Beurteilung der Entwicklungskompetenz boviner Oozyten aus Follikeln mit unterschiedlicher Durchblutung der Follikelwand:
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| Format: | Thesis Book |
| Language: | German |
| Published: |
Gießen
DVG-Service
2009
|
| Edition: | 1. Aufl. |
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| Online Access: | Inhaltsverzeichnis |
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1
EINLEITUNG
.
1
2
LITERATUR
.
4
2.1
PHYSIOLOGISCHE
GRUNDLAGEN
.
4
2.1.1
DER
ZYKLUS
DES
RINDES
.
4
2.1.2
DIE
OOGENESE
.
6
2.1.2.1
PRAEPUBERALE
ENTWICKLUNG
VON
EIZELLEN
.
6
2.1.2.2
POSTPUBERALE
ENTWICKLUNG
VON
EIZELLEN
.
7
2.1.3
DIE
FOLLIKULOGENESE
.
8
2.1.3.1
ALLGEMEINE
FOLLIKULOGENESE
.
8
2.1.3.2
FOLLIKULAERE
GEFAESSENTWICKLUNG
.
13
2.1.3.3
FOLLIKELFLUESSIGKEIT
.
16
2.1.3.3.1
STEROIDHORMONE
IN
DER
FOLLIKELFLUESSIGKEIT
.
17
2.1.3.3.1.1
OESTRADIOLGEHALT
IN
DER
FOLLIKELFLUESSIGKEIT
.
21
2.1.3.3.1.2
PROGESTERONGEHALT
IN
DER
FOLLIKELFLUESSIGKEIT
.
22
2.1.4
DIE
FRUEHE
EMBRYONALENTWICKLUNG
.
24
2.1.5
EXPRESSION
VON
MRNA
IN
OOZYTEN
UND
EMBRYONEN
.26
2.1.5.1
MESSENGER
RNA-EXPRESSION
SPEZIFISCHER
ENTWICKLUNGSRELEVANTER
GENE
IN
OOZYTEN
UND
EMBRYONEN
.
27
2.1.5.1.1
HEAT
SHOCK
PROTEIN70
.27
2.1.5.1.2
ZYGOTE
ARREST
GENEL
.
30
2.1.5.1.3 GROWTH
AND
DIFFERENTIATION
FACTOR9
.
30
2.1.5.1.4
BONE
MORPHOGENIC
PROTEIN15
.
32
2.1.5.1.5
GLUKOSE-TRANSPORTER
.
34
2.1.5.1.5.1
GLUKOSE-TRANSPORTER1
.
35
2.1.5.1.5.2
GLUKOSE-TRANSPORTER3
.
36
2.1.5.1.6
GLUKOSE-6-PHOSPHAT-DEHYDROGENASE
.
37
2.1.5.1.7
DNA-METHYLTRANSFERASEN
.
40
2.1.5.
1.7.1
DNA-METHYLTRANSFERASEL
.
40
2.1.5.1.7.2
DNA-METHYLTRANSFERASE3
.
42
2.1.5.1.8
HISTON-DEACETYLASE2
.43
2.1.5.1.9
DESMOCOLLIN2
.44
2.2
GEWINNUNG
VON
KOK
FUER
DEN
EMBRYOTRANSFER
DURCH
DIE
TRANSVAGINALE
ULTRASCHALLGELEITETE
PUNKTION
VON
FOLLIKELN
.
46
2.2.1
DIE
ENTWICKLUNG
DES
OPU
.
46
2.2.2
OPU
IM
VERGLEICH
ZU
ANDEREN
METHODEN
DER
EIZELLGEWINNUNG
BZW.
EMBRYONENPRODUKTION
BEIM
RIND
.
47
2.2.2.1
VERGLEICH
MIT
DER
GEWINNUNG
VON
KOK
AUS
OVARIEN
VOM
SCHLACHTHOF
.
48
2.2.2.2
VERGLEICH
MIT
DER
SUPEROVULATION
UND
INSEMINATION
MIT
ANSCHLIESSENDER
SPUELUNG
DES
UTERUS
.
48
2.2.3
EINFLUSSFAKTOREN
AUF
DIE
ERGEBNISSE
DES
OPU
.
