Verfügbarkeit: Optimierung der Isolation von Fibrinogen zur Herstellung einer autologen Fibringel-Matrix als Trägerstruktur im kardiovaskulären Tissue Engineering

Optimierung der Isolation von Fibrinogen zur Herstellung einer autologen Fibringel-Matrix als Trägerstruktur im kardiovaskulären Tissue Engineering:

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Bibliographische Detailangaben
1. Verfasser:	Heselhaus, Johanna 1984- (VerfasserIn)
Format:	Abschlussarbeit Buch
Sprache:	German
Veröffentlicht:	2011
Schlagworte:	Hochschulschrift
Online-Zugang:	Inhaltsverzeichnis
Beschreibung:	115 S. Ill., graph. Darst. 21 cm

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adam_text	INHALTSVERZEICHNIS 1 EINLEITUNG - 7 - 2 GRUNDLAGEN DES TISSUE ENGINEERING - 8 - 2.1 KLINISCHER HINTERGRUND DES KARDIOVASKULAEREN TISSUE ENGINEERING - 8 - 2.1.1 EINSATZGEBIETE FUER HERZKLAPPEN UND BLUTGEFAESSERSATZ - 8 - 2.1.2 KLASSISCHE BEHANDLUNGSMOEGLICHKEITEN BEI VITIEN VON HERZKLAPPEN UND BLUTGEFAESSEN - 9 - 2.1.2.1 BEHANDLUNGSMOEGLICHKEITEN BEI VASKULAEREN ERKRANKUNGEN - 9 - 2.1.2.2 MOEGLICHKEITEN BEI KLAPPENVITIEN - 10 - 2.1.3 VORTEILE TISSUE ENGINEERTER PROTHESEN - 11 - 2.2 DAS PRINZIP DES TISSUE ENGINEERING -12 - 2.2.1 ZELLEN - 14 - 2.2.2 SCAFFOLDS - 16 - 2.2.3 BIOREAKTOR - 16 - 3 TRAEGERSTRUKTUREN IM KARDIOVASKULAEREN TISSUE ENGINEERING -18 - 3.1 DEFINITION EINES SCAFFOLDS -18 - 3.2 EIGENSCHAFTEN EINES IDEALEN SCAFFOLDS -18 - 3.3 FUER SCAFFOLDS VERWENDETE MATERIALIEN -19 - 3.3.1 SYNTHETISCHE SCAFFOLDS -19 - 3.3.2 BIOLOGISCHE SCAFFOLDS - 21 - 3.3.2.1 INTESTINALES SUBMUKOESES GEWEBE, DEZELLULARISIERTE MATRICES UND PERIKARD -21 - 3.3.2.2 KOLLAGENGEL - 22 - 3.3.3 KOMBINATION VERSCHIEDENER MATERIALIEN - 23 - 3.4 STRUKTUREN UND APPLIKATIONSFORMEN VON SCAFFOLDMATERIALIEN - 25 - 4 FIBRINGEL ALS BESONDERES SCAFFOLDMATERIAL - 26 - 4.1 DAS FIBRINOGEN - 26 - 4.1.1 UNTERSCHIEDE DER FIBRINOGENE DER VERSCHIEDENEN SPEZIES - 28 - 4.2 DIE BLUTGERINNUNG - 29 - 4.2.1 VASKULAERE UND ZELLULAERE BLUTSTILLUNG -29 4.2.2 DIE PLASMATISCHE BLUTSTILLUNG (GERINNUNGSKASKADE) - 30 - 4.3 GRUNDLAGEN DER FIBRINOLYSE -33 4.4 KLINISCHE ANWENDUNG VON FIBRIN UND FIBRINOGEN ALS SCAFFOLDMATERIAL IM TISSUE ENGINEERING - 34 - 4.4.1 ANWENDUNGSBEREICHE - 34 - 4.4.1.1 EINSATZ ALS FIBRINKLEBER - 34 - 4.4.1.2 EINSATZ ALS SCAFFOLD IM TISSUE ENGINEERING - 34 - 4.4.2 FIBRINGEL ALS SCAFFOLDMATERIAL - VOR UND NACHTEILE - 36 - 5 GRUNDLAGEN ZUR PROTEINAUSFAELLUNG - 38 - 5.1 DIE ZUSAMMENSETZUNG DES BLUTES - 38 - 5.2 GESAETTIGTE LOESUNGEN UND LOESLICHKEIT - 38 - 5.3 