Die Rolle des Transkriptionsfaktors NF-kB bei der Skelettmuskelzelldifferenzierung: physiologische und pathologische Aspekte
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Berlin
Mensch & Buch Verl.
2011
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INHALTSVERZEICHNIS
1 FRAGESTELLUNG UND ZIELE DIESER ARBEIT 1
2 EINLEITUNG 3
2.1 MYOBLASTENDIFFERENZIERUNG 3
2.1.1 PHYSIOLOGISCHE MYOBLASTENDIFFERENZIERUNG 3
2.1.1.1 MOLEKULARE MECHANISMEN DERMYOGENESE 3
2.1.1.2 IN WFRO-MODELLSYSTEME ZUR UNTERSUCHUNG DER PHYSIOLOGISCHEN
MYOBLASTENDIFFERENZIERUNG 5
2.1.2 PATHOLOGISCHE MYOBLASTENDIFFERENZIERUNG 5
2.1.2.1 RHABDOMYOSARKOME 5
2.1.2.2 IN VRTRO-MODELLSYSTEME ZUR UNTERSUCHUNG DES RHABDOMYOSARKOMS 7
2.1.3 ZUSAMMENFASSUNG DER VERWENDETEN MODELLSYSTEME 8
2.2 N F - KB 9
2.2.1 DER NF-KB-SIGNALWEG 9
2.2.2 NF-KB UND SKELETTMUSKELZEILDIFFERENZIERUNG 11
2.2.3 NF-KB UND TUMORIGENESE 13
2.3 T R A F6 14
2.3.1 TRAF6 UND SKELETTMUSKELZEILDIFFERENZIERUNG. 14
2.3.2 TRAF6 UND TUMORIGENESE 15
3 MATERIAL UND METHODEN 16
3.1 MATERIAL 16
3.1.1 CHEMIKALIEN UND VERBRAUCHSMATERIALIEN 16
3.I.2 ANTIKOERPER 19
3.1.3 SONDEN 19
3.1.4 KOMMERZIELLE KITS 19
3.1.5 EUKARYONTISCHE ZELLLINIEN 19
3.2 METHODEN 20
3.2.1 ZELLBIOLOGISCHE METHODEN 20
3.2.1.1 KULTIVIERUNG UND AUFBEWAHRUNG EUKARYONTISCHER ZELLEN 20
3.2.1.2 INDUKTION DER MYOGENEN DIFFERENZIERUNG 21
3.2.1.3 BEHANDLUNG DER ZELLEN MIT LACTACYSTIN 21
3.2.1.4 BEHANDLUNG DER ZELLEN MIT CURCUMIN 21
3.2.2 MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN 22
3.2.2.1 ALLGEMEINE RICHTLINIEN FUER DAS ARBEITEN MIT RNA 22
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN HTTP://D-NB.INFO/1012632725
DIGITALISIERT DURCH
IMAGE 2
INHALTSVERZEICHNIS
3.2.2.2 ISOLIERUNG GESAMTZELLULAERER RNA 22
3.2.2.3 KONZENTRATIONSBESTIMMUNG VON NUKLEINSAEUREN 22
3.2.2.4 NORTHERN BLOT 22
3.2.3 PROTEINCHEMISCHE METHODEN 25
3.2.3.1 HERSTELLUNG VON PROTEINLYSATEN AUS KULTIVIERTEN ZELLEN 25
3.2.3.2 BESTIMMUNG VON PROTEINKONZENTRATIONEN 25
3.2.3.3 DISKONTINUIERLICHE SDS-POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE (SDS-PAGE)
25
3.2.3.4 IMMUNOLOGISCHE METHODEN 26
4 ERGEBNISSE 30
4.1 VERGLEICH DER BASALEN NF-KB-AKTIVITAET SOWIE DER BASALEN EXPRESSION
DES FUER DEN NF-ICB-AKTIVATOR TRAF6 KODIERENDEN GENS IN
NICHTTRANSFORMIERTEN MYOBLASTEN UND IN RHABDOMYOSARKOMZELLEN 30
4.1.1 VERGLEICH DER BASALEN NF-KB-AKTIVITAET DER EINZELNEN ZELLLINIEN 30
4.1.2 VERGLEICH DER BASALEN TRAFFI-EXPRESSION DER EINZELNEN ZELLLINIEN
32
4.2 NF-KB-AKTIVITAET UND DIFFERENZIERUNGSVERHALTEN: UNTERSUCHUNGEN AN
NICHTTRANSFORMIERTEN MYOBLASTEN UND AN VERSCHIEDENEN
RHABDOMYOSARKOMZELLLINIEN 34
4.2.1 UNTERSUCHUNG DER NICHTTRANSFORMIERTEN MYOBLASTENZELLLINIE C2C12 34
4.2.1.1 NF-KB-AKTIVITAET UND FRAFO-EXPRESSION BEI DER DIFFERENZIERUNG 34
4.2.1.2 DIFFERENZIERUNGSVERHALTEN BEI HEMMUNG DER NF-KB-AKTIVITAET 34
4.2.2 UNTERSUCHUNG DER RHABDOMYOSARKOMZELLLINIE RD/18 48
4.2.2.1 NF-KB-AKTIVITAET UND FRAF6-EXPRESSION BEI DER DIFFERENZIERUNG. 48
