Dopaminerge Differenzierung adulter humaner hippocampaler Stammzellen:
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INHALTSVERZEICHNIS
1 ZUSAMMENFASSUNG 6
2 EINLEITUNG 10
3 MORBUS PARKINSON 13
3.1 PATHOPHYSIOLOGIE UND KLINIK 13
3.2 AKTUELLE THERAPIEN DES MORBUS PARKINSON 15
3.3 ZELLERSATZTHERAPIE BEIM MORBUS PARKINSON 16
4 STAMMZELLEN 18
4.1 TERMINOLOGIE 18
4.2 EIGENSCHAFTEN VERSCHIEDENER STAMMZELLEN 20
4.3 AUSWIRKUNG DER STAMMZELLEIGENSCHAFTEN AUF DIE THERAPEUTISCHE
ANWENDBARKEIT 21
5 NEURALE STAMMZELLEN UND NEUROGENESE 23
5.1 NEURALE STAMMZELLEN 23
5.2 NEUROGENESE 25
5.2.1 EMBRYONALE ENTWICKLUNG DES ZENTRALEN NERVENSYSTEMS 26 5.2.2
EMBRYONALE ENTWICKLUNG MESENCEPHALER DOPAMINERGER NEURONE 27 5.2.3
ADULTE NEUROGENESE 30
5.2.4 ADULTE NEURALE STAMMZELLEN IN VITRO 34
6 STAMMZELLBASIERTE THERAPIEANSAETZE 35
7 MATERIALIEN UND METHODEN 37
7.1 BEZUGSQUELLEN 37
7.2 MATERIALIEN 37
7.2.1 LOESUNGEN, ZELLKULTURMEDIEN UND REAGENZIEN 37
7.2.2 LISTE DER VERWENDETEN ANTIKOERPER 42
7.2.3 LISTE DER VERWENDETEN PRIMER 43
7.3. METHODEN 44
7.3.1 PATIENTEN 44
I 7.3.2 ISOLIERUNG ADULTER HUMANER HIPPOCAMPALER STAMMZELLEN 45 7.3.3
EXPANSION UND PASSAGIEREN VON ADULTEN HUMANEN HIPPOCAMPALEN STAMMZELLEN
47
7.3.4 DIFFERENZIERUNG VON ADULTEN HUMANEN HIPPOCAMPALEN STAMMZELLEN 48
7.3.5 IMMUNFLUORESZENZFARBUNG UND IMMUNFLUORESZENZ-MIKROSKOPIE 49 7.3.6
WESTERN-BLOT 50
7.3.7 RNA-ISOLATION UND (RT)-PCR ANALYSE 52
7.3.8 ELEKTROPHYSIOLOGISCHE ZELLUNTERSUCHUNG 53
7.3.9 STATISTISCHE ANALYSE 54
8 ERGEBNISSE 55
8.1 ISOLATION UND PROLIFERATION ADULTER HUMANER HIPPOCAMPALER
STAMMZELLEN 55 8.2 EFFEKT VON SHH UND FGF8 AUF DIE DOPAMINERGE
DIFFERENZIERUNG ADULTER HUMANER HIPPOCAMPALER STAMMZELLEN 58
8.3 DOPAMINERGE DIFFERENZIERUNG ADULTER HUMANER HIPPOCAMPALER
STAMMZELLEN 60 8.3.1 ANALYSE DER IMMUNFLUORESZENZFARBUNGEN 60
8.3.2 VERGLEICH DER GEN- UND PROTEINEXPRESSIONSPROFILE SPONTAN
DIFFERENZIERTER UND GERICHTET DIFFERENZIERTER DOPAMINERGER NEURONE 63
8.3.2.1 EXPRESSION VON NESTIN 64
8.3.2.2 EXPRESSION VON SS-III-TUBULIN 66
8.3.2.3 EXPRESSION VON TYROSINHYDROXYLASE 68
8.3.2.4 EXPRESSION VON NURRL UND PITX3 70
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IMAGE 2
8.4 ELEKTROPHYSIOLOGISCHE UNTERSUCHUNG NEURONAL DIFFERENZIERTER ZELLEN
72
9 DISKUSSION 73
LITERATURVERZEICHNIS 80
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 95
DANKSAGUNG 98
LEBENSLAUF 99
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