Stadienspezifische mRNA-Expression der Kernproteine Protamin und Transitionsprotein im Verlauf der Spermatogenese beim Hengst:
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| Format: | Thesis Book |
| Language: | German |
| Published: |
Gießen, Lahn
VVB Laufersweiler Verlag
2011
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| Edition: | 1. Aufl. |
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| Physical Description: | 166 S. Ill., graph. Darst. |
| ISBN: | 9783835958593 |
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INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG 10
2. LITERATURUEBERSICHT 12
2.1 EINLEITUNG D E R LITERATURUEBERSICHT 12
2.2 SPERMATOGENESE 15
2.2.1 O R T D E R SPERMATOGENESE: ANATOMISCHE U N D ENDOKRINOLOGISCHE G
R U N D L A G E N 15
2.2.2 KEIMZELLDIFFERENZIERUNG U N D SPERMATOGENESESTADIEN 17
2.2.3 KINETIK D E R SPERMATOGENESE 19
2.2.4 H O R M O N E L L E REGULATION DER SPERMATOGENESE B E I M PFERD 21
2.2.5 PUBERTAET U N D SPERMATOGENESE B E I M PFERD 2 2
2.2.6 SAISONALE BEEINFLUSSUNG D E R REPRODUKTIVEN VORGAENGE B E I M H E N
G S T 2 3
2.3 KRYPTORCHISMUS 2 4
2.4 KERNPROTEINE (ZELLKERNPROTEINE) 2 5
2.5 TRANSITIONSPROTEINE 2 6
2.5.1 Z U S A M M E N S E T Z U N G 2 8
2.5.1.1 TRANSITIONSPROTEIN 1 2 8
2.5.1.2 TRANSITIONSPROTEIN 2 2 8
2.5.1.3 WEITERE TRANSITIONSPROTEINE 2 9
2.5.2 FUNKTIONEN U N D INTERAKTIONEN D E R TRANSITIONSPROTEINE 3 0
2.5.2.1 TRANSITIONSPROTEIN 1 30
2.5.2.2 TRANSITIONSPROTEIN 2 31
2.5.2.3 TRANSITIONSPROTEIN 3 U N D TRANSITIONSPROTEIN 4 3 2
2.5.3 AUSTAUSCH D E R HISTONE GEGEN DIE TRANSITONSPROTEINE 3 3
2.6 PROTAMINE 3 5
2.6.1 HISTORIE 3 5
2.6.2 Z U S A M M E N S E T Z U N G 3 7
2.6.2.1 PROTAMIN 1 ( P R M L ) U N D SEINE STRUKTUR 3 7
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IMAGE 2
2.6.2.2 PROTAMIN 2 (PRM2) U N D SEINE STRUKTUR 3 8
2.6.3 INTERAKTIONEN D E R PROTAMINE 3 9
2.6.3.1 INTERAKTIONEN Z W I S C H E N D N A U N D P R O T A M I N E N 3
9
2.6.3.2 INTERMOLEKULARE INTERAKTIONEN D E R PROTAMINE 4 5
2.6.3.3 TERTIAERSTRUKTUR U N D RAEUMLICHE A N O R D N U N G D E R P R O T
A M I N - D N A - K O M P L E X E IM
S P E R M I E N Z E L L K E M 4 8
2.6.4 F U N K T I O N U N D B E D E U T U N G D E R PROTAMINE F UE R D A
S S P E R M I U M 5 6
2.7 STADIENSPEZIFISCHE TRANSKRIPTION U N D EXPRESSION V O N PROTAMINEN U
N D
TRANSITIONSPROTEINEN 6 0
2.8 H O M O L O G I E N 6 2
2.8.1 TRANSITIONSPROTEIN 1 6 2
2.8.2 TRANSITIONSPROTEIN 2 6 2
. 2.8.3 PROTAMIN I 6 2
2.8.4 PROTAMIN 2 6 3
3. MATERIAL U N D M E T H O D E N 6 4
3.1 MATERIALGEWINNUNG 6 4