4.2.2.2 DIFFERENZIERUNGSVERHALTEN BEI HEMMUNG DER NF-KB-AKTIVITAET 54
4.2.3 UNTERSUCHUNG DER RHABDOMYOSARKOMZELLLINIE RD/12. 63
4.2.3.1 NF-KB-AKTIVITAET UND FRA/6-EXPRESSION BEI DER DIFFERENZIERUNG. 63
4.2.3.2 DIFFERENZIERUNGSVERHALTEN BEI HEMMUNG DER NF-KB-AKTIVITAET 69
4.2.4 UNTERSUCHUNG DER RHABDOMYOSARKOMZELLLINIE CCA 75
4.2.4.1 NF-KB-AKTIVITAET UND FRAF6-EXPRESSION BEI DER DIFFERENZIERUNG 75
4.2.4.2 DIFFERENZIERUNGSVERHALTEN BEI HEMMUNG DER NF-KB-AKTIVITAET 81
4.3 TABELLARISCHE ZUSAMMENFASSUNG DER ERGEBNISSE 85
4.3.1 NF-KB-AKTIVITAET IN UNBEHANDELTEN, NICHTTRANSFORMIERTEN MYOBLASTEN
UND RHABDOMYOSANKOMZELLEN 85
4.3.2 A USWIRKUNG DER HEMMUNG DER NF-KB-AKTIVITAET AUF DIE
DIFFERENZIERUNG VON
NICHTTRANSFOMIIERTEN MYOBLASTEN UND RHABDOMYOSARKOMZELLEN. 87
4.3.3 EXPRESSION DES TRAF6-GENS IN UNBEHANDELTEN, NICHTTRANSFORMIERTEN
MYOBLASTEN
UND RHABDOMYOSARKOMZELLEN 90
4.3.4 AUSWIRKUNG DER HEMMUNG DER NF-KB-AKTIVITAET AUF DIE UAFS-EXPRESSION
IN
NICHTTRANSFORMIERTEN MYOBLASTEN UND RHABDOMYOSARKOMZELLEN 91
IMAGE 3
INHALTSVERZEICHNIS
5 DISKUSSION 92
5.1 WIE VERHAELT SICH DIE NF-KB-AKTIVITAET IN NICHTTRANSFORMIERTEN
MYOBLASTEN UND RHABDOMYOSARKOMZELLEN? 92
5.1.1 WIE VERHAELT SICH DIE NF-KB-AKTIVITAET IN PROLIFERIERENDEN,
NICHTTRANSFORMIERTEN MYOBLASTEN UND RHABDOMYOSARKOMZELLEN? 92
5. 1.2 WIE VERILAELT SICH DIE NF-KB-AKTIVITAET IN DIFFERENZIERENDEN,
NICHTTRANSFORMIERTEN
MYOBLASTEN UND RHABDOMYOSARKOMZELLEN? 93
5.1.2.1 DIE NF-KB-AKTIVITAET SINKT IM DIFFERENZIERUNGSVERLAUF VON
NICHTTRANSFORMIERTEN
MYOBLASTEN AB 93
5.1.2.2 DIE NF-KB-AKTIVITAET BLEIBT IM DIFFERENZIERUNGSVERLAUF VON
RHABDOMYOSARKOM- ZELLEN UNVERAENDERT 95
5.2 WELCHE AUSWIRKUNGEN HAT EINE HEMMUNG DER NF-KB-AKTIVITAET AUF DIE
DIFFERENZIERUNG VON NICHTTRANSFORMIERTEN MUSKELZELLEN UND
RHABDOMYOSARKOMZELLEN? 97
5.2. 1 WIE WIRKT SICH DIE HEMMUNG DER NF-KB-AKTIVITAET DURCH CURCUMIN AUF
DEN
DIFFERENZIERUNGSPROZESS VON NICHTTRANSFORMIERTEN MYOBLASTEN UND
RHABDOMYOSARKOMZELLEN AUS? 97
5.2.1.1 DIE HEMMUNG DER NF-KB-AKTIVITAET DURCH CURCUMIN WIRKT IN
C2C12-ZELLEN
DIFFERENZIERUNGSHEMMEND 97
5.2.1.2 DIE HEMMUNG DER NF-KB-AKTIVITAET DURCH CURCUMIN WIRKT IN
RHABDOMYOSARKOMZELLEN DIFFERENZIERUNGSHEMMEND 99
5.2.2 WIE WIRKT SICH DIE HEMMUNG DER NF-KB-AKTIVITAET DURCH LACTACYSTIN
AUF DEN
DIFFERENZIERUNGSPROZESS VON NICHTTRANSFORMIERTEN MYOBLASTEN UND
RHABDOMYOSARKOMZELLEN AUS? 100
5.2.2.1 DIE HEMMUNG DER NF-KB-AKTIVITAET DURCH LACTACYSTIN WIRKT IN
C2C12-ZELLEN
DIFFERENZIERUNGSHEMMEND 100
5.2.2.2 DIE HEMMUNG DER NF-KB-AKTIVITAET DURCH LACTACYSTIN WIRKT IN
RHABDOMYOSARKOMZELLEN DIFFERENZIERUNGSHEMMEND 102
5.3 FINDET IN NICHTTRANSFORMIERTEN MYOBLASTEN EINE REPRESSION DER TRAFSS-
EXPRESSION NACH INDUKTION DER DIFFERENZIERUNG STATT? VERHAELT SICH DIE
FRAFTI-EXPRESSION IN RHABDOMYOSARKOMZELLEN ABWEICHEND DAVON? 103
5.3. 1 WIE VERHAELT SICH DIE TRA16-EXPRESSION IN PROLIFERIERENDEN,
NICHTTRANSFORMIERTEN
