Der Einfluss von 5-Azacytidin auf die myogene Differenzierung mesenchymaler Stamm-/Stromazellen in vitro:
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Tübingen
Universitätsbibl.
2013
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| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS........ IV
1 EINLEITUNG 1
1.1 MESENCHYMALE STAMM-/ STROMAZELLEN............ .......... .... 1
1.1.1 DEFINITION DER STAMMZELLE.. _ - 1
1.1.2 DIFFERENZIERUNGSPOTENTIAL VON MSC 2
1.1.3 VORKOMMEN 4
1.1.4 WACHSTUM UND PROLIFERATION _ - - 5
1.1.5 MORPHOLOGIE 6
1.1.6 IMMUNOPHAENOTYPISIERUNG VON MSC 6
1.2 MUSKELZELLDIFFERENZIERUNG .............. .................
..............7
1.2.1 MECHANISMEN DER MUSKELZELLENTWICKLUNG 7
1.2.2 IDENTIFIZIERUNG MYOGENER GENE 8
1.2.3 5-AZACYTIDIN ALS TRIGGER DER MYOGENEN DIFFERENZIERUNG 9
1.3 KLINISCHE ANWENDUNG............... ............... .............. 10
1.4 ZIELE DER ARBEIT: ............. ..... .................. 12
2 MATERIAL UND METHODEN 13
2.1 MATERIAL 13
2.1.1 REAGENZIEN 13
2.1.2 CHEMIKALIEN, ENZYME UND SEREN - 14
2.1.3 KITS... IS
2.1.4 LOESUNGEN/MEDIEN FUER ZELLKULTUR 15
2.1.5 LOESUNGEN FUER DIE MOLEKULARBIOLOGIE - 16
2.1.6 GEBRAUCHSWAREN 16
2.1.7 GERAETE 17
2.1.8 VERWENDETE ZELLEN 18
2.1.9 SOFTWARE 18
2.2 METHODEN ................. ......... ........... 19
2.2.1 ZELLGEWINNUNG UND KULTIVIERUNG 19
2.2.2 IMMUNPHAENOTYPISIERUNG MITTELS DURCHFLUSSZYTOMETRIE (FACS) 20
2.2.3 POLYMERASE-KETTEN-REAKTION 22
2.2.4 DATENERFASSUNG UND AUSWERTUNG 29
3 ERGEBNISSE 30
II
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3.1 IN VITRO-KULTIVIERUNG VON MSC UND BEHANDLUNG MIT S-AZA.
......................... 30
3.2 IMMUNPHAENOTYPISIERUNG VON MSC MITTELS FACS-ANALYSE 31
3.2.1 BESTIMMUNG INTRAZELLULAEREN A-ACTINS MITTELS FACS-ANALYSE 35
3.3 ANALYSE DER MYODL UND MYHC EXPRESSION MITTELS
RT-PCR............................... 36
4 DISKUSSION 39
4.1 IN VITRO-KULTIVIERUNG VON MSC 39
4.2 INDUKTION DER DIFFERENZIERUNG MESENCHYMALER STAMM-/
STROMAZELLEN...... 40
4.3 ERKLAERUNGSMODELL DER DIFFERENZIERUNG 42
4.4 SCHUSSFOLGERUNG 44
5 ZUSAMMENFASSUNG 46
5.1 ABSTRACT.........
.......................................................... 47
6 AUSBLICK 49
7 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 50
8 TABELLENVERZEICHNIS 51
9 LITERATURVERZEICHNIS 52
10 DANKSAGUNG 62
11 LEBENSLAUF 63
III
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