Interaktion endothelialer Progenitorzellen mit inflammatorischen Zellen: Bedeutung für die Endothelzellregeneration
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2012
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.........................................................................................................
5
1
EINLEITUNG
........................................................................................................................
8
1.1
PATHOGENESE
DER
ATHEROSKLEROSE
..........................................................................
8
1.2
ENDOTHELIALE
PROGENITORZELLEN
UND
ENDOTHELZELLREGENERATION
..............................
9
1.3
MONOZYTEN
UND
ENDOTHELZELLREGENERATION
...........................................................
11
1.4
HYPOTHESE
UND
ZIELE
DER VORGELEGTEN
ARBEIT
.......................................................
15
2
MATERIAL
.........................................................................................................................
16
2.1
GERAETE
UND
VERBRAUCHSMATERIALIEN
.............................................
16
2.2
PUFFER
UND
LOESUNGEN
...........................................................................................
17
2.3
ZELLMEDIUM
...........................................................................................................
18
2.4
CHEMIKALIEN
UND
BIOCHEMIKALIEN
........................................................................
19
2.5
ANTIKOERPER
UND
KITS
..............................................................................................
20
2.6
TECHNISCHE
GERAETE,
SOFTWARE
.............................................................................
21
2.7
VERSUCHSTIERE
.......................................................................................................
22
2.8
OP-BESTECK
...........................................................................................................
22
3
METHODEN
...................................................................................................................23
3.1
VERSUCHSTIERE
UND
HALTUNGSBEDINGUNGEN
..........................................................
23
3.2
ZELLKULTUR
...............................................................................................................
23
3.2.1
KULTURBEDINGUNGEN
.....................................................................................
23
3.2.2
ISOLIERUNG
MONONUKLEAERER
ZELLEN
(MNC)
....................................................24
3.2.3
AUFTRENNUNG
DER
MONONUKLEAEREN
SUBPOPULATION
......................................25
3.2.4
ZELLKULTIVIERUNG
...........................................................................................
27
3.2.5
EARLY
ENDOTHELIALE
PROGENITORZELLEN
...........................................................
27
3.2.6
APOPTOSE
.....................................................................................................
28
3.2.7
MIGRATION
.....................................................................................................
28
3.2.8
COLONY
FORMING
UNITS
(CFU)
.......................................................................
29
3.3
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
...........................................................................................
30
3.4
IN
..........................................................................................................................
31
3.4.1
MAC-1-DTR-TRANSGENE
MAEUSE
....................................................................
31
3.4.2
DIPHTHERIETOXIN-BEHANDLUNGSPROTOKOLL
.......................................................
32
3.4.3
OPERATIVE
ENDOTHELZELLLAESION
.....................................................................
32
3.4.4
SPLENEKTOMIE
...............................................................................................
33
3.4.5
TRANSFUSION
VON
ZELLEN
...............................................................................
33
3.4.6
BESTIMMUNG
DER
REENDOTHELIALISIERUNG
.....................................................
35
3.4.7
BLUTENTNAHME
..............................................................................................
36
3.4.8
GENOTYPISIERUNG
DER
MAC-1-DTR-MAEUSE
...................................................
36
3.5
STATISTISCHE
ANALYSE
.............................................................................................
37
4
ERGEBNISSE
...................................................................................................................
38
4.1
IN
VITRO-M
ERSUCHE
..................................................................................................
38
4.1.1
SCA-1
+
CD11B
ZELLEN
STELLEN
DIE
HAEUFIGSTE
POPULATION
AN
MILZ
STAENDIGEN
PROGENITORZELLEN
DAR
..................................................................
38
4.1.2
DIE
DIFFERENZIERUNG
IN
EARLY
OUTGROWTH
ENDOTHELIALE
PROGENITORZELLEN
IST
AM
EFFEKTIVSTEN
BEI
UNSELEKTIERTEN
MONONUKLEAEREN
ZELLEN
.......................
39
4.1.3
UNFRAKTIONIERTE
MONONUKLEAERE
ZELLEN
WEISEN
DIE
HOECHSTE
BILDUNGSRATE
AN
COLONY
FORMING
UNITS
(CFU)
AUF
.........................................................
43
4.1.4
KOKULTIVIERUNG
VON
CD11B
+
ZELLEN
VERAENDERT
NICHT
DIE
APOPTOSE
VON
SCA-1
+
ZELLEN
..............................................................................................44
4.1.5
KOKULTIVIERUNG
MIT
CD11B
+
ZELLEN
VERBESSERT
DIE
MIGRATIONSFAEHIGKEIT
VON
SCA-1
+
ZELLEN
.......................................................................................
46
4.2
IN
..........................................................................................................................
48
4.2.1
BEHANDLUNG
MIT
DIPHTHERIETOXIN
FUEHRT
ZUR
SIGNIFIKANTEN
REDUKTION
ZIRKULIERENDER
CD11B
+
MONOZYTEN
IN
CD11B-DTR-MAEUSEN
....................48
4.2.2
DIE
SYSTEMISCHE
ZELLTHERAPIE
MIT
SCA1
+
ZELLEN
FUEHRT
NUR
IN
ANWESENHEIT
VON
CD11B
+
ZELLEN
ZU
EINER
VERBESSERTEN
REENDOTHELIALISIERUNG
NACH
EXPERIMENTELLER
ZELLSCHAEDIGUNG
...................
50
5
DISKUSSION
....................................................................................................................
53
6
ZUSAMMENFASSUNG
......................................................................................................
59
7
LITERATURVERZEICHNIS
.....................................................................................................
60
8
DANKSAGUNG
.................................................................................................................
68
|
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