Untersuchung adaptiver Vorgänge an den Photorezeptor-Bandsynapsen:
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VERZEICHNISSE
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
1.1 DIE RETINA 2
1.2 SYNAPSEN DER RETINA 4
1.2.1 ELEKTRISCHE SYNAPSEN 4
1.2.2 CHEMISCHE SYNAPSEN 5
1.2.3 DIE AKTIVE ZONE CHEMISCHER SYNAPSEN 6
1.2.4 BANDSYNAPSEN DER RETINA 9
1.2.5 MOLEKULARER AUFBAU DES BANDSYNAPSEN-KOMPLEXES 11
1.3 STRUKTURELLE PLASTIZITAET DER BANDSYNAPSE 13
1.4 FRAGESTELLUNG UND ARBEITSHYPOTHESE 15
2 ERGEBNISSE 16
2.1 FLUORESZENZMIKROSKOPISCHE UNTERSUCHUNGEN SYNAPTISCHER BAENDER 16
2.1.1 FAERBUNGEN DER PRAESYNAPTISCHEN PROTEINE RIBEYE UND BASSOON 16
2.1.2 STRUKTUR DER SYNAPTISCHEN BAENDER 19
2.1.3 FAERBUNGEN DER PRAESYNAPTISCHEN PROTEINE PICCOLO UND CACNALF 21
2.2 ULTRASTRUKTURELLE UNTERSUCHUNGEN SYNAPTISCHER BAENDER 23
2.2.1 SCHNITTEBENEN DURCH PHOTOREZEPTOR-BANDSYNAPSEN UND DEREN
ERSCHEINUNGSFORMEN 23
2.2.2 ULTRASTRUKTUR DER SYNAPTISCHEN BAENDER IN WILDTYPISCHEN
C57BL/6-MAEUSEN 26
2.2.3 ULTRASTRUKTUR DER SYNAPTISCHEN BAENDER IN BALB/C-MAEUSEN 28
2.2.4 ULTRASTRUKTUR DER SYNAPTISCHEN BAENDER IN B6 2J-MAEUSEN 29
2.2.5 VERGLEICH DER ULTRASTRUKTURELLEN VERAENDERUNGEN 30
2.2.6 ULTRASTRUKTUR DER SYNAPTISCHEN BAENDER IN ZAPFEN-PHOTOREZEPTOREN 31
2.3 RAEUMLICHE AUSDEHNUNG DER SYNAPTISCHEN BAENDER UND AKTIVEN ZONEN 33
2.3.1 HOEHE DER SYNAPTISCHEN BAENDER IN C57BL/6-MAEUSEN 33
2.3.2 HOEHE DER SYNAPTISCHEN BAENDER IN BALB/C- UND BOE^-MAEUSEN 34
2.3.3 LAENGE DER SYNAPTISCHEN BAENDER UND AKTIVEN ZONEN IN C57BL/6-MAEUSEN
35
2.3.4 LAENGE DER SYNAPTISCHEN BAENDER UND AKTIVEN ZONEN IN BALB/C-MAEUSEN
37
2.3.5 CIRCADIANE ABHAENGIGKEIT DER HOEHE UND LAENGE DER SYNAPTISCHEN BAENDER
UND DER LAENGE DER AKTIVEN ZONEN IN C57BL/6-MAEUSEN 38
2.4 GENEXPRESSION PRAESYNAPTISCHER PROTEINE 41
2.5 PROTEINMENGEN PRAESYNAPTISCHER PROTEINE 43
2.6 ENDOCYTOSE 47
2.7 AUSDEHNUNG DER POSTSYNAPTISCHEN INVAGINATIONEN 48
2.8 VESIKELVERTEILUNG AM SYNAPTISCHEN BAND 50
I
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IMAGE 2
VERZEICHNISSE
3 DISKUSSION 54