3.2 FIXIERUNG D E S H O D E N G E W E B E S 6 4
3.3 EINBETTUNG U N D SCHNITTHERSTELLUNG 6 5
3.3.1 EINBETTUNG IN PARAFFIN 6 5
3.3.2 BESCHICHTUNG D E R OBJEKTTRAEGER 6 5
3.3.3 HERSTELLUNG D E R PARAFFINSCHNITTE 6 6
3.4 HAEMATOXYLIN-EOSIN ( H E ) - F AE R B U N G 6 6
3.4.1 DURCHFUEHRUNG 6 6
3.4.2 KRITERIEN FUER DIE B E W E R T U N G D E R H E - F AE R B U N G 6 7
3.4.2.1 LICHTMIKROSKOPISCHE KRITERIEN FUER DIE Z U O R D N U N G Z U G R
U P P E 1 6 8
3.4.2.2 LICHTMIKROSKOPISCHE KRITERIEN F UE R D I E Z U O R D N U N G Z U
G R U P P E 2 6 8
3.4.2.3 LICHTMIKROSKOPISCHE KRITERIEN F UE R D I E Z U O R D N U N G Z U
G R U P P E 3 6 8
3.4.2.4 LICHTMIKROSKOPISCHE KRITERIEN FUER D I E Z U O R D N U N G Z U G
R U P P E 4 6 9
I
3.5 R E V E R S E TRANSKRIPTION ( R T ) POLYMERASE CHAIN REACTION ( P C
R ) 7 0
3.5.1 EXTRAKTION V O N R N A AUS KRYOMATERIAL 7 0
IMAGE 3
3.5.2 ERSTE-STRANG-SYNTHESE ( C D N A ) 7 2
3.5.3 P C R 7 3
3.5.4 AGAROSE-GEL-ELEKTROPHORESE 7 4
3.6 IN-SITU-HYBRIDISIERUNG (ISH) 7 6
3.6.1 PROTOKOLL 7 6
3.6.2 KRITERIEN FUER DIE BEWERTUNG D E R I S H 81
4. ERGEBNISSE 8 2
4.1 UEBERSICHT UE B E R DAS UNTERSUCHTE HODENMATERIAL 8 2
4.1.1 ALTERSVERTEILUNG D E R HENGSTE 8 2
4.1.2 ANAMNESTISCHE EINTEILUNG D E S UNTERSUCHTEN HODENMATERIALS 8 2
4.2 HAEMATOXYLIN-EOSIN(HE)-FAERBUNG 8 3
4.2.1 A U S W E R T U N G D E R HAMATOXYLIN-EOSIN-FAERBUNG 8 3
4.2.2 DOKUMENTATION D E R H E - F AE R B U N G E N 85
4.3 R T - P C R 8 9
4.4 IN-SITU-HYBRIDISIERUNG 9 0
4.4.1 A U S W E R T U N G FUER TRANSITIONPROTEIN 1 - M R N A ( T P L - M
R N A ) 9 0
4.4.1.1 T P L - M R N A - E X P R E S S I O N IN J U V E N I L E M H O D
E N G E W E B E ( G R U P P E 1) 9 0
4.4.1.2 T P L - M R N A - E X P R E S S I O N IN H O D E N G E W E B E M
I T N O R M A L E R SPERMATOGENESE
(GRUPPE 2) 9 0
4.4.1.2.1 DOKUMENTATION DER T P L - M R N A - E X P R E S S I O N IN N O
R M A L E M H O D E N G E W E B E 9 0
4.4.1.2.2 Z U S A M M E N F A S S U N G DER T P L - M R N A - E X P R E
S S I O N IN N O R M A L E M H O D E N G E W E B 9 4
4.4.1.3 T P 1 - M R N A - E X P R E S S I O N IN H O D E N G E W E B E M
I T UNVOLLSTAENDIGER SPERMATOGENESE
(GRUPPE 3) 9 5
4.4.1.4 T P L - M R N A - E X P R E S S I O N IN H O D E N G E W E B E O
H N E SPERMATOGENESE ( G R U P P E 4 ) 9 5
4.4.2 A U S W E R T U N G FUER TRANSITIONSPROTEIN 2 - M R N A 9 5
4.4.3 A U S W E R T U N G FUER PROTAMIN 1 - M R N A ( P R L - M R N A ) 9
6
4.4.3.1 P R L - M R N A - E X P R E S S I O N IN J U V E N I L E M H O D
E N G E W E B E ( G R U P P E 1) 9 6
