.5. HERSTELLUNG DER CDNA SEITE 31
2.2.6. REAL-TIMC-PCR SEITE 32
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IV
3. ERGEBNISSE SEITE 35
3.1. SELEKTION VON PRIMAEITUMORZCLLCN SEITE 35
3.2. ERGEBNISSE DER FACS-ANALYSC SEITE 36
3.2.1. RCFCRCNZZCLLLINIC THP-1 SEITE 36
3.2.2. PRIMAERTUMORZELLEN SEITE 37
3.2.3. MALIGNE ERGUESSE SUPPRIMICREN DIE PAR-1
-EXPRESSION VON
TUMORZELLEN SEITE 40
3.2.4. THROMBIN UND FAKTOR XA HABEN KEINEN EINFLUSS AUF DIE PAR-1
EXPRESSION SEITE 43
3.3. THROMBIN UND FAKTOR XA INDUZIEREN EINE EXPRESSION VON VEGF SEITE 47
4. DISKUSSION SEITE 49
4.1. GENERIERUNG VON TUMORZCLLKULTURCN AUS PLEURAERGUESSEN SEITE 49
4.2. NACHWEIS DER EXPRESSION VON TISSUE FACTOR, THROMBOMODULIN
UND PAR-1 AUF TUMORZELLEN ALS VORAUSSETZUNG FUER EINE INTERAKTION
MIT DEN GERINNUNGSFAKTOREN DER ERGUSSFLUESSIGKEIT SEITE 49
4.3. UNTERSUCHUNG DES EINFLUSSES DES AUTOLOGEN ERGUSSES UND
DER SCRIN-PROTEASEN THROMBIN UND FAKTOR XA AUF DIE
PAR-1-OBERFLAECHENEXPRESSION SEITE 52
4.4. THERAPEUTISCHE ANSATZMOEGLICHKEIT DURCH DIE INHIBICRUNG VON
THROMBIN BZW. FAKTOR XA DURCH ANTIKOAGULANTIEN SEITE 52
4.5. EINFLUSS VON THROMBIN UND FAKTOR XA AUF DIE VEGF-EXPRCSSION
UND DESSEN BEDEUTUNG FUER MALIGNE ERKRANKUNGEN SEITE 54
5. ZUSAMMENFASSUNG SEITE 55
6. LITERATURVERZEICHNIS SEITE 56
7. ANHANGE SEITE 56
7.1. TABELLE DER REAL-TIME-PCR ERGEBNISSE SEITE 61
7.2. VEROEFFENTLICHUNG SEITE 61
7.3. PATIENTENINFORMATION SEITE 62
7.4. VOTUM DER ETHIKKOMMISSION SEITE 63
8. DANKSAGUNGEN SEITE 64
9. LEBENSLAUF SEITE 65
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