3.1 STRUKTURELLE VERAENDERUNGEN SYNAPTISCHER BAENDER VON
STAEBCHEN-PHOTOREZEPTOREN SIND ABHAENGIG VOM MAUSSTAMM 56
3.2 DER ALBINISMUS IST NICHT DER GRUND FUER DIE STRUKTURELLEN
VERAENDERUNGEN SYNAPTISCHER BAENDER VON STAEBCHEN-PHOTOREZEPTOREN IN
BALB/C-MAEUSEN 58
3.3 ERG-MESSUNGEN AN PIGMENTIERTEN UND ALBINOTISCHEN MAEUSEN ZEIGEN EINE
FEHLFUNKTION IN DER RETINA VON BALB/C-MAEUSEN 59
3.4 STRUKTURELLE VERAENDERUNGEN SYNAPTISCHER BAENDER ALS ZEICHEN VON
DEGENERATION 59
3.5 DIE STRUKTURELLEN VERAENDERUNGEN SYNAPTISCHER BAENDER BETREFFEN DIE
PROTEINE DES BANDKOMPARTIMENTS 60
3.6 LICHTABHAENGIGE VERAENDERUNGEN IN DER GENEXPRESSION UND DEN
PROTEINMENGEN PRAESYNAPTISCHER PROTEINE AN DEN PHOTOREZEPTOR-BANDSYNAPSEN
61
3.7 ENDOCYTOSE IN PHOTOREZEPTOREN 63
3.8 LICHTABHAENGIGE VERAENDERUNGEN IN DER AUSDEHNUNG DER POSTSYNAPTISCHEN
INVAGINATIONEN 65
3.9 VESIKELVERTEILUNG AM SYNAPTISCHEN BAND 67
3.10 FAZIT 69
4 MATERIAL UND METHODEN 70
4.1 CHEMIKALIEN UND BEZUGSFIRMEN 70
4.2 VERWENDETE LOESUNGEN 72
4.3 VERWENDETE ANTIKOERPER 77
4.4 VERWENDETE GERAETE UND HILFSMITTEL 78
4.5 VERSUCHSTIERE 80
4.6 FLUORESZENZMIKROSKOPIE 81
4.6.1 PRAEPARATION DER RETINA, FIXIERUNG UND ANFERTIGEN VON
GEFRIERSCHNITTEN 81
4.6.2 IMMUNZYTOCHEMISCHE FAERBUNGEN 82
4.6.3 LICHTMIKROSKOPISCHE ANALYSE 82
4.7 ELEKTRONENMIKROSKOPIE 83
4.7.1 FIXIERUNG FUER GUTE GEWEBEERHALTUNG 83
4.7.2 ELEKTRONENMIKROSKOPISCHE ANALYSE UND QUANTIFIZIERUNG 83
4.7.3 MESSUNG DER POSTSYNAPTISCHEN INVAGINATIONEN 84
4.7.4 ANALYSE DER VESIKELVERTEILUNG AM SYNAPTISCHEN BAND 85
4.8 PCR-ANALYSEN 85
4.8.1 LASER-MIKRODISSEKTION 85
4.8.2 RNA-ISOLATION UND CDNA-SYNTHESE 86
4.8.3 QUANTITATIVE REAL-TIME PCR 86
4.9 WESTERN BLOT ANALYSEN 89
4.9.1 HERSTELLUNG VON PROTEIN-LYSATEN 89
II
IMAGE 3
VERZEICHNISSE
4.9.2 BESTIMMUNG DER PROTEINKONZENTRATION 89
4.9.3 SDS-POLYACRYTAMID-GELELEKTROPHORESE (SDS-PAGE) 90
4.9.4 WESTERN BLOT TRANSFER UND ANALYSE 91
4.10 STATISTIK 92
5 ZUSAMMENFASSUNG 93
6 SUMMARY 95
7 LITERATURVERZEICHNIS 97
8 DANKSAGUNG 106
9 EIDESSTATTLICHE ERKLAERUNG 107
10 PUBLIKATIONEN 108
III
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