Die angiogenetische Kapazität von endothelialen Progenitorzellen wird durch thrombozytäre Mikropartikel erhöht:
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| Published: |
2013
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS I
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS IV
1 EINLEITUNG 1
1.1 THERAPIE DER ATHEROSKLEROSE 1
1.2 ENDOTHELIALE PROGCNITORZCLLCN 2
1.2.1 CHARAKTERISIERUNG DER ENDOTHELIALEN PROGCNITORZCLLCN 2
1.2.2 ENDOTHELIALE PROGCNITORZCLLCN BEEINFLUSSEN ATHEROSKLEROSE,
NCOINTIMAHYPERPLASIC UND ANGIOGCNCSC 3
1.2.3 WIRKUNGSWEISE ENDOTHELIALER PROGCNITORZCLLCN 5
1.3 MIKROPARTIKCL 6
1.3.1 CHARAKTERISIERUNG 6
1.3.2 BILDUNG VON MIKROPARTIKCLN 7
1.3.3 TRANSFER BIOLOGISCHER INFORMATIONEN 8
1.3.4 PHYSIOLOGIE UND PATHOPHYSIOLOGIC 9
2 ZIEL DER ARBEIT 12
3 MATERIAL UND METHODEN 13
3.1 ISOLIERUNG MONONUKLCAERCR ZELLEN UND KULTIVIERUNG VON EO-EPC 13
3.2 CHARAKTERISIERUNG DER EO-EPC 14
3.3 KULTIVIERUNG VON ENDOTHELZCLLCN (HUVEC) 14
3.4 GCNERICRUNG UND ISOLATION VON PMP 15
3.5 BEHANDLUNG DER EO-EPC MIT THROMBOZYTAEREN MIKROPARTIKCLN 17
3.6 DURCHFIUSSZYTOMCTRIE (FACS) 17
3.6.1 PHAENOTYPISICRUNG 17
3.6.2 GROESSENBESTIMMUNG UND QUANTIFIZIERUNG VON PMP 19
3.6.3 PERMEABILISICRUNG DER EO-EPC 20
3.6.4 INTERAKTION ZWISCHEN PMP UND EO-EPC 20
3.6.5 AKT SIGNALTRANSDUKTION 21
3.6.6 AKTIN POLYMCRISICRUNG 22
3.7 TRANSAKTION VON CXCR4-SIRNA 23
3.8 KONFOKALC LASCRMIKROSKOPIC 23
3.9 RASTCRCLCKTRONENMIKROSKOPIC (REM) 24
3.10 INTRAZELLULAERER KALZIUMFLUSS 25
3.11 ZCLL-MIGRATIONS-ASSAY 25
3.12 SPRCADING 26
3.13 ADHAESIONS- UND TRANSMIGRATIONSASSAY 27
I
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INHALTSVERZEICHNIS
3.14 HERSTELLUNG VON KONDITIONIERTEM MEDIUM (KM) 28
3.15 SCRATCH ASSAY 28
3.16 UNTERSUCHUNG DES EO-EPC SCKRCTOMS 29
3.17 PROLIFCRATIONS-ASSAY 30
3.18 VASKULAERER 7U6E-FORMATIONS ASSAY AUF MATRIGEL 31
3.19 SATISTISCHE AUSWERTUNG 31
3.20 ALLGEMEINE AUSSTATTUNG: 31
4 ERGEBNISSE 32
4.1 CHARAKTERISIERUNG DER EO-EPC 32
4.2 CHARAKTERISIERUNG DER PMP 33
4.3 INTERAKTION ZWISCHEN PMP UND EO-EPC: BINDUNG, MCMBRANASSIMILATION
UND
INKORPORATION 33
4.3.1 PMP TRANSFERIEREN GPIB UND CM-DIL AUF EO-EPC 33
4.3.2 PMP INKORPORIEREN IN EO-EPC 34
4.3.3 DIE INTERAKTION ZWISCHEN PMP UND EO-EPC ZEIGT ZEITBEGRENZTE
EDTA-EFFCKTC..
