Untersuchungen zur Rolle des Transkriptionsfaktors NF-IL6 in der Hypothalamus-Hypophysen-Achse bei Ratten und Mäusen nach psychologischem und inflammatorischem Stress:
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Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Gießen
VVB Laufersweiler Verlag
2013
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adam_text | INHALTSANGABE
I. EINLEITUNG 6
1. FUNKTION UND AUFBAU DER BLUTHIRNSCHRANKE (BHS) 7
2. CIRCUMVENTRIKULAERE ORGANE (CVO) 8
3. SIGNALWEGE ZWISCHEN IMMUN- UND ZENTRALEM NERVENSYSTEM ...9
3.1. DIE AKUTE-PHASE-REAKTION (APR) 10
3.2. DER HUMORALE SIGNALWEG 10
3.3. DER NEURONALE SIGNALWEG 11
4. DIE HYPOTHALAMUS-HYPOPHYSEN-NEBENNIERENRINDEN-ACHSE..L2
4.1. ANATOMISCHER AUFBAU DER HPA-ACHSE 13
4.2. DAS PROTEIN POMC (PROOPIOMELANOCORTIN) 18
4.3. NEBENNIERE (GLANDULA SUPRARENALIS) 19
4.4. DIE AKTIVIERUNG DER HPA-ACHSE (BASAL UND IN STRESSSITUATIONEN) 19
4.5. DIE POTENZIELLE BEDEUTUNG DER SCVO S BEI DER AKTIVIERUNG DER HPA-
ACHSE 22
5. TRANSKRIPTIONSFAKTOREN 24
5.1. NF
K
B 25
5.2. STAT3 26
5.3. NF-IL6 27
5.4. DAS ANATOMISCHE VERTEILUNGSMUSTER VON LPS-INDUZIERTEN NF-IL6-
SIGNALEN SOWIE PHAENOTYPEN REAGIERENDER ZELLPOPULATIONEN IM GEHIRN 31
5.5. NF-IL6 IN DER THERMOREGULATION UND DIE ENTSTEHUNG VON FIEBER 32
5.6. DIE ROLLE VON NF-IL6 IN DER HPA-ACHSE 33
6. LIPOPOLYSACCHARID (LPS) 34
7. ZYTOKINE 35
7.1. ZYTOKINE UND PHYSISCHER ODER EMOTIONALER STRESS 37
7.2. TUMORNEKROSEFAKTOR (TNF) 37
7.3. INTERLEUKIN 1 (IL-1) 40
7.4. INTERLEUKIN 6 (IL-6) 42
7.5. INTERLEUKIN 10 (IL-10) 44
8. ZIELE UND FRAGESTELLUNGEN DER ARBEIT 46
II. MATERIAL UND METHODEN 49
1. TECHNISCHE GERAETE 49
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INHALTSANGABE - 2 -
2. SOFTWARE 51
3. CHEMIKALIEN UND SUBSTANZEN 52
4. MEDIKAMENTE UND OP-BEDARF 53
5. ANTIKOERPER 54
5.1. PRIMAERANTIKOEIPER 54
5.2. SEKUNDAERANTIKOERPER 55
6. GE- UND VERBRAUCHSMATERIALIEN 56
6.1. ALLGEMEIN 56
6.2. TIERHALTUNG 57
6.3. IMMUNHISTOCHEMIE UND IMMUNZYTOCHEMIE 58
6.4. ZELLKULTUR 58
6.5. GENOTYPISIERUNG UND GEL-ELEKTROPHORESE 59
6.6. QUANTITATIVE REAL-TIME-PCR 59
6.7. TNF-A UND IL-6 BIOASSAYS 60
7. IN VIVO VERSUCHE 61
7.1. VERSUCHSTIERE 61
7.2. TELEMETRIE UND KLIMAKAMMER 74
8. ERFASSUNG PHYSIOLOGISCHER DATEN 75
8.1. MESSUNG VON KOERPERTEMPERATUR UND MOTORISCHER AKTIVITAET 75
8.2. RATTENSENDER 75
8.3. MAEUSESENDER 76
8.4. ERFASSUNG VON FUTTER- UND WASSERAUFHAHME 78
8.5. ENTWICKLUNG DER KOERPERMASSE 78
8.6. OPERATIONEN 79
8.7. STIMULATION DER VERSUCHSTIERE UND INJEKTIONEN 81
8.8. PERFUSION UND ORGANENTNAHME 82
9. ERFASSUNG BIOCHEMISCHER PARAMETER 85
9.1. IMMUNHISTOCHEMIE UND IMMUNZYTOCHEMIE 85
9.2. ZYTOKINBIOASSAY FUER DIE ZYTOKINE IL-6 UND TNF-A 90
9.3. QUANTITATIVE REAL-TIME PCR 96
10. IN VITRO VERSUCHE 104
10.1. PRIMAERE ZELLKULTUR DES HYPOPHYSENVORDERLAPPENS (HVL) 104
-3-
INHALTSANGABE
III. ERGEBNISSE 109
11. QUALITATIVE AUSWERTUNG DER NF-IL6 IMMUNREAKTIVITAET IN
AUSGEWAEHLTEN REGIONEN DES MAEUSEGEHIRNS 109
12. CHARAKTERISIERUNG DER AKTIVIERUNG ENTSCHEIDENDER
