Zelluläre Seneszenz von mesenchymalen Stammzellen unter Einfluss von 17beta-Östradiol und Tamoxifen:
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS 1 EINLEITUNG * 1
1.1 KNORPELDEFEKTE: MOEGLICHKEITEN DER REPARATUR 2
1.2 TISSUE ENGINEERING: DIE LOESUNG DES KNORPELREPARATUR-PROBLEMS? 3
1.3 TELOMERE: MEHR ALS TTAGGG 4
1.4 TELOMER-HYPOTHESE UND REPLIKATIVE SENESZENZ: DIE INNERE UHR 6
1.5 OESTROGEN: KLEINES MOLEKUEL MIT GROSSER WIRKUNG 10
1.5.1 OESTROGEN UND KNORPEL 12
1.5.2 OESTROGEN UND TELOMERASE 13
1.6 TAMOXIFEN: DER ERSTE SERM 14
1.7 MESENCHYMALE STAMMZELLEN 15
2 FRAGESTELLUNG 18
3 MATERIAL UND METHODEN 19
3.1 MATERIAL 19
3.1.1 GERAETE UND HILFSMITTEL 19
3.1.2 CHEMIKALIEN UND REAGENZIEN 21
3.1.3 MEDIEN, PUFFER UND LOESUNGEN 23
3.2 BIOLOGISCHES UNTERSUCHUNGSMATERIAL 27
3.3 METHODEN 27
3.3.1 ZELLBIOLOGISCHE METHODEN 27
3.3.2 MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN 30
3.3.3 STATISTIK 44
4 ERGEBNISSE 46
4.1 ETABLIERUNG UND OPTIMIERUNG DER BENOETIGTEN METHODIK 46
4.1.1 X-GAL FAERBUNG 46
4.1.2 BESTIMMUNG DER TELOMERLAENGE 46
4.1.3 BESTIMMUNG DER GENEXPRESSION 48
4.2 ANALYSE DER ZELLPROLIFERATION 49
4.2.1 ANALYSE DER ZELLPROLIFERATION MESENCHYMALER PROGENITORZELLEN 49
4.2.2 ZELLPROLIFERATION VON MIT HORMONEN KULTIVIERTEN MESEN-CHYMALEN
PROGENITORZELLEN 50
I
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IMAGE 2
INHALTSVERZEICHNIS
4.3 ANALYSE DER MORPHOLOGIE UND DER SS-GAL- EXPRESSION 53
4.3.1 MORPHOLOGIE UND SS-GAL-EXPRESSION JUNGER ZELLEN 53
4.3.2 MORPHOLOGIE UND SS-GAL-EXPRESSION SENESZENTER ZELLEN 53
4.4 ANALYSE DER TELOMERLAENGE 55
4.4.1 TELOMERLAENGENVERKUERZUNG ZUNEHMEND SENESZENTER MESEN-CHYMALER
PROGENITORZELLEN 55
4.4.2 TELOMERLAENGENVERKUERZUNG UNTER DEM EINFLUSS VON 17-SS-OESTRADIOL 56
4.4.3 TELOMERLAENGENVERKUERZUNG UNTER DEM EINFLUSS VON 17-SS-OESTRADIOL/
TAMOXIFEN UND TAMOXIFEN 58
4.5 ANALYSE DER GENEXPRESSION 61
4.5.1 EXPRESSION VON TRF1 UND TRF 2 61
4.5.2 EXPRESSION VON P21 63
4.5.3 EXPRESSION VON XRCC 63
4.5.4 EXPRESSION VON SIRT1 64
5 DISKUSSION 66
5.1 ANALYSE DER ZELLPROLIFERATION 66
5.2 ANALYSE DER ZELLMORPHOLOGIE 68
5.3 ANALYSE DER SS-GALAKTOSIDASE-EXPRESSION 69
5.4 ANALYSE DER TELOMERLAENGE 71
5.5 ANALYSE DER GENEXPRESSION 75
5.6 PERSPEKTIVEN 78
6 ZUSAMMENFASSUNG 80
7 LITERATUR 83
8 ANHANG 95
8.1 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 95
8.2 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 98
8.3 TABELLENVERZEICHNIS 100
8.4 DANKSAGUNG 101
8.5 VEROEFFENTLICHUNG 102
8.6 ERKLAERUNG ZUR DISSERTATION 103
II
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