Versuche zur Steigerung des Anteils transfertauglicher Embryonen mit dem b-Blocker [Beta-Blocker] Carazolol und Untersuchungen zur Geschlechtsbestimmung und Teilung von Embryonen beim Rind:
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1993
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
VERZEICHNIS
DER
HAEUFIG
VERWENDETEN
ABKUERZUNGEN
8
1.
EINLEITUNG
9
2.
SCHRIFTTUM
10
2.1.
CARAZOLOL
(SUACRON)
10
2.1.1.
CHEMIE
10
2.1.2.
PHARMAKOKINETIK
UND
PHARMAKODYNAMIK
10
2.1.3.
DER
EINSATZ
VON
CARAZOLOL
IN
DER
TIERMEDIZIN
12
2.1.3.1.
TACHYKARDE
HERZRHYTHMUSSTOERUNGEN
12
2.1.3.2.
EINSATZ
VON
CARAZOLOL
(SUACRON)
IN
DER
GEBURTSHILFE
UND
GYNAEKOLOGIEL3
2.2.
DIE
GESCHLECHTSBESTIMMUNG
VON
PRAEIMPLANTIVEN
RINDEREMBRYONEN
18
2.2.1.
DIE
ZYTOGENETISCHE
GESCHLECHTSDIAGNOSE
18
2.2.1.1.
DER
NACHWEIS
DES
BARR-KOERPERCHENS
18
2.2.1.2.
DIE
DARSTELLUNG
DER
GESCHLECHTSCHROMOSOMEN
18
A)
DARSTELLUNG
DER
GESCHLECHTSCHROMOSOMEN
NACH
TROPHOBLASTBIOPSIE
18
B)
DARSTELLUNG
DER
GESCHLECHTSCHROMOSOMEN
NACH
BIOPSIE
VON
SECHS
BIS
SIEBEN
TAGE
ALTEN
RINDEREMBRYONEN
20
C)
DARSTELLUNG
DER
GESCHLECHTSCHROMOSOMEN
AN
GETEILTEN
EMBRYONEN
21
D)
DARSTELLUNG
DER
GESCHLECHTSCHROMOSOMEN
NACH
AMNIOZENTESE
23
2.2.2.
DIE
GESCHLECHTSBESTIMMUNG
DURCH
DEN
NACHWEIS
DES
H-Y-ANTIGENS
24
2.2.2.1.
DER
BISHERIGE
KENNTNISSTAND
UEBER
DAS
H-Y-ANTIGEN
24
2.2.2.2.
DER
ZYTOLYTISCHE
NACHWEIS
26
2.2.2.3.
DER
NACHWEIS
DURCH
INDIREKTE
IMMUNOFLUORESZENZ
27
2.2.2.4.
DIE
ENTWICKLUNGSVERZOEGERUNG
H-Y-ANTIGEN
TRAGENDER
EMBRYONEN
BEI
INKUBATION
MIT
H-Y-ANTIKOERPEM
31
2.2.3.
DIE
GESCHLECHTSBESTIMMUNG
AUFGRUND
UNTERSCHIEDLICHER
ENTWICK
LUNGSGESCHWINDIGKEITEN
VON
MAENNLICHEN
UND
WEIBLICHEN
EMBRYONEN
32
2.2.4.
DIE
GESCHLECHTSBESTINUNUNG
DURCH
KULTIVIERUNG
DER
EMBRYONEN
IN
"FREEMARTIN"-SERUM
33
2.2.5.
DIE
GESCHLECHTSBESTIMMUNG
DURCH
MESSUNG
VON
ENZYMAKTIVITAETEN
34
2.2.6.
DER
ELISA
36
2.2.7.
DIE
GESCHLECHTSBESTIMMUNG
DURCH
VERWENDUNG
Y-CHROMOSOMSPEZIFISCHER
DNA-ABSCHNITTE
36
2.2.7.1.
DIE
HYBRIDISIERUNG
36
A)
IN
SITU
HYBRIDISIERUNG
37
B)
SLOT/DOT
BLOTTING
38
2.2.7.2.
