Die kardiale Phänotypisierung der TASK-1-defizienten Maus:
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Gießen
Laufersweiler
2013
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| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG 7
1.1 IONEN-/ KALIUMKANAELE 7
1.1.1 K
2
P-KANAELE 8
1.1.2 VERAENDERUNGEN VON LONENKANAELEN UND IHRE KLINISCHE RELEVANZ 9
1.1.3 TASK-1: EXPRESSION, FUNKTION UND REGULATION 11
1.2 TRANSGENE TIERE ALS UNTERSUCHUNGSMODELL 13
1.2.1 HERSTELLUNG TRANSGENER TIERE 14
1.2.2 FUER KALIUMKANAELE GENETISCH MODIFIZIERTE MAUSMODELLE 15
1.2.3 MUTATIONEN VON LONENKANAELEN UND DEREN AUSWIRKUNGEN AUF DEN
KLINISCHEN PHAENOTYP 16
1.3 ZIEL DER VORLIEGENDEN ARBEIT 17
2. MATERIAL
UND METHODEN 18
2.1 TIERE 18
2.1.1 TASK-1 DEFIZIENTE MAEUSE 18
2.1.2 GENOTYPISIERUNG 19
2.1.2.1 SOUTHERN BLOT 19
2.1.2.2 REAL-TIME PCR 20
2.1.3 TIERHALTUNG 23
2.1.3.1 ZUCHT 23
2.1.3.2 VERSUCHSTIERE 23
2.1.4 GENEHMIGUNG 24
2.2 WESTERN BLOT 24
2.2.1 PROTEINEXTRAKTION 24
2.2.2 ELEKTROPHORETISCHE AUFTRENNUNG DES PROTEINGEMISCHES 25
2.2.3 PROTEINTRANSFER AUF EINE MEMBRAN (BLOT) 26
2.2.4 KOPPLUNG EINES SPEZIFISCHEN ANTIKOERPERS AN DAS GESUCHTE PROTEIN 27
2.2.5 SICHTBARMACHUNG DER REAKTION DURCH CHEMOLUMINESZENZ 28
2.2.6 ENDOGENE KONTROLLE 29
2.3 VERSUCHE AM ISOLIERTEN HERZEN/LANGENDORFF-PRAEPARATION 32
2.3.1 GRUNDLAGEN 32
2.3.2 VORGEHEN 33
2.3.2.1 VORBEREITUNG 34
2.3.2.2 HERZPRAEPARATION 34
2.3.3 ABLEITUNG MONOPHASISCHER AKTIONSPOTENTIALE 36
2.3.3.1 QUALITAETSKRITERIEN FUER MAP 38
2.3.3.2 AUSWERTUNG DER MONOPHASISCHEN AKTIONSPOTENTIALE 39
2.4 ECHOKARDIOGRAPHIE 39
2.4.1 GRUNDLAGEN 39
2.4.2 DURCHFUEHRUNG 41
2.4.3 AUSWERTUNG 41
2.5 ANTHROPOMETRISCHE ANALYSEN 42
2.6 ERSTELLUNG EINES TELEMETRISCHEN ELEKTROKARDIOGRAMMS 43
2.6.1 AUFBAU DER MESSEINHEIT 43
2.6.2 OPERATIVES VORGEHEN ZUR TRANSMITTERIMPLANTATION 44
2.6.3 ERSTELLUNG DES 24-STUNDEN-EKGS 45
2.6.4 ERSTELLUNG DER BELASTUNGS-EKGS 46
2.6.4.1 SCHWIMMEN 46
2.6.4.2 LAUFEN 47
2.6.4.3 MEDIKAMENTOESE STIMULATION 48
2.6.5 AUSWERTUNG 48
2.7 AUFZEICHNUNG VON OBERFLAECHEN-EKGS 48
2.8 BERECHNUNG DER *HEART RATE VARIABILITY 49
2.8.1 GRUNDLAGEN 49
2.8.2 VORGEHEN 50
2.9 ANALYSE VON ISCHAEMIE- UND REPERFUSIONSEREIGNISSEN 52
2.9.1 DURCHFUEHRUNG 53
2.9.2 AUSWERTUNG 55
2.9.2.1 PLANIMETRIE 55
2.9.2.2 ELEKTROKARDIOGRAMM 56
3. ERGEBNISSE 57
3.1 TIERE 57
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3.1.1 ZUCHTBUCHAUSWERTUNG 57
3.2 WESTERN BLOT 59
3.3 VERSUCHE AM ISOLIERTEN HERZEN/LANGENDORFF-PRAEPARATION 61
3.3.1 ENTWICKLUNG GEEIGNETER ELEKTRODEN UND STIMUTATIONSMETHODE 61
3.3.2 STABILITAET 64
3.3.3 ERGEBNISSE 65
3.4 ECHOKARDIOGRAPHIE 66
3.5 ANTHROPOMETRISCHE ANALYSEN 67
3.6 TELEMETRIE/ELEKTROPHYSIOLOGIE 68
3.6.1 24-STUNDEN-EKGS 68
3.6.2 BELASTUNGS-EKGS 69
3.6.2.1 SCHWIMMEN 69
3.6.2.2 LAUFBANDERGOMETRIE 70
3.6.2.3 PHARMAKOLOGISCHE BELASTUNG MIT DOBUTAMIN UND EPINEPHRIN 71
3.7 OBERFLAECHEN-EKGS 73
3.8 HEART RATE VARIABILITY 74
3.9 TASK-1 IM RAHMEN VON ISCHAEMIE UND REPERFUSION 77
4. DISKUSSION 79
4.1 TASK-1-DEFIZIENTE TIERE 79
4.2 WESTERN BLOT 79
4.3 VERSUCHE AM ISOLIERTEN HERZEN / LANGENDORFF-PRAEPARATION 80
4.4 ECHOKARDIOGRAFIE 81
4.5 GRAVIMETRIE 82
4.6 TELEMETRISCHE UNTERSUCHUNG 82
4.6.1 24-STUNDEN-EKGS UND BELASTUNGS-EKGS 82
4.6.2 MEDIKAMENTOESE STIMULATION NACH KOERPERLICHER BELASTUNG 83
4.7 OBERLLAECHEN-EKGS 84
4.8 .HEART RATE VARIABILITY 85
4.9 MYOKARDINFARKTE : 86
5. ZUSAMMENFASSUNG 88
6. SUMMARY 89
7. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 90
8. LITERATURVERZEICHNIS 93
9. ERKLAERUNG 108
10. PUBLIKATIONEN 109
11. DANKSAGUNG 110
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