Untersuchung über die Virusausbreitung und -persistenz bei der murinen Theiler-Enzephalomyelitis von experimentell infizierten Mäusen mittels polyklonaler Antikörper und RNS-Sonden:
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Gießen
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2010
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1
EINLEITUNG
1
2
LITERATURUEBERSICHT
3
2.1
DIE
MULTIPLE
SKLEROSE
UND
IHRE
TIERMODELLE
3
2.2
DAS
MURINE
THEILER-ENZEPHALOMYELITISVIRUS
8
2.3
IMMUNREAKTION
UND
DEMYELINISIERUNG
IM
VERLAUF
DER
MURINEN
THEILERVIRUS-ENZEPHALOMYELITIS
13
2.4
AUSBREITUNG
VON
VIREN
IM
ZENTRALEN
NERVENSYSTEM
16
2.5
AUSBREITUNG
DES
MURINEN
THEILER-ENZEPHALOMYELITISVIRUS
IM
ZENTRALEN
NERVENSYSTEM
18
2.6
AUSBREITUNG
DES
MURINEN
THEILER-ENZEPHALOMYELITISVIRUS
IM
EXTRANEURALEN
GEWEBE
NACH
NATUERLICHER
UND
EXPERIMENTELLER
INFEKTION
BEI
MAEUSEN
20
2.7
VIRALE
PERSISTENZMECHANISMEN
22
2.8
PERSISTENZ
UND
ZELLTROPISMUS
DES
MURINEN
THEILER-ENZEPHALOMYELITISVIRUS
IM
ZENTRALEN
NERVENSYSTEM
24
3
HYPOTHESEN
UND
ZIELE
29
4
GENERATION
AND
CHARACTERIZATION
OF
A
POLYCLONAL
ANTIBODY
FOR
THE
DETECTION
OF
THEILER S
MURINE
ENCEPHALOMYELITIS
VIRUS
BY
LIGHT
AND
ELECTRON
MICROSCOPY
30
5
PERIVENTRICULAR
BRAIN
LESION
DEVELOPMENT
AND
REGION-SPECIFIC
SUSCEPTIBILITIES
TO
DEMYELINATION
IN
A
VIRAL
MURINE
MODEL
FOR
MULTIPLE
SCLEROSISES
31
5.1
ABSTRACT
32
5.2
INTRODUCTION
33
5.3
MATERIALS
AND
METHODS
36
5.4
RESULTS
42
5.5
DISCUSSION
58
5.6
ACKNOWLEDGMENTS
62
5.7
REFERENCES
63
6
DISKUSSION
72
6.1
CHARAKTERISIERUNG
DES
POLYKLONALEN
ANTIKOERPERS
ZUM
NACHWEIS
DES
MURINEN
THEILER-ENZEPHALOMYELITISVIRUS
73
6.2
DARSTELLUNG
DES
MURINEN
THEILER-ENZEPHALOMYELITISVIRUS
MITTELS
IMMUNHISTOLOGIE
UND
IN
SITU-HYBRIDISIERUNG
75
6.2.1
VIRUSAUSBREITUNG
IM
GEHIRN
BEI
SJL/J
UND
C57BL/6-MAEUSEN
75
6.2.2
VIRUSAUSBREITUNG
IM
RUECKENMARK
BEI
SJL/J
UND
C57BL/6-MAEUSEN
78
6.2.3
PHAENOTYPISIERUNG
DER
INFIZIERTEN
ZELLPOPULATIONEN
IM
VERLAUF
DER
MURINEN
THEILER-ENZEPHALOMYELITIS
79
6.3
ENTZUENDUNGSREAKTIONEN
IM
ZENTRALEN
NERVENSYSTEM
VON
SJL/J
UND
C57BL/6-MAEUSEN
IM
VERLAUF
DER
MURINEN
THEILER-ENZEPHALOMYELITIS
81
6.3.1
ENTZUENDUNGSREAKTIONEN
IM
GROSSHIRN
BEI
SJL/J
UND
C57BL/6-MAEUSEN
81
6.3.2
ENTZUENDUNGSREAKTIONEN
IM
KLEINHIRN,
STAMMHIRN
UND
RUECKENMARK
BEI
SJL/J
UND
C57BL/6-MAEUSEN
82
6.4
DEMYELINISIERUNG
IM
ZENTRALEN
NERVENSYSTEM
NACH
INFEKTION
MIT
DEM
MURINEN
THEILER-ENZEPHALOMYELITISVIRUS
83
6.4.1
DEMYELINISIERUNG
IM
KLEINHIRN,
STAMMHIRN
UND
RUECKENMARK
BEI
SJL/J-MAEUSEN
83
6.5
SCHLUSSBETRACHTUNG
86
7
ZUSAMMENFASSUNG
88
8
SUMMARY
91
9
LITERATURVERZEICHNIS
94
10
ANHANG
118
10.1
ERGAENZENDES
MATERIAL
ZU
KAPITEL
4
118
10.1.1
VERMEHRUNG
DES
MURINEN
THEILER-ENZEPHALOMYELITISVIRUS
IN
BHK21-ZELLEN
118
10.1.2
VIRUSREINIGUNG
UEBER
EINEN
SACCHAROSEGRADIENTEN
119
10.1.3
HERSTELLUNG
EINES
POLYKLONALEN
ANTIKOERPERS
ZUM
NACHWEIS
VOM
MURINEN
THEILER-ENZEPHALOMYELITISVIRUS
120
10.1.3.1
HERKUNFT
UND
HALTUNG
DER
KANINCHEN
120
10.1.3.2
SERUMGEWINNUNG
121
10.1.3.3
IMMUNISIERUNG
DER
KANINCHEN
122
10.1.3.4
IMMUNISIERUNGSCHEMA
ZUR
HERSTELLUNG
DES
POLYKLONALEN
ANTIKOERPERS
123
10.2
ERGAENZENDES
MATERIAL
ZU
KAPITEL
5
124
10.2.1
OVERVIEW
OF
VIRAL
DISTRIBUTION
IN
C57BL/6-MICE
INFECTED
WITH
THE
THEILER
S
MURINE
ENCEPHALOMYELITIS
VIRUS
124
10.2.2
OVERVIEW
OF
VIRAL
DISTRIBUTION
IN
SJL/J-MICE
INFECTED
WITH
THE
THEILER S
MURINE
ENCEPHALOMYELITIS
VIRUS
126
10.3
BEZUGSQUELLEN
FUER
REAGENZIEN,
CHEMIKALIEN
UND
EINMALARTIKEL
128
10.4
BEZUGSQUELLEN
FUER
DIE
TIERE
136
10.5
BEZUGSQUELLEN
FUER
GERAETE
136
10.6
LOESUNGEN
UND
PUFFER
142
10.6.1
ZELLKULTUR
142
10.6.2
IMMUNFLUORESZENZ
143
10.6.3
WESTERN
BLOT
144
10.6.4
HISTOLOGIE
147
10.6.5
IMMUNHISTOLOGIE
147
10.6.6
RNS-ISOLIERUNG,
PCR
UND
SONDENSYNTHESE
148
10.6.7
IN
SITU-HYBRIDISIERUNG
149
10.6.8
ELEKTRONENMIKROSKOPIE
156
11
ABKUERZUNGEN
158
12
DANKSAGUNG
162
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