PRINZIPIEN DER PROTEINAUSFAELLUNG - 40 - 6 FRAGESTELLUNG - 42 - 7 MATERIAL UND METHODEN - 43 - 7.1 ISOLATION VON FIBRINOGEN - 43 - 7.1.1 GEWINNUNG VON PLAETTCHENFREIEM PLASMA (PFP) - 43 - 7.1.2 AUSFAELLUNGSVERFAHREN -44 7.1.2.1 EINFACHE KRYOPRAEZIPITATION -44 7.1.2.2 FRAKTIONIERUNG MIT HILFE VON ETHANOL - 44 - 7.1.2.3 AUSFAELLUNG MIT AMMONIUMSULFAT - 45 - 7.1.2.4 AUSFAELLUNG MIT ALBUMIN UND KRYOPRAEZIPITATION - 45 - 7.1.2.5 AUSFAELLUNG MIT POLYETHYLENGLYCOL (PEG) - 45 - 7.1.3 AUFREINIGUNG DER PROBEN - 46 - 7.1.4 DIALYSE UND STERILFILTRATION - 46 - 7.1.5 ANSETZEN VON INDUSTRIELL AUFGEREINIGTEM SCHAFSFIBRINOGEN - 47 - 7.2 QUANTIFIZIERUNG DER GEWONNENEN FIBRINOGENMENGE - 47 - 7.2.1 PHOTOMETRISCHE BESTIMMUNG DER GESAMTPROTEINMENGE -47 7.2.2 GELELEKTROPHORESE UND SEMIQUANTITATIVE AUSWERTUNG - 48 - 7.2.2.1 SYNTHESE 10%IGER POLYACRYLAMID-GELE -48 7.2.2.2 ZUSAMMENSETZUNG DER STAMMLOESUNGEN FUER DIE ELEKTROPHORESE - 49 - 7.2.2.3 ZUSAMMENSETZUNGEN DER GELE (MENGEN FUER JE 2 GELE) -49 7.2.2.4 DURCHFUEHRUNG DER SDS-PAGE - 50 - 7.2.2.5 COOMASSIE-FAERBUNG DER GELE - 50 - 7.2.2.6 QUANTITATIVE ANALYSE DER COOMASSIE-GEFAERBTEN GELE -51 7.3 SYNTHESE VON FIBRINGELEN - 52 - 7.4 MESSUNG DER REISSFESTIGKEIT ZUR BESTIMMUNG DER MECHANISCHEN STABILITAET VON FIBRINGELEN - 53 - 7.4.1 AUFBAU DER MESSSTRECKE ZUR BESTIMMUNG DER REISSFESTIGKEIT VON FIBRINGELEN -53 7.4.2 MESSUNG UND AUSWERTUNG DER ERGEBNISSE - 55 - 7.4.3 REISSFESTIGKEIT VON FIBRINGELEN MIT UNTERSCHIEDLICHEN ALBUMINGEHALTEN - 56 - 7.5 UNTERSUCHUNG VON AUTOLOGEN FIBRINGELEN AUF ZELLVERTRAEGLICHKEIT - 56 - 7.5.1 ZELLKULTUR -56 7.5.1.1 PRIMAERKULTUR -57 - 7.5.1.2 PASSAGIEREN VON ZELLEN - 57 - 7.5.2 MESSUNG DES PROLIFERATIONSVERHALTENS MIT HILFE DES MTT-TESTS - 58 - 7.5.2.1 DIREKTER MTT-TEST -58 7.5.2.2 INDIREKTER MTT-TEST - 60 - 7.5.3 UNTERSUCHUNG DES EINFLUSSES DER FIBRINGELKONZENTRATION AUF DIE ZELLPROLIFERATION - 60 - 7.5.4 UNTERSUCHUNG DES EINFLUSSES DER AUTOLOGEN FIBRINGELE AUF DIE ZELLPROLIFERATION - 61 - 7.6 UEBERTRAGUNG DER ISOLATIONSMETHODEN AUF OVINES BLUT - 61 - 7.7 UEBERTRAGUNG AUF HUMANES BLUT - 61 - 7.7.1 BESTIMMUNG DER FIBRINOGENAUSBEUTE HUMANEN BLUTES - 62 - 8 ERGEBNISSE - 63 - 8.1 BEOBACHTUNGEN BEI DER DURCHFUEHRUNG DER VERSCHIEDENEN AUSFAELLUNGSMETHODEN - 63 - 8.2 PHOTOMETRISCHE BESTIMMUNG DER FIBRINOGENKONZENTRATION - 64 - 8.2.1 PHOTOMETRISCH ERMITTELTE FIBRINOGENKONZENTRATION PORCINER PROBEN - 64 - 8.2.2 PHOTOMETRISCH ERMITTELTE FIBRINOGENKONZENTRATION OVINER PROBEN - 65 - 8.2.3 PHOTOMETRISCH ERMITTELTE FIBRINOGENKONZENTRATION HUMANER PROBEN - 66 - 8.3 