DIE
GESCHLECHTSBESTIMMUNG
MIT
DER
POLYMERASE
CHAIN
REACTION
(PCR)
39
2.3.
ERSTELLUNG
IDENTISCHER
ZWILLINGE
BEIM
RIND
43
2.3.1.
TEILUNGSVERSUCHE
DURCH
BLASTOMERENSEPARATION
43
2.3.2.
TEILUNG
MITTELS
GLASNADEL
43
2.3.3.
TEILUNG
MIT
EINER
METALLKLINGE
47
2.3.4.
COMPUTERGESTEUERTE
MIKROMANIPULATION
53
2.3.5.
DIE
BEDEUTUNG
DER
ZONA
PELLUCIDA
FUER
DIE
ENTWICKLUNG
GETEILTER
EMBRYONEN
53
2.3.6.
DER
EINFLUSS
DER
"GUETE"
DER
TEILUNG
AUF
DIE
ENTWICKLUNG
GETEILTER
EMBRYONEN
57
2.3.7.
EINFLUSS
DES
STADIUMS
DER
EMBRYONEN
AUF
DIE
TEILUNG
58
2.3.8.
VERGLEICHENDE
UNTERSUCHUNGEN
MIT
VERSCHIEDENEN
TEILUNGSTECHNIKEN
59
2.3.9.
DAS
MEHRMALIGE
TEILEN
VON
EMBRYONEN
ZUR
PRODUKTION
VON
DRILLINGEN
UND
VIERLINGEN
62
2.3.10.
DIE
TIEFGEFNERKONSERVIERUNG
VON
GETEILTEN
RINDEREMBRYONEN
64
2.3.10.1.
DIE
TEILUNG
IN
SUCROSEHALTIGEN
MEDIEN
65
2.3.10.2.
DIE
TEILUNG
VOR
ODER
NACH
DER
TIEFGEFRIERUNG
66
2.3.10.3.
DER
EINFLUSS
DER
ZONA
PELLUCIDA
AUF
DIE
KRYOKONSERVIERBARKEIT
GETEILTER
EMBRYONEN
67
2.3.10.4.
DER
EINFLUSS
EINER
AGAREINBETTUNG
67
2.3.10.5.
DER
EINFLUSS
EINER
KULTIVIERUNG
DER
HAELFTEN
ZWISCHEN
TEILUNG
UND
KRYOKONSERVIERUNG
69
2.3.10.6.
VERSUCHE
ZUR
TIEFGEFRIERMETHODE
70
3.
EIGENE
UNTERSUCHUNGEN
72
3.1.
MATERIAL
UND
METHODE
72
3.1.1.
TIERMATERIAL
72
3.1.1.1.
SPENDER
72
3.1.1.2.
EMPFAENGERTIERE
72
3.12.
EIGNUNGSUNTERSUCHUNG
72
3
1.2.1.
EIGNUNGSUNTERSUCHUNG
DER
SPENDERTIERE
72
3.1.2.2
EIGNUNGSUNTERSUCHUNG
DER
EMPFAENGERTIERE
73
3.1.3.
VORBEREITUNG
DER
SPENDER
UND
EMPFAENGERTIERE
74
3.1.3.1.
SPENDERTIERE
74
3.1.3.2.
EMPFAENGERTIERE
75
3.1.4.
SPUEL-UND
KULTURMEDIUM
75
3.1.5.
GEWINNUNG
DER
EMBRYONEN
76
3.1.6.
BEURTEILUNG
DER
EMBRYONEN
76
3.1.7.
MIKROMANIPULATION
77
3.1.7.1.
MIKROMANIPULATION
ZUR
GESCHLECHTSBESTIMMUNG
77
A)
MIKROSKOP
UND
MIKROMANIPULATOREN
77
B)
HERSTELLUNG
UND
ANBRINGUNG
DER
GLASGERAETE
78
C)
ZELLENTNAHME
ZUR
GESCHLECHTSBESTIMMUNG
78
3.1.7.2.