36
4.4 PMP MODULIEREN DEN PHAENOTYP VON EO-EPC 37
4.5 PMP STEIGERN DIE CXCR4-ABHAENGIGE SIGNALUEBCRTRAGUNG AUF EO-EPC 39
4.5.1 PMP TRANSFERIEREN CXCR4 AUF EO-EPC 39
4.5.2 PMP STEIGERN DIE CXCL12-ABHAENGIGC ZCLLAKTIVICRUNG VON EO-EPC 42
4.6 PMP VERSTAERKEN DAS CXCL12-VERMITTCLTC AKT-SIGNALING VON EO-EPC 43
4.7 PMP FORDERN DIE ADHAESION VON EO-EPC AUF KOMPONENTEN DER EZM UNTER
FLUSSBEDINGUNGEN 44
4.8 PMP STEIGERN DIE ADHAESION VON EO-EPC AUF IMMOBILISIERTEM CXCL 12
UNTER
FLUSSBEDINGUNGEN 45
4.9 PMP FOERDERN MIGRATION UND NEUSTRUKTURIERUNG DES ZYTOSKCLCTTS BEI
EO-EPC 46
4.9.1 PMP VERSTAERKEN DIE CXCL 12-ABHAENGIGC AKTIN-POLYMCRISICRUNG VON
EP-EPC. 46
4.9.2 PMP STEIGERN DIE ZCLLAUSBRCITUNG VON EO-EPC 47
4.9.3 PMP STEIGERN DIE CXCR4-VERMITTCLTC MIGRATION VON EO-EPC 48
4.10 PMP ERHOEHEN DIE REKONVALESZENZ VON EO-EPC IM INTEGRIERTEN
PROLIFERATIONS- UND
MIGRATIONSASSAY (SCRATCH-ASSAY) 49
4.11 PMP STEIGERN NICHT DIE PROLIFERATION VON EO-EPC 49
4.12 DAS SCKRCTOM DER EO-EPC ENTHAELT NACH INTERAKTION MIT PMP VERMEHRT
PROANGIOGCNETISCHC KOMPONENTEN UND ERHOEHT SO IHR REGENERATIVES POTENTIAL
50
4.12.1 PMP MODIFIZIEREN DAS EPC-SEKRCTOM 50
4.12.2 DAS DAS DURCH PMP MODIFIZIERTE SCKRCTOM FORDERT DIE BILDUNG VON
KAPILLARAEHNLICHCN STRUKTUREN VON EO-EPC IN MATRIGCLMATRIX 51
4.12.3 DAS DURCH PMP MODIFIZIERTE SCKRCTOM STEIGERT DIE
ZCLLPROLIFERATION 52
4.13 KONKLUSION 53
II
5 DISKUSSION 54
5.1 INTERAKTION ZWISCHEN PMP UND EO-EPC: BINDUNG, MCMBRANASSIMILATION
UND
INKORPORATION 54
5.2 PMP MODULIEREN DEN PHAENOTYP VON EO-EPC 55
5.3 PMP UEBERTRAGEN CXCR4 AUF EO-EPC UND ERHOEHEN DESSEN RCAGIBILITAET 56
5.4 PMP FORDERN DIE ADHAESION, MIGRATION UND DAS SPREADING VON EO-EPC 57
5.5 PMP STEIGERN NICHT DIE PROLIFERATION VON EO-EPC 58
5.6 DAS SEKRCTOM DER EO-EPC WIRD DURCH PMP MODIFIZIERT UND ERHOEHT SO IHR
VASOREGENERATIVES POTENTIAL 58
5.7 AMBIVALENZ DER EPC IM RAHMEN DER ATHEROSKLEROSE 59
5.8 WEITERFUEHRENDE FORSCHUNGSANSAETZC 60
5.9 FAZIT 61
6 ZUSAMMENFASSUNG 63
7 SUMMARY 64
8 LITERATUR 65
9 DANKSAGUNG 71
III
|
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