Genetische Unterschiede zwischen Coxiella burnetii-Isolaten und ihre Korrelation zur Epidemiologie und Klinik des Q-Fiebers:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Gießen, Lahn
VVB Laufersweiler Verlag
2012
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| Ausgabe: | 1. Aufl. |
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | V, 77 S. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
2 LITERATURUEBERSICHT 3
2.1 COXIELLA BUMETII 3
2.1.1 ALLGEMEINE EIGENSCHAFTEN 3
2.1.2 TAXONOMIE 3
2.1.3 GENOM VON COXIELLA BURNETII 3
2.1.3.1 ACUTE DISEASE ANTIGEN A-GEN 3
2.1.3.2 RFLP 5
2.1.3.3 PLASMIDE 6
2.1.3.4 MI V A 8
2.1.4 VIRULENZFAKTOREN 10
2.1.5 INFEKTIONEN BEI MENSCH UND TIER 13
3 METHODEN 15
3.1 HERSTELLUNG VON KEIM-SUSPENSIONEN 15
3.1.1 ANZUECHTUNG UND VERMEHRUNG 15
3.1.2 ISOLATE 15
3.1.3 ZELLLINIEN 18
3.1.4 AUFREINIGUNG 18
3.1.5 MIKROSKOPISCHE BESTIMMUNG DER PARTIKELZAHL 19
3.1.6 INAKTIVIERUNG 19
3.1.7 GIMENEZ-FAERBUNG 20
3.2 POLYMERASE KETTENREAKTION (PCR) 20
3.2.1 PRAEPARATION BAKTERIELLER GESAMT-DNA 20
3.2.2 MULTIPLEX-PCR FUER DIE PLASMIDDIFFERENZIERUNG UND ADA/A-PCR 20
3.2.3 XL-PCR 21
3.2.4 MULTIPLE LOCI VARIABLE NUMBER O F TANDEM REPEATS ANALYSIS 22
3.2.5 ANALYTISCHE AGAROSE-GEL-ELEKTROPHORESE 23
3.2.6 ANALYTISCHE POLYACRYLAMID-GEL-ELEKTROPHORESE 23
3.3 RESTRIKTIONSFRAGMENTLAENGENPOLYMORPHISMUS (RFLP) 25
3.3.1 HERSTELLUNG DER AGAROSEBLOECKCHEN FUER DIE CONTOUR-CLAMPED
HOMOGENEOUS ELECTRIC FIELD - PULSE FIELD GEL ELECTROPHORESIS (CHEF-PFGE)
25
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3.3.2 FREISETZUNG UND VERDAU DER IN DEN AGAROSEBLOECKCHEN
ENTHALTENEN DNA 25
3.3.3 CONTOUR-CLAMPED HOMOGENEOUS ELECTRIC FIELD - PULSE FIELD GEL
ELECTROPHORESIS (CHEF-PFGE) 26
4 ERGEBNISSE 27
4.1 GENETISCHE CHARAKTERISIERUNG VON C. BURNETII- ISOLATEN 27
4.1.1 DARSTELLUNG DER PLASMIDE MITTELS MULTIPLEX-PCR 27
4.1.2 VERGLEICHENDE PCRS FUER DIE PLASMIDE QPRS UND QPDV 28
4.1.3 NACHWEIS DES ACUTE DISEASE ANTIGEN A (ADA/4)-GENS 30
4.1.4 MULTIPLE LOCI VARIABLE NUMBER O F TANDEM REPEATS ANALYSIS (MLVA)
31
4.1.5 RESTRIKTIONSFRAGMENTLAENGENPOLYMORPHISMUS (RFLP) 38
4.1.6 GENOTYPISIERUNG VON HUMANEN ISOLATEN 4 0
5 DISKUSSION 41
5.1 BEDEUTUNG DES ADAA- GENS FUER DIE PATHOGENITAET 4 1
5.2 TYPISIERUNG MITTELS RFLP-PFGE 4 2
5.3 TYPISIERUNG MITTELS MLVA 4 6
5.4 VERGLEICH DER PLASMIDSEQUENZEN 50
6 ZUSAMMENFASSUNG 53
7 SUMMARY 55
8 LITERATURVERZEICHNIS 57
9 ANHANG 68
10 TABELLEN 76
11 ABBILDUNGEN 77
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