Einfluss von orthotoper Injektion eines TLR9-Liganden auf das Überleben von Mäusen mit Magentumor:
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V
INHALT
1 EINLEITUNG 1
1.1 HINTERGRUND 1
1.1.1 MAGENTUMOREN 1
1.1.2 IMMUNTHERAPIE VON TUMOREN 3
1.1.3 PATTERN-RECOGNITION RECEPTORS (PRRS) 6
1.1.4 7B//-//(RE-REZEPTOREN 7
1.1.5 CPG-OLIGODESOXYNUKLEOTIDE 7
1.1.6 IMMUNTHERAPIE MIT CPG 8
1.1.7 CEA424-SV40-TAG-MAUSMODELL 9
1.1.8 DAS INTEGRIN A4SS7 10
1.2 FRAGESTELLUNG 12
2 MATERIAL UND METHODEN 14
2.1 MATERIAL 14
2.1.1 GERAETE 14
2.1.2 MATERIALIEN 14
2.1.2.1 SKALPELLE 15
2.1.2.2 FAEDEN 15
2.1.2.3 TUECHER 15
2.1.2.4 SPRITZEN 15
2.1.2.5 VERSUCHSTIERE 15
2.1.3 CHEMIKALIEN, REAGENZIEN UND PUFFER 16
2.1.4 ZELLKULTURMATERIALEN, REAGENZIEN UND MEDIEN 17
2.1.4.1 LOESUNGEN 19
2.1.5 NARKOSE UND ANTIDOTA 19
2.1.6 TLR-LIGANDEN 20
2.1.7 FACS-ANTIKOERPER 21
2.1.8 SOFTWARE 21
2.2 METHODEN 22
2.2.1 TIEREXPERIMENTE 22
2.2.2 BEOBACHTUNG DES CEA424-SV40-TAG-MODELL-TUMORS 22
2.2.2.1 BEOBACHTUNG DER TUMOR TRAGENDEN MAEUSE 22
2.2.3 LOKALE INJEKTION VON TLR-LIGANDEN 22
2.2.3.1 OP-VORBEREITUNG 22
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IMAGE 2
V I
2.2.3.2 SEDIERUNG DER VERSUCHSTIERE 23
2.2.3.3 DURCHFUEHRUNG DER ENTWICKELTEN OP-TECHNIK 23
2.2.3.4 OP-ABSCHLUSS 24
2.2.4 PET-UNTERSUCHUNG 25
2.2.4.1 PET-ANWENDUNG IN DER MEDIZIN 25
2.2.4.2 DIE PHYSIKALISCHE GRUNDLAGE DER PET-UNTERSUCHUNG 25
2.2.5 HISTOLOGISCHE FAERBEMETHODEN 27
2.2.5.1 HE-FAERBUNG 27
2.2.5.2 IMMUNFLUORESZENZ 27
2.2.6 ISOLATION VON SPLENOZYTEN 28
2.2.7 ZELLKULTUR 28
2.2.7.1 ALLGEMEINE KULTURBEDINGUNGEN 28
2.2.7.2 BESTIMMUNG VON ZELLZAHL UND VITALITAET 29
2.2.8 DURCHFLUSSZYTOMETRIE 29
2.2.8.1 ALLGEMEINES FUNKTIONSPRINZIP 29
2.2.8.2 BESTIMMUNG VON OBERFLAECHENMOLEKUELEN 31
2.3 STATISTIK 32
3 ERGEBNISSE 33
3.1 ETABLIERUNG EINER OP-METHODE ZUR ORTHOTOPEN TUMORTHERAPIE 33
3.1.1 EINLEITUNG/OP-TECHNIK 33
3.1.2 UEBERBLICK ZUR DURCHFUEHRUNG EINER MAGEN-OP 35
3.1.3 DURCHFUEHRUNG MAGEN-OP 36
3.1.4 INJEKTION VON TUSCHE 38
3.1.5 INDUKTION EINER TOPISCHEN ENTZUENDUNGSREAKTION DURCH INJEKTION VON
CPG IN WILDTYPMAEUSEN 39
3.1.5.1 PET-ANALYSE NACH CPG-GABE 39
3.1.5.2 MESSUNG DES VIRTUELLEN ENTZUENDUNGSVOLUMEN 42
3.1.5.3 RUECKGANG DER ENTZUENDUNGSINTENSITAET NACH CPG 1826 INJEKTION 44
3.2 THERAPIE VON CEA424-TAG MAEUSEN MIT CPG 1826 45
3.2.1 TUMORVOLUMEN IM PET NACH CPG-THERAPIE 45
3.2.2 GEWICHTSENTWICKLUNG NACH THERAPIE MIT CPG 47
3.2.3 UEBERLEBEN VON MAEUSEN NACH CPG-THERAPIE 50
3.2.4 DARSTELLUNG DER PET-DATEN EINER TUMORTRAGENDEN CEA424-SV40-TAG
MAUS UNTER CPGTHERAPIE 52
3.2.5 UEBERLEBEN VON MAEUSEN MIT PBS VS. CPG-THERAPIE 53
3.2.6 GEWICHTSDATEN NACH INJEKTION VON CPG 1826 UND PBS IN CEA424-TAG
MAEUSE 55
3.2.7 MAKROSKOPISCHE UND MIKROSKOPISCHE DARSTELLUNG VON THERAPIERTEN
CEA424-TAGTUMOREN 56
IMAGE 3
V I I
3.2.7.1 MAKROSKOPISCHE DARSTELLUNG 56
3.2.7.2 MIKROSKOPISCHE DARSTELLUNG 57
3.3 A4SS7-REGULATION 6 1
4 DISKUSSION 63
4.1 UEBERSICHT UEBER DIE EXPERIMENTELLEN BEFUNDE 63
4.2 WIE FUEHRT CPG NACH INJEKTION ZU EINER LOKALEN ENTZUENDUNG? 64
4.3 WELCHE MECHANISMEN FUEHREN ZU EINER TUMORSUPPRESSION DURCH CPG? 65
4.3.1 CHEMOKINE 65
4.3.2 ZYTOTOXISCHE T-ZELLEN 66
4.3.3 T-ZELL-MIGRATION 67
4.4 WELCHE MOLEKULAREN MECHANISMEN INDUZIERT CPG NACH BINDUNG AN
TOLL-LIKE REZEPTOREN? 68
4.5 WARUM FUEHRT EINE CPG-INJEKTION ZU EINEM VERBESSERTEN UEBERLEBEN? 70
4.6 WELCHE MOEGLICHEN ZUKUENFTIGEN THERAPIE-ANSAETZE ENTSTEHEN AUS DIESER
ARBEIT? 7 1
4.6.1 UEBERTRAGBARKEIT AUF DEN MENSCHEN 71
4.6.2 WELCHE KLINISCHE RELEVANZ HABEN DIE ERGEBNISSE? 71
5 ZUSAMMENFASSUNG 73
6 DANKSAGUNG 75
7 VEROEFFENTLICHUNGEN 76
8 ABKUERZUNGEN UND NORMEN 78
8.1 ABKUERZUNGEN 78
8.2 NORMEN 80
9 LITERATURVERZEICHNIS 8 1
10 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 87
11 TABELLENVERZEICHNIS 88
12 ROHDATEN ZU DEN ABBILDUNGEN 89
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