Flowzytometrische und histologische Untersuchungen der akuten Abstossung nach voll allogener Dünndarmtransplantation im Rattenmodell unter immunsuppressiver Therapie mit dem Interleukin-2-Rezeptor Antikörper NDS-61:
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Autor: Papachrysanthou, Christos-Athanasios Michael
Jahr: 2008
I
INHALT
Seite
I. EINLEITUNG 1
II. FAGESTELLUNG 7
III. MATERIAL UND METHODEN 8
1. Versuchstiere 8
2. Dünndarmtransplantationstechnik 8
2.1. Technische Hilfsmittel 9
2.2. Dünndarmexplantation und Organperfusion 9
2.3. Heterotope Dünndarmtransplantation 9
3. Medikamentöse Immunsuppression 9
3.1. Interleukin-2 Rezeptor Antikörper NDS-61 ® 10
3.2. Cyclosporin-A 11
4. Einteilung der Versuchs- und Kontrollgruppen 11
5. Nachuntersuchungen 12
5.1. Makroskopische Beurteilung des Organempfangers 12
5.2. Beurteilung des Transplantates 12
5.3. Histologische Methoden 13
5.3.1. Hämalaun-Eosin-Färbungen 13
6. Analytische Durchflußzytometrie (FACS-SCAN) 13
6.1. Mesenteriallymphknotenexcision und Zellpräparation 14
6.2. Lymphozytenfärbungen mit monoklonalen Antikörpern (FACS-SCAN) 14
6.2.1. Monoklonale Antikörper (FACS-SCAN) 15
6.3. Arbeitsprinzip des Durchflußzytometers und Probenauswertung 15
7. Dokumentation 16
8. Statistik 17
IV. ERGEBNISSE 18
A. Übersicht der makroskopischen und histologischen Beobachtungen 18
1. Die voll allogene Dünndarmtransplantation ohne Immunsuppression (Gruppe A/a) 19
1.1. Allgemeine Beobachtungen 19
1.2. Makroskopische Beobachtungen 19
1.3. Histologische Untersuchungen 20
2. Die Behandlung mit Cyclosporin-A (5mg/kg/Tag) bei der voll allogenen
Dünndarmtransplantation (Gruppe B/a) 20
II
2.1. Allgemeine Beobachtungen ™
2.2. Makroskopische Beobachtungen
2.3. Histologische Untersuchungen 21
3. Die Behandlung mit Cyclosporin-A (2,5mg/kg/Tag) bei der voll allogenen
Dünndarmtransplantation (Gruppe b/a)
3.1. Allgemeine Beobachtungen
3.2. Makroskopische Beobachtungen
3.3. Histologische Untersuchungen
4. Die Behandlung mit dem Interleukin-2 Rezeptor Antikörper NDS-61® bei der
voll allogenen Dünndarmtransplantation (Gruppe C/a)
23
4.1. Allgemeine Beobachtungen
4.2. Makroskopische Beobachtungen
4.3. Histologische Untersuchungen
5. Die Kombinationsbehandlung des Interleukin-2 Rezeptor Antikörpers
NDS-61 ® mit 2,5 mg/kg/Tag Cyclosporin-A (Gruppe D/a) 24
5.1. Allgemeine Beobachtungen
5.2. Makroskopische Beobachtungen
5.3. Histologische Untersuchungen
6. Syngene Kontrollgruppen
6.1. Die syngene Kontrollgruppe (Gruppe A/s) ohne Immunsuppression 25
6.2. Die syngene Kontrollgruppe (Gruppe B/s) mit Immunsuppression
(CSA 5 mg/kg/Tag) 26
6.3. Die syngenen Kontrollgruppen (Gruppe C/s und D/s) mit Immunsuppression
(NDS-61 ® alleine und in Kombination mit 2,5 mg/kg/Tag Cyclosporin-A) 26
B. Ergebnisse der FACS-Analysen 27
1. T-Lymphozyten (Ox-19 positive Zellen) 27
2. T-Suppressor- und zytotoxische T-Zellen, NK-Zellen (Ox-8 positive Zellen) 27
3. Aktivierte, zytotoxische T-Zellen (Ox-39 positive Zellen) 28
4. T-Helferzellen und Makrophagen (W3/25 positive Zellen) 29
6. Aktivierte T- Zellen, IL-2 exprimierende Zellen (NDS-61 * positive Zellen) 29
7. Ox-21 (Mouse-anti-human C3b Antikörper) und Ox-1 (Leucocyte-common Antigen) 30
III
C: Zusammenfassung der Ergebnisse 30
V. DISKUSSION 31
VI. ZUSAMMENFASSUNG 39
VII. LITERATURVERZEICHNIS 40
VIII. ANHANG 45
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