Die Bedeutung des Peroxisomen-Proliferator-aktivierten Rezeptors gamma (PPARy) in humanen Meningeomen:
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INHALTSVERZEICHNIS
1. ZUSAMMENFASSUNG 10
2. EINLEITUNG 11
2.1 MENINGEOME 11
2.1.1 EPIDEMIOLOGIE UND KLASSIFIKATION 11
2.1.2 AETIOLOGIE UND ZYTOGENETIK 14
2.1.3 LOKALISATION, KLINISCHE SYMPTOMATIK UND BILDGEBENDE DIAGNOSTIK 15
2.1.4 PROGNOSE UND THERAPIEMOEGLICHKEITEN 17
2.2 PEROXISOMEN-PROLIFERATOR-AKTIVIERTE REZEPTOREN (PPARS) 18
2.2.1 ALLGEMEINES 18
2.2.2 PPARY UND DESSEN FUNKTION 19
2.2.3 PPARY UND KREBS 23
2.2.4 PPARY IN HIRNTUMOREN 24
3. ZIELE DER ARBEIT 26
4. METHODIK 27
4.1. MATERIAL 27
4.1.1 KULTIVIERUNG VON ZELLEN 27
4.1.2 INDIREKTE IMMUNFLUORESZENZ 27
4.1.3 PROTEINISOLATION AUS ZELLEN UND GEWEBE 28
4.1.4 BESTIMMUNG DER PROTEINKONZENTRATION NACH BRADFORD 29
4.1.5 WESTERN BLOT 29
4.1.6 RNA ISOLATION 31
4.1.7 BESTIMMUNG DES RNA-GEHALTES 31
4.1.8 CDNA-SYNTHESE 31
4.1.9 RT-PCR 31
4.1.10 AGAROSEGEL-ELEKTROPHORESE 32
4.1.11 PROLIFERATIONS-ASSAY 33
4.1.12 MTT-ASSAY 33
4.2 METHODEN 33
4.2.1 ZELLKULTUREN 33
4.2.1.1 ZELLZAHLBESTIMMUNG 34
4.2.2 STIMULATION DER ZELLEN 35
4.2.2.1 INSULIN 35
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4.2.2.2 PPARY-AGONISTEN 35
4.2.3 INDIREKTE IMMUNFLUORESZENZ 36
4.2.4 PROTEINISOLATION 37
4.2.4.1 PROTEINISOLATION AUS ZELLEN 37
4.2.4.2 PROTEINISOLATION AUS GEWEBE 37
4.2.4.3 BESTIMMUNG DER PROTEINKONZENTRATION NACH BRADFORD 38
4.2.5 WESTERN BLOT 38
4.2.6 RNA-ISOLATION 40
4.2.6.1 BESTIMMUNG DES RNA-GEHALTES 41
4.2.7 CDNA-SYNTHESE 41
4.2.8 POLYMERASEKETTENREAKTION - RT-PCR 42
4.2.9 MTT-ASSAY 44
4.2.10 PROLIFERATIONSASSAY 45
4.2.11 STATISTISCHE AUSWERTUNG 46
5. ERGEBNISSE 47
5.1 PPAR-Y EXPRESSION IN HUMANEN MENINGEOMEN 47
5.2 PPAR-Y EXPRESSION IN HUMANEN MENINGEOMZELLLINIEN 48
5.3 STIMULATION VON PPARY MIT ROSIGLITAZON 51
5.4 EINFLUSS VON ROSIGLITAZON AUF DIE MENINGEOMZELL-PROLIFERATION 54
5.5 STIMULATION VON PPARY MIT INSULIN 57
6. DISKUSSION 59
6.1 DISKUSSION DER ERGEBNISSE 59
6.1.1 EXPRESSION VON PPARY 59
6.1.2 DIE ROLLE VON IGF IN HUMANEN MENINGEOMEN 60
6.1.2.1 PI3K/MTOR SIGNALWEG 61
6.1.2.2 MAP-KINASE SIGNALWEG 63
6.1.3 INTERAKTIONEN ZWISCHEN IGF UND PPARY 64
6.1.4 MOEGLICHKEIT PPARY-UNABHAENGIGER EFFEKTE 67
6.1.5 KOMBINIERTE THERAPIEANSAETZE 69
6.2 DISKUSSION DER METHODEN 70
6.2.1 ZELLKULTUR 70
6.2.2 PCR 71
6.2.3 IMMUNOLOGISCHER NACHWEIS VON PROTEINEN 72
6.2.4 PROLIFERATIONS- UND MTT-ASSAY 72
8
IMAGE 3
7. SCHLUSSFOLGERUNGEN 74
8. LITERATUR- UND QUELLENVERZEICHNIS 75
DANKSAGUNG 88
EHRENWOERTLICHE ERKLAERUNG 89
9
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