50
2.2.4
VERGLEICH
UNTERSCHIEDLICHER
ZEITINTERVALLE
ZWISCHEN
DEN
OPU-SITZUNGEN
.
50
2.2.4.1
EINFLUSS
DES
PUNKTIONSINTERVALLS
DER
OPU-SITZUNGEN
AUF
DIE
ZAHL
DER
GEWONNENEN
KOK
.
51
2.2.4.2
EINFLUSS
DES
PUNKTIONSINTERVALLS
DER
OPU-SITZUNGEN
AUF
DIE
QUALITAET
DER
GEWONNENEN
KOK
.
52
2.2.5
AUSWIRKUNGEN
DES
OPU
AUF
DIE
SPENDERTIERE
.
53
2.2.6
AUSWIRKUNGEN
DER
IVP
AUF
DAS
ENTSTEHENDE
INDIVIDUUM
.
54
2.3
ENTWICKLUNGSKOMPETENZ
VON
KOK
.
57
2.3.1
EINFLUSSFAKTOREN
AUF
DIE
ENTWICKLUNGSKOMPETENZ
VON
EIZELLEN
.57
2.3.2
PARAMETER
ZUR
EINORDNUNG
DER
ENTWICKLUNGSKOMPETENZ
.60
2.4
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
PERIFOLLIKULAEREN
DURCHBLUTUNG
IM
ZUSAMMENHANG
MIT
DER
FERTILITAET
.
62
2.4.1
UNTERSUCHUNGEN
AM
MENSCHEN
.
62
2.4.2
UNTERSUCHUNGEN
AM
PFERD
.
64
2.4.3
UNTERSUCHUNGEN
AM
RIND
.
64
3
MATERIAL
UND
METHODEN
.
65
3.1
GEWINNUNG
VON
BOVINEN
OOZYTEN
UND
FOLLIKELFLUESSIGKEIT
.
65
3.1.1
TIERMATERIAL
.
65
3.1.2
OVUM
PICK
UP
.65
3.1.3
SEPARATION,
KLASSIFIZIERUNG
DER
GEWONNENEN
KUMULUS-OOZYTEN
KOMPLEXE
UND
VORBEREITUNG
DER
EIZELLEN
FUER
DIE
MRNA-ANALSYE
.
73
3.1.4
GEWINNUNG
VON
FOLLIKELFLUESSIGKEIT
.
75
II
3.2
DURCHFUEHRUNG
DER
IVP
.
77
3.2.1
IN-VITRO-MATURATION
.
77
3.2.2
IN-VITRO-FERTILISATION
.
79
3.2.3
IN-VITRO-KULTIVIERUNG
.80
3.2.4
AUSWERTUNG
DER
TEILUNGS
UND
ENTWICKLUNGSRATEN
.
81
3.2.5
VORBEREITUNG
DER
BLASTOZYSTEN
FUER
DIE
MRNA-ANALYSE
.
82
3.3
MESSENGERRNA-ANALYSE
.
82
3.3.1
AUFBEREITUNG
DER
PROBEN
.
82
3.3.1.1
PREWASH
DER
DYNABEAD-LOESUNG
.
82
3.3.1.2
ZELLLYSE
UND
EXTRAKTION
DER
MRNA
MIT
HILFE
DER
DYNABEADS
.
83
3.3.2
HERSTELLUNG
KOMPLEMENTAERER
DNA
(CDNA)
MITTELS
REVERSER
TRANSKRIPTASE
.
84
3.3.3 DURCHFUEHRUNG
DER
QUANTITATIVEN
PCR
.
85
3.4
ERMITTLUNG
DER
KONZENTRATION
VON
1
7SS-OESTRADIOL
UND
PROGESTERON
IN
DER
FOLLIKELFLUESSIGKEIT
.
88
3.4.1
BESTIMMUNG
DER
PROGESTERONKONZENTRATION
PER
ELISA
.
88
3.4.2
BESTIMMUNG
DER
1
7SS-OESTRADIOL-KONZENTRATION
MITTELS
RADIOIMMUNOASSAY
.
90
3.5
VERSUCHSAUFBAU
.