MYOBLASTEN UND RHABDOMYOSARKOMZELLEN? 103
5.3.2 WIE VERHAELT SICH DIE TRAF6-EXPRESS/ON IN DIFFERENZIERENDEN,
NICHTTRANSFORMIERTEN
MYOBLASTEN UND RHABDOMYOSARKOMZELLEN? 104
5.3.2.1 DIE &AF6-EXPRESSION STEIGT IM DIFFERENZIERUNGSVERLAUF VON
RHABDOMYOSARKOMZELLEN AN 104
IMAGE 4
INHALTSVERZEICHNIS
5.4 UNTERLIEGT DIE EXPRESSION DES TRAF6-GENS DER REGULATION DURCH N F -
K B?
GIBT ES UNTERSCHIEDE BEZUEGLICH DIESER REGULATION ZWISCHEN
NICHTTRANSFORMIERTEN MYOBLASTEN UND RHABDOMYOSARKOMZELLEN? 105
5.4.1 WELCHE AUSWIRKUNG HAT DIE HEMMUNG DER NF-KB-AKTIVITAET DURCH
CURCUMIN AUF
DIE TRAFOE-EXPRESSION IN NICHTTRANSFORMIERTEN MYOBLASTEN UND
RHABDOMYOSARKOMZELLEN? 105
5.4.1.1 DIE HEMMUNG DER NF-KB-AKTIVITAET DURCH CURCUMIN HAT IN
RHABDOMYOSARKOMZELLEN KEINE AUSWIRKUNGEN AUF DIE FRA/B-EXPRESSION....
105
5.4.2 WELCHE AUSWIRKUNG HAT DIE HEMMUNG DER NF-KB-AKTIVITAET DURCH
LACTACYSTIN AUF
DIE TRAF6-EXPRESS/ON IN NICHTTRANSFORMIERTEN MYOBLASTEN UND
RHABDOMYOSARKOMZELLEN? 106
5.4.2.1 DIE HEMMUNG DER NF-KB-AKTIVITAET DURCH LACTACYSTIN HAT IN
RHABDOMYOSARKOMZELLEN KEINE AUSWIRKUNGEN AUF DIE FRAFSS-EXPRESSION
....106
6 ZUSAMMENFASSUNG 107
7 SUMMARY 109
8 LITERATURVERZEICHNIS 111
9 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 118
PUBLIKATIONEN 120
DANKSAGUNG 121
SELBSTAENDIGKEITSERKLAERUNG 122
IV
|
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| indexdate | 2024-07-09T23:25:36Z |
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| publisher | Mensch & Buch Verl. |
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| spelling | Büchsler, Ingrid Ursula Verfasser aut Die Rolle des Transkriptionsfaktors NF-kB bei der Skelettmuskelzelldifferenzierung physiologische und pathologische Aspekte vorgelegt von Ingrid Ursula Büchsler The role of the transcription factor NF-ĸB in skeletal muscle cell differentiation Berlin Mensch & Buch Verl. 2011 IV, 122 S. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Nebentitel: The role of the transcription factor NF-ĸB in skeletal muscle cell differentiation Berlin, Freie Univ., Diss., 2011 Muscles cabt muscular diseases cabt tumours cabt neoplasms cabt cell differentiation cabt NF-kappa B TNF Receptor-Associated Factor 6 cabt Rhabdomyosarkom (DE-588)4177978-2 gnd rswk-swf Nuklearfaktor Kappa B (DE-588)4348985-0 gnd rswk-swf Myoblast (DE-588)4301919-5 gnd rswk-swf Zelldifferenzierung (DE-588)4067536-1 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Myoblast (DE-588)4301919-5 s Zelldifferenzierung (DE-588)4067536-1 s Nuklearfaktor Kappa B (DE-588)4348985-0 s DE-604 Rhabdomyosarkom (DE-588)4177978-2 s Erscheint auch als Online-Ausgabe urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000023141-4 http://www.diss.fu-berlin.de/diss/receive/FUDISS_thesis_000000023141 kostenfrei Volltext DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=022654799&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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