Proliferativer Einfluss von Erythropoetin auf Lebertumorzellen:
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2013
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| adam_text | 1 INHALTSVERZEICHNIS
1 INHALTSVERZEICHNIS 3
2 EINLEITUNG 7
2.1 DIE LEBER 7
2.2 HEPATOBILISRE TUMORE 8
2.3 TUMORZELILINIEN 17
1
2.3.1 AKN
1 17
2.3.2 HEP 3B 17
2.3.3 HEPG2 18
2.3.4 SK HEPL : 18
2.3.5 HUH7 19
2.3.6 HCC-T 19
2.3.7 HCC-M 20
2.4 THERAPIE HEPATOBILLAERER TUMORE 21
2.4.1 PHYSIOLOGISCHE KONTROLLE
ENTARTETER 2ELLEN 25
2.5 ERYTHROPOETIN 25
2.5.1 SYNTHESE 25
2.5.2 FUNKTION UND PHYSIOLOGIE 26
2.5.3 EINSATZ VON
ERYTHROPOETIN IN DER MEDIZIN 27
2.5.4 PROTEKTIVER EFFEKT VON RHUEPO AUF
LEBERZELLEN 28
2.5.5 MISSBRAUCH VON
RHUEPO
- DOPING
IM SPORT 29
2.5.6 NEBENWIRKUNGEN DER THERAPIE MIT RHUEPO 30
2.6 DARBEPOETIN ALPHA 31
2.7 FRAGESTELLUNG DER DOKTORARBEIT 31
3 MATERIALIEN UND METHODEN 34
3.1 VERBRAUDISMATERIALIEN 34
3.2 GERATE 38
3.3 ZELLTYPEN UND ZELLMEDIUM 40
3.4 ZELLBEHANDLUNG: PASSAGIEREN EINER ZELLLINIE 41
HTTP://D-NB.INFO/1046513451
3.4.1 MATERIALIEN 41
3.4.2 VERSUCHSAUFBAU ..41
3.5 ZELLBEHANDLUNG: ZELLEN EINFRIEREN UND AUFTAUEN.. 42
3.5.1 MATERIALIEN 42
3.5.2 VERSUCHSAUFBAU 43
3.6 ZELLBEHANDLUNG: ZELLEN ZAEHLEN 43
3.6.1 MATERIALIEN 43
3.6.2 VERSUCHSAUFBAU 44
3.7 ISOLATION VON PRIMAEREN HEPATOZYTEN 45
3.7.1 MATERIALIEN 45
3.7.2 VERSUCHSAUFBAU 47
3.8 HARNSTAFFMESSUNG 49
3.8.1 HINTERGRUND 49
3.8.2 MATERIALIEN 50
3.8.3 VERSUCHSAULBAU 53
3.9 GLUKOSEMESSUNG 54
3.9.1 HINTERGRUND 54
3.9.2 LOESUNGEN 55
3.9.3 VERSUCHSAUFBAU 57
3.10 FAERBUNGEN: GLUCOSE-6-PHOSPHATASE 58
3.10.1 HINTERGRUND 58
3.10.2 LOESUNGEN 58
3.10.3 VERSUCHSAUFBAU 60
3.11 FAERBUNGEN: PERJODSAEURE-SCHIFF 61
3.11.1 HINTERGRUND 61
3.11.2 LOESUNGEN 61
3.11.3 VERSUCHSAUFBAU..... 61
3.12 FAERBUNGEN: OELROT (SUDANROT FAERBUNG) 62
3.12.1 HINTERGRUND 62
3.12.2 LOESUNGEN 62
3.12.3 VERSUCHSAUFBAU 63
3.13 FLUORESZENZMESSUNG MIT ALAMAR BLUE 64
3.13.1 MATERIALIEN 64
3.13.2 VERSUCHSAUFBAU 64
3.14 DARBEPOETIN TOXIZITAET TEST 65
3.14.1 MATERIALIEN 65
3.14.2 VERSUCHSAUFBAU 65
3.15 APOPTOSE ANALYSE MIT DNA LEITER 67
3.15.1 MATERIALIEN 67
3.15.2 LOESUNGEN 68
3.15.3 VERSUCHSAUFBAU 69
3.16 APOPTOSE ANALYSE MIT FLUORESCENCE ACTIVATED CELL SORTING
(DURCHFLUSSZYTOMETRIE) 70
3.16.1 HINTERGRUND 70
3.16.2 MATERIALIEN 70
3.16.3 LOESUNGEN 71
3.16.4 VERSUCHSAUFBAU 71
3.17 PROLIFERATIONS-TEST MIT DARBEPOETIN 72
3.17.1 MATERIALIEN 72
3.17.2 VERSUCHSAUFBAU 72
3.18 PROTEINGEWINNUNG UND WESTERN BLOT ANALYSE 73
3.18.1 MATERIALIEN 73
3.18.2 VERSUCHSAUFBAU 77
3.19 STATISTIK 79
4 ERGEBNISSE 80
4.1 ZELLCHARAKTERISIERUNG 80
4.1.1 HARNSTOFF- UND GLUKOSEMESSUNG 80
4.1.2 FAERBUNGEN 83
4.2 WIRKUNG VON DPO AUF HUMANE HEPATOZYTEN UND LEBERTUMORZELLEN 87
4.2.1 VERRINGERTE ZELLZAHL EINZELNER TUMORZELLLINIEN NACH STIMULATION
MIT DPO 87
4.3 DPO INDUZIERTE APOPTOSE IN TUMORZELLEN 89
4.3.1 KEIN HINWEIS
VON APOPTOSE
IM DNA
LADDERING 89
4.3.2 FLUORESCENCE ACTIVATED
CELL SORTING ANALYSE 91
4.4 HEMMENDE WIRKUNG VON DPO AUF DIE PROLIFERATION VON HUH7 94
4.5 WESTERN BLOT 95
4.5.1 VERMEHRTE EXPRESSION
VON P53
IN HUH7 ZELLEN 96
4.5.2 VERMEHRTE EXPRESSION VON
P53 IN HEP3B ZELLE 97
5 DISKUSSION..:. 98
6 ZUSAMMENFASSUNG UND AUSBLICK 106
7 VERZEICHNISSE 109
7.1 TABELLENVERZEICHNIS 109
7.2 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 109
7.3 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 110
7.4 LITERATURVERZEICHNIS 111
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