Bendamustin - eine neue Alternative in der Behandlung des fortgeschrittenen hepatozellulären Karzinoms (HCC)?:
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Autor: Zeh, Julia
Jahr: 2009
Inhaltsverzeichnis
1 Einleitung 7
1.1 Das hepatozelluläre Karzinom (HCC) 7
1.1.1 Epidemiologie und Risikofaktoren 7
1.1.2 Pathogenese 8
1.1.3 Staging Systeme 8
1.1.4 Therapieformen 10
1.1.4.1 Chirurgische Verfahren 10
1.1.4.1.1 LTX 11
1.1.4.1.2 Resektion 11
1.1.4.2 Nicht-chirurgische Verfahren 11
1.1.4.2.1 PEI 12
1.1.4.2.2 Thermische Verfahren 12
1.1.4.2.3 TACE 12
1.1.4.2.4 Medikamentöse Therapie 13
1.2 Bendamustin 15
1.2.1 Chemischer Aufbau 15
1.2.2 Wirkmechanismus 16
1.2.3 Pharmakokinetik 17
1.2.3.1 Ei weissbindung 17
1.2.3.2 Metabolisierung 17
1.2.3.3 Biologische Halbwertszeit und Elimination 18
1.2.4 Klinische Anwendung 19
1.2.5 Nebenwirkung und Toxizität 20
1.3 Aufgabenstellung und Zielsetzung 21
2 Material und Methoden 22
2.1 In vitro Zellversuche 22
2.1.1 Verwendete Materialien und Geräte für die Zellkultur 22
2.1.1.1 Lösungen und Reagenzien 22
2.1.1.2 Pipettier- und Zellkulturmaterial 22
2.1.1.3 Geräte 23
2.1.1.4 Zytostatikum 23
2.1.1.5 Zelllinien 24
2.1.2 Zellkultur 25
2.1.2.1 Auftauen/Einfrieren 25
2.1.2.2 Anzucht und Passagieren 25
2.1.2.3 Medikamentenzubereitung 26
2.1.2.4 Vorversuche 26
4
2.1.2.5 Versuchsreihen 27
2.2 In vivo Versuche mit Hilfe des klassisch Chimären Mausmodells 28
2.2.1 Versuchstiere 28
2.2.2 Versuchstierhaltung 28
2.2.3 Tierversuchsdurchführung 28
2.2.3.1 Vorbereitung der Zelllinien HuH7 und HepG2 28
2.2.3.2 Versuchsablauf 29
2.2.3.3 Apoptosenachweis durch TUNEL-Methode 30
2.2.3.4 Proliferationsnachweis durch immunhistochemische Färbung mit MIB-1 31
2.2.3.5 Ziel des Versuchs 31
2.3 Klinische Pilot-Studie 32
2.3.1 Patientenselektion 32
2.3.1.1 Einschlusskriterien 32
2.3.1.2 Ausschlußkriterien 32
2.3.2 Studienprotokoll 33
2.4 Statistik 35
2.4.1 Datenauswertung 35
2.4.2 Ansatzgröße 35
2.4.3 Statistische Analysen 35
2.4.3.1 Definition der IC50 36
2.4.3.2 Graphische Darstellung der IC50 36
3 Ergebnisse 37
3.1 Ergebnisse der in vitro Zytotoxizitätsversuche 37
3.1.1 Hepatoma-Zelllinien unter Bendamustinbehandlung 37
3.1.2 Pankreaskarzinomzelllinien unter Bendamustinbehandlung 39
3.1.3 HuH7 im Test mit NVP-LAQ824 und NVP-AEE788 40
3.2 Ergebnisse der in vivo Tierversuche 42
3.2.1 HuH7 Tierversuch 42
3.2.2 HepG2 Tierversuch 45
3.2.3 Ergebnisse der TUNEL-Methode und MIB-1-Färbung 47
3.3 Ergebnisse der klinischen Studie 49
3.3.1 Patientencharakteristika 49
3.3.2 Behandlungsablauf und Toxizität 51
3.3.3 Tumoransprechrate und Gesamtüberleben 52
4 Diskussion 54
4.1 Aktuelle Studienlage zur Chemotherapie des fortgeschrittenen HCC 54
4.2 Diskussion der Ergebnisse im Vergleich zu bereits publizierten Daten 59
4.2.1 Diskussion der in vitro Zytotoxizitätsversuche 59
4.2.2 Diskussion der in vivo Tierversuche 61
5
4.2.3 Diskussion der klinischen Studie 63
4.3 Klinische Relevanz 65
5 Zusammenfassung der Arbeit 67
6 Literatur 69
7 Anhang 80
7.1 Abkürzungsverzeichnis 80
7.2 Erklärung über die eigenständige Abfassung der Arbeit 83
7.3 Tabellarischer Lebenslauf 84
7.4 Danksagung 86
6
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