Die subklinische Staphylococcus aureus-Mastitis - Sanierung eines hessischen Milcherzeugerbetriebes und epidemiologische Untersuchungen mittels Staphylokokken-Protein A (spa)-Typisierung:
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| Format: | Thesis Book |
| Language: | German |
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Gießen, Lahn
VVB Laufersweiler Verlag
2013
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| adam_text | 1 EINLEITUNG 1
2 LITERATURUEBERSICHT 2
2.1 MASTITIS DER RINDER 2
2.1.1 URSACHEN 3
2.1.2 VERLAUFSFORMEN UND KLINISCHES BILD 4
2.1.3 MASTITIS ALS BESTANDSPROBLEM 5
2.2 MASTITISERREGER 6
2.2.1 UMWELTMASTITISERREGER 7
2.2.2 KONTAGIOESE MASTITISERREGER 7
2.2.3 MINOR-PATHOGENE MASTITISERREGER 9
2.3 S. AUREUS ALS MASTITISERREGER 9
2.3.1 TAXONOMIE UND GENETISCHE UNTERSUCHUNGEN 11
2.3.2 BEDEUTUNG UND FOLGEN VON S. AUREUS IM BESTAND 23
2.3.3 PROPHYLAKTISCHE MASSNAHMEN 26
2.3.4 THERAPIEMOEGLICHKEITEN DER S. AUREUS-MASTITIS 27
2.3.4.1 CHEMOTHERAPEUTIKA ZUR THERAPIE VON S.AUREUS-MASTITIDEN 28
2.3.4.2 EINSATZ VON SCHUTZIMPFUNGEN GEGEN
S.AUREUS-MASTITIDEN 30
3 TIERE, MATERIAL UND METHODEN 37
3.1 VERSUCHSBETRIEB 37
3.1.1 AKTUELLER STATUS DER EUTERGESUNDHEIT UND KLINIK IM BESTAND 38
3.1.2 HISTORIE BISHER ERFOLGTER BESTANDSSANIERUNG 38
3.2 ERARBEITUNG EINES SANIERUNGSKONZEPTES IM VERSUCHSBETRIEB 39
3.2.1 ENTFERNUNG THERAPIERESISTENTER TIERE 40
3.3 ENTNAHME DER VIERTELGEMELKSPROBEN 40
3.4 ENTNAHME VON UMWELTPROBEN 40
3.5 ZYTOBAKTERIOLOGISCHE UNTERSUCHUNG DER VIERTELGEMELKSPROBEN 41
3.5.1 VERGLEICH UNTERSCHIEDLICHER AUSSTRICHVERFAHREN 43
3.6 BAKTERIOLOGISCHE UNTERSUCHUNG DER UMWELTPROBEN 43
3.7 KONSERVIERUNG DER S. AUREUS-LSOLATE 44
3.8 AUSWAHL WEITERER IN HESSEN ISOLIERTER BOVINER S. AUREUS-STAEMME 44
3.9 PHAENOTYPISCHE IDENTIFIZIERUNG VON S. AUREUS 45
3.9.1 WACHSTUM AUF BLUTAGAR 45
3.9.2 NACHWEIS DER PLASMA-KOAGULASE 46
3.9.3 UNTERSUCHUNG MITTELS VITEK2 46
3.10 GENOTYPISCHE IDENTIFIZIERUNG DES S. AUREUS 47
3.10.1 POLYMERASEKETTENREAKTION (PCR) 47
IV
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3.10.1.1 DNA-PRAEPARATION 47
3.10.1.2 DURCHFUEHRUNG DER PCR 47
3.10.1.3 AGAROSEGELELEKTROPHORESE 48
3.10.1.4 ETHIDIUMBROMIDFAERBUNG 48
3.10.1.5 UNTERSUCHUNG AUF DAS THERMONUKLEASE-GEN (NUC) 48
3.10.1.6 UNTERSUCHUNG AUF DAS KOAGULASEGEN
(COA) 49
3.10.1.7 UNTERSUCHUNG AUF DAS PROTEIN-A-GEN (IGG-BINDENDE REGION) 49
3.10.1.8 UNTERSUCHUNG AUF DAS PROTEIN-A-GEN (XR-REGION) 50
3.10.1.9 UNTERSUCHUNG AUF DAS PROTEIN-A-GEN (XR-REGION) FUER DAS
SPA-TYPING 50
3.10.1.10 UNTERSUCHUNG AUF DAS MECA-GEN 50
3.10.2 MAKRORESTRIKTIONSANALYSE DER CHROMOSOMALEN DNA MITTELS
PULSFELDGELELEKTROPHORESE (PFGE) 51
3.10.2.1 PRAEPARATION UND RESTRIKTIONSVERDAU DER GESAMTZELL-DNA 51
3.10.2.2 PULSFELDGELELEKTROPHORESE 52
3.10.2.3 ETHIDIUMBROMIDFAERBUNG 53
3.10.2.4 AUSWERTUNG DER PFGE-MUSTER 53
3.11 STAPHYLOKOKKEN-PROTEIN-A (SPA)-TYPISIERUNG 53
3.11.1 VORBEREITUNG DER AMPLIFIKATE 53
3.11.2 AUSWERTUNG DER SEQUENZEN 53
4 ERGEBNISSE 55
4.1 VIERTELGEMELKSPROBEN 55
4.1.1 VERGLEICH DER VERSCHIEDENEN AUSSTRICHVERFAHREN 55
4.2 UMWELTPROBEN 57
4.3 IDENTIFIZIERUNG DES S. AUREUS 58
4.3.1 PHAENOTYPISCHE IDENTIFIZIERUNG 58
4.3.1.1 KOAGULASETESTS 58
4.3.1.2 BESTAETIGUNG DURCH VITEK2 58
4.3.2 GENOTYPISCHE IDENTIFIZIERUNG 59
4.3.2.1 PCR-AUSWERTUNG 59
4.3.2.2 MAKRORESTRIKTIONSANALYSE 61
4.3.2.3 SPA-TYPISIERUNG AUS DEM
SANIERUNGSBETRIEB 66
4.3.2.4 SPA-TYPISIERUNG AUS WEITEREN IN HESSEN
ISOLIERTEN BOVINEN S. AUREUS- STAEMMEN 67
4.3.2.5 ZUSAMMENFASSUNG DER GENOTYPISCHEN UNTERSUCHUNGSERGEBNISSE AUS
DEM
SANIERUNGSBETRIEB 70
4.4 ANWENDUNG DES SANIERUNGSKONZEPTES 71
4.5 ENTWICKLUNG DES GESAMTBESTANDES 71
V
5 DISKUSSION 73
5.1 S. AUREUS-LDENTIFIZIERUNG 73
5.1.1 PHAENOTYPISCHE VERFAHREN 73
5.1.2 GENOTYPISCHE VERFAHREN 74
5.2 S. AUREUS-DIFFERENZIERUNG 74
5.3 SCHLUSSFOLGERUNG FUER DEN GESAMTBESTAND 78
6 ZUSAMMENFASSUNG 81
7 SUMMARY * 83
8 LITERATURVERZEICHNIS 85
9 ANHANG 96
9.1 TABELLENVERZEICHNIS 96
9.2 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 96
9.3 ZUORDNUNG DER TIERE ZU PFGE-TYPEN UND KODIERUNG IM DENDROGRAMM
(TABELLE) 97
9.4 VERWENDETE CHEMIKALIEN UND GERAETE 99
10 DANKSAGUNG 102
VI
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