ELEKTROPHORETISCHE MESSUNG DER FIBRINOGENKONZENTRATION - 66 - 8.3.1 ELEKTROPHORETISCH ERMITTELTE FIBRINOGENKONZENTRATION PORCINER PROBEN - 68 - 8.3.2 ELEKTROPHORETISCH ERMITTELTE FIBRINOGENKONZENTRATION OVINER PROBEN - 68 - 8.3.3 ELEKTROPHORETISCH ERMITTELTE FIBRINOGENKONZENTRATION HUMANER PROBEN - 69 - 8.3.4 FIBRINOGENAUSBEUTE DER EINZELNEN ISOLATIONSMETHODEN - 70 - 8.4 BESTIMMUNG DER REISSFESTIGKEIT VON FIBRINGELEN - 71 - 8.4.1 REISSFESTIGKEIT VON FIBRINGELEN MIT UNTERSCHIEDLICHEM ALBUMINGEHALT - 71 - 8.4.2 REISSFESTIGKEIT VON FIBRINGELEN AUS AUTOLOG ISOLIERTEM FIBRINOGEN - 72 - 8.5 UNTERSUCHUNG VON FIBRINGELEN MIT HILFE DES MTT-TESTS - 74 - 8.5.1 UNTERSUCHUNG UNTERSCHIEDLICH STARK KONZENTRIERTER FIBRINGELE -74 8.5.1.1 UNTERSUCHUNG UNTERSCHIEDLICH STARK KONZENTRIERTER FIBRINGELE IM DIREKTEN MTT-TEST - 74 - 8.5.1.2 UNTERSUCHUNG UNTERSCHIEDLICH STARK KONZENTRIERTER FIBRINGELE IM INDIREKTEN MTT-TEST - 76 - 8.5.2 UNTERSUCHUNG VON FIBRINGELEN AUS AUTOLOG ISOLIERTEM FIBRINOGEN - 77 - 8.5.2.1 UNTERSUCHUNG VON FIBRINGELEN AUS AUTOLOG ISOLIERTEM FIBRINOGEN IM INDIREKTEN MTT-TEST - 77 - 9 DISKUSSION - 78 - 9.1 QUANTIFIZIERUNG DER ISOLIERTEN FIBRINOGENMENGEN - 78 - 9.1.1 DISKUSSION DER VERSCHIEDENEN VERFAHREN ZUR BESTIMMUNG VON FIBRINOGEN -78 9.1.1.1 DAS VERFAHREN DER PHOTOMETRISCHEN BESTIMMUNG DER FIBRINOGENKONZENTRATION - 78 - 9.1.1.2 DAS VERFAHREN DER ELEKTROPHORETISCHEN UNTERSUCHUNG VON FIBRINOGENLOESUNGEN - 79 - 9.1.1.3 ALTERNATIVE VERFAHREN -79 - 9.1.2 DISKUSSION DER RESULTATE DER QUANTITATIVEN FIBRINOGENBESTIMMUNGEN - 80 - 9.1.2.1 RESULTATE DER QUANTITATIVEN FIBRINOGENBESTIMMUNGEN DER VERSCHIEDENEN SPEZIES - 80 - 9.1.2.2 FIBRINOGENAUSBEUTE AUS HUMANEM PLASMA - 82 - 9.2 REISSFESTIGKEIT VON FIBRINGELEN - 84 - 9.2.1 DISKUSSION DES VERFAHRENS - 84 - 9.2.2 DISKUSSION DER ERGEBNISSE - 85 - 9.2.2.1 REISSFESTIGKEIT VON FIBRINGELEN AUS AUTOLOG ISOLIERTEM FIBRINOGEN - 85 - 9.2.2.2 REISSFESTIGKEIT VON FIBRINGELEN MIT UNTERSCHIEDLICH HOHEM ALBUMINGEHALT - 88 - 9.3 UNTERSUCHUNG DER ZELLVERTRAEGLICHKEIT VON FIBRINGELEN - 88 - 9.3.1 MTT-TESTS BEI FIBRINGELEN MIT UNTERSCHIEDLICH HOHER FIBRINOGENKONZENTRATION - 88 - 9.3.2 MTT-TEST BEI FIBRINGELEN AUS AUTOLOG ISOLIERTEM FIBRINOGEN - 91 - 10 ZUSAMMENFASSUNG -93 - 11 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS - 95 - 12 BILDQUELLENNACHWEIS -97 13 VERWENDETE MATERIALIEN - 98 - 13.1 VERWENDETE REAGENZIEN - 98 - 13.2 VERWENDETE GERAETE, GEBRAUCHSMATERIALIEN UND EINMALARTIKEL -100 - 14 LITERATURVERZEICHNIS -102 -
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