MIKROMANIPULATION
ZUR
PRODUKTION
GESEXTER
ZWILLINGE
79
A)
MIKROSKOP
UND
MIKROMANIPULATOR
79
B)
TEILUNG
DER
EMBRYONEN
UND
ZELLGEWINNUG
FUER
DIE
GESCHLECHTSBESTIMMUNG
79
3.1.8.
24-STUENDIGE
KULTIVIERUNG
VON
GETEILTEN
UND
UNGETEILTEN
RINDEREMBRYONEN
NACH
DER
ZELLENTNAHME
81
3.1.9.
TIEFGEFRIERUNG
VON
UNGETEILTEN
EMBRYONEN
NACH
DER
ZELLENTNAHME
IM
ONE-STEP-VERFAHREN
81
3.1.9.1.
VORBEREITUNG
81
3.1.9.2.
TIEFGEFRIERVORGANG
82
3.1.10.
DIE
GESCHLECHTSBESTIMMUNG
MIT
DER
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
82
3.1.11.
AUFTAUVORGANG
83
3.1.12.
DER
EMBRYOTRANSFER
83
3.1.13.
TRAECHTIGKEITSKONTROLLE,
ABKALBERATEN
UND
UEBERPRUEFUNG
DES
GESCHLECHTS
84
3.2.
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
84
3.3.
ERGEBNISSE
85
3.3.1.
VERGLEICH
DER
SUPEROVULATION
MIT
FOLLTROPIN-V
UND
PMSG/ANTI-PMSG
86
3.3.2.
DER
EINFLUSS
VON
CARAZOLOL
(SUACRON)AUF
DIE
SUPEROVULATIONSERGEBNISSE
88
3.3.2.1.
DER
EINFLUSS
VON
CARAZOLOL
(SUACRON)
AUF
DIE
QUALITAET
DER
EM
BRYONEN
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
DER
ART
DER
SUPEROVULATION
91
3.3.2.2.
EINFLUSS
VOM
CARAZOLOL
(SUACRON)
AUF
DIE
VERTEILUNG
DER
UNBEFRUCHTETEN
EIZELLEN
94
3.3.3.
UEBERPRUEFUNG
DER
LEBENSFAEHIGKEIT
DER
MIKROMANIPULIERTEN
EMBRYONEN
UND
HAELFTEN
IN
VITRO
98
3.3.3.1.
KULTIVIERUNG
VON
EMBRYONEN
NACH
DER
ZELLENTNAHME
(BIOPSIE)
FUER
DIE
GESCHLECHTSBESTIMMUNG
98
3.3.3.2.
KULTIVIERUNG
VON
EMBRYONENHAELFREN
NACH
DER
TEILUNG
MIT
DEM
MIKROMANIPULATOR
"UNIMANUS"
UND
DER
ZELLGEWINNUNG
FUER
DIE
GESCHLECHTSBESTIMMUNG
99
3.3.4.
VERSUCHE
ZUR
VERSANDFORM
100
3.3.5.
PLAUSIBILITAETSTEST
ZUR
UEBERPRUEFUNG
DER
PCR-METHODE
101
3.3.6.
ERGEBNISSE
DES
TRANSFERS
"GESEXTER
EMBRYONEN"
102
3.3.7.
VERGLEICH
DES
MIT
DER
PCR
BESTIMMTEN
GESCHLECHTS
MIT
DEM
TATSAECHLICHEN
GESCHLECHT
104
4.
DISKUSSION
105
4.1.
DER
EINSATZ
VON
SUACRON
IM
EMBRYOTRANSFER
105
4.2.
DIE
SUPEROVULATION
MIT
FOLLTROPIN-V
ODER
PMSG/ANTI-PMSG
108
4.3.
DIE
KULTIVIERUNG
VON
MIKROMANIPULIERTEN
EMBRYONEN
109
4.4.
DER
TRANSFER
MIKROMANIPULIERTER
EMBRYONEN
111
4.5.
DIE
GESCHLECHTSBESTIMMUNG
116
5
ZUSAMMENFASSUNG
SUMMARY
120
6.
SCHRIFTTUMSVERZEICHNIS
124 |
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