4.4.3.2 P R L - M R N A - E X P R E S S I O N IN H O D E N G E W E B E M
I T N O R M A L E R SPERMATOGENESE
( G R U P P E 2) 9 6
4.4.3.2.1 D O K U M E N T A T I O N D E R P R L - M R N A - E X P R E S
S I O N INNERHALB E I N E R N O R M A L E N
IMAGE 4
SPERMATOGENESE 9 6
4.4.3.2.2. Z U S A M M E N F A S S U N G D E R P R L - M R N A - E X P R
E S S I O N INNERHALB E I N E R N O R M A L E N
SPERMATOGENESE 100
4.4.3.3 P R L - M R N A - E X P R E S S I O N IN H O D E N G E W E B E M
I T UNVOLLSTAENDIGER S P E R M A T O G E N E S E
( G R U P P E 3) 100
4.4.3.4 P R L - M R N A - E X P R E S S I O N IN H O D E N G E W E B E O
H N E SPERMATOGENESE ( G R U P P E 4) 101
4.4.4 A U S W E R T U N G FUER P R O T A M I N 2 - M R N A ( P R 2 - M -
R N A ) 101
4.4.4.1 P R 2 - M R N A - E X P R E S S I O N IN J U V E N I L E M H O D
E N G E W E B E ( G R U P P E 1) 101
4.4.4.2 P R 2 - M R N A - E X P R E S S I O N IN H O D E N G E W E B E M
I T N O R M A L E R S P E R M A T O G E N E S E
( G R U P P E 2) 101
4.4.4.2.1 D O K U M E N T A T I O N D E R P R 2 - M R N A - E X P R E S
S I O N INNERHALB E I N E R N O R M A L E N
SPERMATOGENESE 102
4.4.4.2.2 Z U S A M M E N F A S S U N G D E R P R 2 - M R N A - E X P R
E S S I O N INNERHALB EINER N O R M A L E N
SPERMATOGENESE 105
4.4.4.3 P R 2 - M R N A - E X P R E S S I O N IN H O D E N G E W E B E M
I T UNVOLLSTAENDIGER S P E R M A T O G E N E S E
( G R U P P E 3) 105
4.4.4.4 P R 2 - M R N A - E X P R E S S I O N IN H O D E N G E W E B E O
H N E SPERMATOGENESE ( G R U P P E 4) 106
4.4.4.5 BESONDERHEITEN D E R T P L - M R N A - E X P R E S S I O N
INNERHALB VERSCHIEDENER ALTERS
GRUPPEN 107
4.4.4.6 VERGLEICH D E R STADIENSPEZIFISCHEN M R N A - E X P R E S S I O
N V O N P R L U N D PR2 108
4.4.5 Z U S A M M E N F A S S U N G D E R ERGEBNISSE D E R I S H 110
5. DISKUSSION 111
5.1 HISTOLOGISCHEN BEURTEILUNG 111
5.2 R T - P C R 112
5.3 IN-SITU-HYBRIDISIERUNG 112
5.3.1 UEBERSICHT 112
5.3.2 TRANSITIONSPROTEINE 112
5.3.3 PROTAMINE 115
5.3.4 DISKUSSION D E R M E T H O D E D E R I S H 117
5.4 REGULATION D E R STADIENSPEZIFISCHEN EXPRESSION D E R KERNPROTEINE
117
IMAGE 5
6. Z U S A M M A N F A S S U N G 119
7. S U M M A R Y 121
8. LITERATURVERZEICHNIS 123
9. BEZUGQUELLEN 151
9.1 STOFFE, REAGENZIEN, ARBEITSMATERIALIEN 151
9.2 S O N D E N U N D P R I M E R 153
9.3 GERAETE U N D Z U B E H OE R 153
9.4 STAMM-, PUFFER- U N D ANDERE HERZUSTELLENDE L OE S U N G E N 154
10. VERZEICHNIS D E R A B K UE R Z U N G E N 158
11. D A N K S A G U N G 161
12. E R K L AE R U N G 163
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