Vergleichende molekulargenetische Untersuchungen von Adenomen und Karzinomen der Papilla vateri:
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INHALTSVERZEICHNIS
I
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
1.1 A N A T O M I S C H E U N D PHYSIOLOGISCHE G R U N D L A G E N D E R
PAPILLA VATERI 1
1.1.1 MAKROSKOPISCHE A N A T O M I E 1
1.1.2 MIKROSKOPISCHE A N A T O M I E 1
1.1.3 PHYSIOLOGIE 3
1.2 EPIDEMIOLOGIE, AETIOLOGIE, LOKALISATION U N D M O R P H O L O G I E V
O N T U M O R E N D E R PAPILLA VATERI 4
1.2.1 VORLAEUFERLAESIONEN D E S K A R Z I N O M S 4
1.2.2 A D E N O K A R Z I N O M 5
1.3 P A T H O M O R P H O L O G I E 7
1.3.1 HISTOLOGISCHE KLASSIFIKATION 7
1.3.2 HISTOPATHOLOGISCHES G R A D I N G 9
1.3.3 PATHOLOGISCHES STAGING 9
1.4 M O L E K U L A R E PATHOGENESE 10
1.4.1 HEREDITAET U N D GENETISCHE PRAEDISPOSITION BEI GASTROINTESTINALEN M
A L I G N O M E N 10
1.4.2 O N K O G E N E U N D TUMORSUPPRESSORGENE 18
1.5 FRAGESTELLUNG U N D ZIELSETZUNG 21
2 MATERIAL 23
2.1 LABORGERATE 2 3
2.2 CHEMIKALIEN, E N Z Y M E U N D A N T I K OE R P E R 2 4
2.2.2 E N Z Y M E 2 5
2.2.3 ANTIKOERPER 2 5
2.3 PUFFER U N D L OE S U N G E N 2 5
2.3.1 A L L G E M E I N E LOESUNGEN 2 5
2.3.2 LOESUNGEN FUER D I E HAEMATOXYLIN-EOSIN (HE)-FAERBUNG VON
PARAFFINSCHNITTEN 2 5
2.3.3 L OE S U N G Z U R METHYLENBLAU-FAERBUNG V O N PARAFFINSCHNITTEN 2 6
2.3.4 L OE S U N G E N Z U R DNA-ISOLATION AUS G E W E B E 2 6
2.3.5 LOESUNGEN FUER D I E AMPLIFIKATION G E N O M I S C H E R D N A DURCH
P C R 2 6
2.3.6 LOESUNGEN FUER D I E PAA-GELELEKTROPHORESE 2 6
2.3.7 LOESUNGEN FUER D I E SILBERFARBUNG 2 7
2.3.8 L OE S U N G E N FUER D I E L M M U N H I S T O C H E M I E 2 7
2.4 OLIGONUKLEOTID-PRIMER 2 8
2.5 DATEN D E S PATIENTENKOLLEKTIVS 2 8
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IMAGE 2
INHALTSVERZEICHNIS II
3 METHODEN 29
3.1 G E W I N N U N G V O N D N A A U S PARAFFINMATERIAL 2 9
3.1.1 HERSTELLUNG V O N PARAFFINSCHNITTEN 2 9
3.1.2 ENTPARAFFINIEREN D E R GEWEBESCHNITTE 3 0
3.1.3 H E - F AE R B U N G D E R REFERENZSCHNITTE 3 0
3.1.4 DURCHFUEHRUNG D E R MANUELLEN MIKRODISSEKTION 3 1
3.1.5 DURCHFUHRUNG D E R LASERMIKRODISSEKTION 3 2
3.1.6 ISOLIERUNG G E N O M I S C H E R D N A 3 5
3 . 2 AMPLIFIKATION D E R KOMPLETTEN GENOMISCHEN D N A 3 6
3 . 3 MIKROSATELLITEN-/LOH-ANALYSE 3 8
3.3.1 AMPLIFIKATION V O N D N A MITTELS P C R - T E C H N I K 3 8
3.3.2 AUFTRENNUNG V O N PCR-AMPLIFIKATEN DURCH
POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE 4 2
3.3.3 SILBERFARBUNG V O N P A A - G E L E N 4 4
3.3.4 INTERPRETATION D E R BANDEN A U F SILBERGEFARBTEN P A A - G E L E
N 4 5
3 . 4 I M M U N H I S T O C H E M I S C H E U N T E R S U C H U N G E N
4 8
3.4.1 PRINZIP D E R IMMUNHISTOCHEMISCHEN FAERBUNGEN 4 8
3.4.2 IMMUNHISTOCHEMISCHE FAERBUNGEN V O N H M L H L , H M S H 2 U N D H
M S H 6 4 9
3 . 5 HISTOMORPHOLOGISCHE SUBTYPISIERUNG U. KLASSIFIKATION SPEZIFISCHER
HISTOLOGISCHER P A R A M E T E R . . 5 0
3 . 6 STATISTISCHE D A T E N A U S W E R T U N G 51
4 ERGEBNISSE 52
4.1 M E T H O D I S C H E E R F A H R U N G E N 5 2
4.2 MIKROSATELLITENMARKER: QUALITAET, HAEUFIGKEITEN U N D STATISTIK 5 3
4.2.1 M S I - U N D L O H - F R E Q U E N Z P R O P R I M E R 5 3
4.2.2 HAEUFIGKEIT V O N AUSFALLEN EINZELNER P R I M E R 5 4
4.2.3 MSI-HIGH ( M S I - H ) U N D M S I - L O W ( M S I - L ) 5 4
4.2.4 MSI-HAEUFIGKEIT U N D VERTEILUNG D E R EINZELNEN INSTABILEN LOCI
BEI D E N FIINF M S I - H T U M O R E N . . . 5 4
4.3 KLINISCH-PATHOLOGISCHE U N D HISTOPATHOLOGISCHE P A R A M E T E R 5
5
4.4 KORRELATION D E R HISTOPATHOLOGISCHEN D A T E N M I T D E M M S I -
S T A T U S 5 6
4.5 KORRELATION D E R I M M U N H I S T O C H E M I S C H E N M M R P -
E X P R E S S I O N M I T D E M M S I - S T A T U S 5 7
4.6 UEBERLEBENSDATEN U N D PROGNOSTISCHE FAKTOREN 5 9
4.6.1 KORRELATION V O N KLINISCH-PATHOLOGISCHEN U N D
HISTOPATHOLOGISCHEN PARAMETERN M I T D E M
PATIENTENUEBERLEBEN 5 9
4.6.2 KORRELATION D E S MSI-STATUS M I T D E M PATIENTENUEBERLEBEN 6 2
5 DISKUSSION 6 3
6 ZUSAMMENFASSUNG 68
7 LITERATURVERZEICHNIS 70
IMAGE 3
INHALTSVERZEICHNIS III
8 ANHANG 88
8.1 G E S A M T UE B E R S I C H T D E R ERGEBNISSE 8 8
8.2 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 9 2
8.3 D A N K S A G U N G 9 4
8.4 LEBENSLAUF. 9 5
8.5 EIDESSTATTLICHE ERKLAERUNG 9 8
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