TRANSKRIPTIONSFAKTOREN IM VERLAUF VON LPS-INDUZIERTEN
ENTZUENDUNGSREAKTIONEN IN DER HYPOPHYSE VON RATTEN
112
12.1. CHARAKTERISIERUNG DER NF-IL6-IMMUNREAKTIVITAET IM ZEITLICHEN
VERLAUF
UND IN ABHAENGIGKEIT VON DER LPS DOSIS 112
12.2. NF
K
B- UND STAT3-AKTIVITAET SOWIE DIE INTERAKTION MIT NF-IL6 115
12.3. IDENTIFIZIERUNG DER VERSCHIEDENEN NF-IL6-IMMUNREAKTIVEN
ZELLPHAENOTYPEN 117
13. CHARAKTERISIERUNG DER NF-IL6-REAKTIVITAET IM
HYPOTHALAMUS UND IN DER HYPOPHYSE VON RATTEN NACH OPEN FIELD
STRESS
122
13.1. PHYSIOLOGISCHE PARAMETER UND PLASMAZYTOKINE NACH OPEN FIELD STRESS
122
13.2. MOLEKULARE UND IMMUNHISTOCHEMISCHE ANALYSEN DER RATTENGEHIRNE .129
14. CHARAKTERISIERUNG DER BEDEUTUNG VON ZYTOKINEN FUER DIE
AKTIVIERUNG VON NF-IL6 BEI LPS-INDUZIERTEN ENTZUENDUNGEN
ANHAND PRIMAERER ZELLKULTUREN DES HVL DER RATTE
142
14.1. IMMUNZYTOCHEMISCHE ANALYSEN UND MESSUNG VON ZYTOKINEN IN
UEBERSTAENDEN DER PRIMAEREN HVL-ZELLKULTUR 142
14.2. CHARAKTERISIERUNG DER NF-IL6- UND TNF-A-IMMUNREAKTIVITAET NACH LPS-
STIMULATION 144
14.3. CHARAKTERISIERUNG DER ACTH-IMMUNREAKTIVITAET NACH LPS-STIMULATION
149
15. CHARAKTERISIERUNG VON VERAENDERTEN, PHYSIOLOGISCHEN
PARAMETERN IM VERLAUF LPS-INDUZIERTER ENTZUENDUNGSREAKTIONEN
BEI HOMOZYGOTEN, NF-IL6-DEFIZIENTEN MAEUSEN IM VERGLEICH ZU
DEN
WILDTYP-GESCHWISTERN 153
15.1. VERAENDERUNGEN DER PHYSIOLOGISCHEN PARAMETER IN ABHAENGIGKEIT VON
ZWEI VERSCHIEDENEN, SYSTEMISCH VERABREICHTEN LPS-DOSEN 153
IV. DISKUSSION 165
16. NF-IL6-IMMUNREAKTIVITAET IM GEHIRN DER MAUS 165
INHALTSANGABE
-4-
17. NF-IL6 IN DER LPS-INDUZIERTEN BZW. STRESSINDUZIERTEN
AKTIVIERUNG DER HPA-ACHSE 166
17.1. NF-IL6 ALS AKTIVIERUNGSMARKER IN DER HYPOPHYSE IM ZEITLICHEN
VERLAUF
NACH LPS-STIMULATION 168
17.2. NF-IL6-INTERAKTION MIT NFKB UND STAT3 IM HVL NACH LPS-
STIMULATION 168
17.3. NF-IL6-IMMUNREAKTIVE ZELLPHAENOTYPEN UND IHRE MOEGLICHE FUNKTION IN
DER HYPOPHYSE VON RATTEN NACH EINEM INFEKTIOESEM ODER EINEM
PSYCHOLOGISCHEN STIMULUS
170
17.4. BETEILIGUNG VON NF-IL6 UND ANDEREN TRANSKRIPTIONSFAKTOREN AN DER
ACTH-SYNTHESE IN CORTICOTROPEN ZELLEN DER HYPOPHYSE 173
18. *EFFEKTE DES OPEN FIELD STRESS EXPERIMENTS UND DER
MOEGLICHE ZUSAMMENHANG MIT NF-IL6 174
18.1. STRESSINDUZIERTE ERHOEHUNG DER KOERPERKERNTEMPERATUR BEI RATTEN 174
18.2. STRESSINDUZIERTE ERHOEHUNG DER MOTORISCHEN AKTIVITAET BEI RATTEN 177
19. WEITERE AUSWIRKUNGEN DES NF-IL6-KNOCK-OUTS AUF DIE
MURINE THERMOREGULATION 181
19.1. BEOBACHTETE *NEBENEFFEKTE DES NF-IL6-KNOCK-OUTS 184
20. AKTIVIERUNG VON NF-IL6 DURCH PROINFLAMMATORISCHE
ZYTOKINE IN DER HYPOPHYSE IM RAHMEN LPS-INDUZIERTER
ENTZUENDUNGEN
185
20.1. SYNTHESE VON TNF-A UND IL-6 IN DER LPS-STIMULIERTEN HYPOPHYSE
..185
20.2. AKTIVIERUNG VON NF-IL6 UND ANDEREN TRANSKRIPTIONSFAKTOREN IM
ZYTOKINMILIEU DES HVL 187
21. FAZIT UND AUSBLICK 192
V. ZUSAMMENFASSUNG 195
VI. SUMMARY 199
VII. ABKUERZUNGEN 203
VIII. LITERATURVERZEICHNIS 206
IX. ANHANG 237
22. PUBLIKATIONEN 237
22.1. ZITIERBARE KURZMITTEILUNGEN 237
-5-
INHALTSANGABE
23. DANKSAGUNG 238
24. ERKLAERUNG 239
|
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