91
3.5.1
ALLGEMEINER
VERSUCHSAUFBAU
.
91
3.5.2
VERSUCHSANORDNUNG
.
91
3.5.2.1
ETABLIERUNG
VON
OPU
UND
ANSCHLIESSENDER
IVP
.
91
3.5.2.2 DURCHFUEHRUNG
DES
HAUPTVERSUCHS
.
92
3.6
STATISTISCHE
AUSWERTUNGEN
.
93
4
ERGEBNISSE
.94
4.1.1
ERGEBNISSE
AUS
DEM
OPU
.
94
4.1.1.1
ERGEBNISSE
ZU
DEN
PUNKTIERTEN
FOLLIKELN
.
94
4.1.1.1.1
ERGEBNISSE
MIT
FOKUS
AUF
DAS
PUNKTIONSINTERVALL
ZWISCHEN
DEN
OPU
SITZUNGEN
.
95
4.1.1.1.2 ERGEBNISSE
MIT
FOKUS
AUF
DEN
DURCHBLUTUNGSSTATUS
DER
FOLLIKEL
.
98
4.1.1.1.3
ERGEBNISSE
BEZOGEN
AUF
DAS
PUNKTIONSINTERVALL
DER
OPU-SITZUNGEN
UND
DEN
DURCHBLUTUNGSSTATUS
DER
FOLLIKEL
.
99
III
4.1.1.2
ERGEBNISSE
ZU
DEN
GEWONNENEN
KOK
.
100
4.1.2
ERGEBNISSE
AUS
DER
IVP
.
103
4.1.3
ERGEBNISSE
AUS
DER
ANALYSE
DER
MRNA-EXPRESSION
VERSCHIEDENER
GENE.
105
4.1.3.1
ANALYSE
DER
UNREIFEN
EIZELLEN
.
105
4.1.3.2
ANALYSE
DER
BLASTOZYSTEN
.
112
4.1.4
ERGEBNISSE
AUS
DER
ANALYSE
DER
STEROIDHORMONGEHALTE
IN
DER
FOLLIKELFLUESSIGKEIT
.
114
5
DISKUSSION
.
116
5.1
OPU
.
116
5.2
IVP
.
123
5.3
MESSENGER
RNA-EXPRESSIONSMUSTER
.
124
5.4
FOLLIKELFLUESSIGKEIT
.
130
6
ZUSAMMENFASSUNG
.
133
7
SUMMARY
.
136
8
LITERATURVERZEICHNIS.
.
139
9
VERZEICHNIS
DER
MEDIEN
UND
EINZELDATEN
.
166
9.1
EINGESETZTE
MEDIEN
.166
9.1.1
MEDIEN
FUER
DAS
OPU
.
166
9.1.2
MEDIEN
FUER
DIE
IVP
.
167
9.1.3
MEDIEN
FUER
DIE
RT-PCR
.
172
9.1.4
MEDIEN
FUER
DEN
ELISA
.
176
9.2
EINSTELLUNGEN
DES
ULTRASCHALLGERAETES
.
178
9.3
EINZELDATEN
AUS
DEM
VERSUCHSTEIL
.
179
9.3.1
EINZELDATEN
AUS
DEM
OPU
.
179
9.3.2
EINZELDATEN
AUS
DER
BESTIMMUNG
DER
STEROIDHORMONGEHALTE
IN
DER
FOLLIKELFLUESSIGKEIT
.
180
9.3.3
EINZELDATEN
AUS
DER
RT-PCR
.
183
9.3.3.1
UEBERSICHT
UEBER
DIE
MRNA-GEHALTE
IN
DEN
UNTERSUCHTEN
UNREIFEN
OOZYTEN
.
183
9.3.3.2
UEBERSICHT
UEBER
DIE
MRNA-GEHALTE
IN
DEN
UNTERSUCHTEN
BLASTOZYSTEN
.
184
10
VERZEICHNIS
DER
ABKUERZUNGEN
.
185
IV
11
VERZEICHNIS
DER
ABBILDUNGEN
.
189
12
VERZEICHNIS
DER
TABELLEN
.
192
DANKSAGUNG
V |
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