Einfluss von UVB-Strahlung auf den Hyaluronsäure-Metabolismus der Haut:
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| adam_text | Titel: Einfluss von UVB-Strahlung auf den Hyaluronsäure-Metabolismus der Haut
Autor: Voigt, Susanne
Jahr: 2008
3
Inhaltsverzeichnis
1 Einleitung 5
1.1 Die Haut und ihre Funktionen 5
1.2 Aufbau und Organisation derkutanen Epidermis und Dennis 5
1.3 Die Extrazelluläre Matrix der Haut .7
1.4 Hyaluronsäure-ein Glykosaminoglykan der EZM 8
1.4.1 Synthese der Hyaluronsäure 9
1.4.2 Regulation der HAS Synthese 9
1.4.3 Katabolismus der Hyaluronsäure 10
1.4.4 Hyaluronsäurerezeptoren 11
1.5 Haut und UV-Strahlung 13
1.6 Ultraviolette Strahlung und ihre biologischen Wirkungen auf die Haut 14
1.6.1 Kurzfristige Effekte 14
1.6.2 Langfristige Effekte 17
2 Fragestellung und Zielsetzung 19
3 Material und Methoden ...20
3.1 Medien , Puffer und Reagenzien 20
3.2 Geräte 22
3.3 Reaktionskits 23
3.4 Zellkulturen der Fibroblasten und HaCaT-Zellen 23
3.5 UVB Bestrahlung der Zellen 24
3.6 RNA-Gewinnung aus Fibroblasten und HaCaT 25
3.7 Probandenkollektiv 26
3.8 Minimale Erythemdosis (MED) Bestimmung und UVB Exposition der Probanden 27
3.9 Entnahme der Hautstanzen 21
4
3.10 RNA-Präparation der Hautstanzen 28
3.11 Transkription: cDNA-Synthese 29
3.11.1 Quantitative Real-Time Polymerase Kettenreaktion (qRT-PCR) 29
3.11.2 Relative Quantifizierung: Delta-Delta Ct-Methode 32
3.12 Gelelektrophorese 33
3.13 HAELISA 34
3.14 Immunhistochemische Anfärbung der Hautstanzen nach der ABC Technik 35
3.15 FACS Analyse ( =Fluorescence activated cell sorting) 36
3.16 Statistik 37
4 Ergebnisse 38
4.1 Expressionsmuster HA metabolisierender Enzyme in unbestrahlter menschlicher Haut, in
Keratinozyten und dermalen Fibroblasten .38
4.2 Die zeitliche Abhängigkeit UVB-induzierter Entzündung führt zu zellspezifischen Effekten 41
4.2.1 Die mRNA der HAS Enzyme werden 3h und 24h nach UVB-Bestrahlung differentiell exprimiert 42
4.3 Zeitverlauf der mRNA Expression von ausgewählten Enzymen nach UVB-Bestrahlung von
HaCaTs und Fibroblasten 46
4.4 Mögliche indirekte Effekte der UVB-Bestrahlung überZytokine 46
4.5 Zeitliche Abhängigkeit freier HA und zellspezifische Effekte durch UVB 48
4.6 Vergleich HA Akkumulation Epidermis-Dermis 50
5 Diskussion.... .52
6 Zusammenfassung 56
7 Tabellenverzeichnis .58
8 Abbildungsverzeichnis 59
9 Abkürzungsverzeichnis J61
10 Literaturverzeichnis .62
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