Entwicklung eines Plasmids zur Expression von SOCS-3 in Hepatozyten:
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INHALTSVERZEICHNIS
I
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
1.1 INTERLEUKIN-6 3
1.1.1 SIGNALUEBERTRAGUNG 3
1.1.2 FUNKTION 6
1.1.3 IL-6 ALS PROLIFERATIVES UND ANTI-APOPTOTISCHES ZYTOKIN 7
1.2 SUPPRESSOR OF CYTOKINE SIGNALLING-3 (SOCS-3) 8
1.3 IL-6, JAK/STAT UND SOCS-3 BEI PATHOLOGISCHEN PROZESSEN 9
1.3.1 INSULINRESISTENZ 10
1.3.2 HEPATOPROTEKTION UND-REGENERATION 10
1.4 IL-6, JAK/STAT UND SOCS-3 IN DER TUMORGENESE 11
1.4.1 ANTITUMORALE ODER KANZEROGENE IMMUNREAKTION 12
1.4.2 ENTZUENDUNG ALS GRUNDLAGE VON TUMOREN 14
1.4.3 TUMORBEDINGTE ENTZUENDUNGSREAKTIONEN 16
1.4.4 INTERAKTION VON S T A T - 3 UND N F - K B 1 7
1.4.5 IL-6 18
1.4.6 SOCS-3 21
2 MATERIAL U N D M E T H O D E N 2 2
2.1 MATERIAL 22
2.1.1 GERAETE 22
2.1.2 PULL ER UND ZDLKULTURMEDIEN 2 2
2.1.3 SELBST HERGESTELLTE PUFFER U N D GELE 23
2.1.4 CHEMIKALIEN UND KITS 24
2.1.5 VERBRAUCHSMATERIALIEN 25
2.1.6 ENZYME, ANTIKOERPER 26
2.1.7 PLASMIDE, OLIGONUKLEOTIDE 26
2.2 METHODEN 27
2.2.1 ZELLKULTUR 27
2.2.2 MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN 30
2.2.3 WESTERNBLOT 35
2.2.4 COLORIMETRIC KIT 38
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IMAGE 2
INHALTSVERZEICHNIS II
2.2.5 DUICLIFIUAESZYTUMETVIE UND PIOLIFERATIONSIRIESSURIG 38
3 ERGEBNISSE 4 0
3.1 PCR DES SOCS-3 GENS 40
3.2 KLONIERUNG DES PCR PRODUKTS IN TOPO UND PCI-NEO VEKTOREN . . . . 41
3.3 NACHWEIS DER SOCS-3 SYNTHESE MITTELS WESTERNBLOT 43
3.4 EINBAU DES LEBERZELLSPEZIFISCHERI ALBUINIU PROMOTERS 44
3.5 NACHWEIS VON SOCS-3 IN LEBERZELLEN 45
3.6 WIRKUNG DER SOCS-3 UEBEREXPRESSION AUF STAT-3 46
3.7 WIRKUNG DER SOCS-3 UEBEREXPRESSION AUF DIE ZELLPROLIFERATION 47
4 DISKUSSION 4 9
4.1 STAT-3 49
4.2 SOCS-3 50
4.3 WEITERFUEHRENDE STUDIEN 52
5 Z U S A M M E N F A S S U N G 5 3
6 S U M M A R Y 5 5
7 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 5 6
8 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 5 7
9 LITERATURVERZEICHNIS 5 8
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