Untersuchungen zu mutmasslichen Pathogenitätsfaktoren von Streptococcus suis:
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1994
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1
EINLEITUNG
1
2
LITERATUR
2
2.1
GESCHICHTLICHER
UEBERBLICK
UND
TAXONOMISCHE
EINORDNUNG
2
2.2
BIOCHEMISCHE
EIGENSCHAFTEN
3
23
SEROLOGISCHE
EIGENSCHAFTEN
4
2.4
VORKOMMEN
VON
STREPTOCOCCUS
SUIS
UND
ERKRANKUNGEN
BEIM
SCHWEIN
SOWIE
ANDEREN
TIERARTEN
4
2.5
STREPTOCOCCUS
SUIS
ALS
ZOONOSEERREGER
7
2.6
BEDEUTUNG
VON
PROTEINEN
ALS
VIRULENZFAKTOREN
9
2.7
BEDEUTUNG
DER
KAPSEL
VON
STREPTOCOCCUS
SUIS
12
2.8
HAEMAGGLUTININE
UND
FIMBRIEN
12
2.9
BEDEUTUNG
DER
PHAGOZYTOSE
13
2.10
BAKTERIELLE
ADHAESIONSMECHANISMEN
14
2.11
BINDUNG
VON
PLASMAPROTEINEN
17
2.12
WEITERE
METHODEN
ZUR
TYPISIERUNG
VON
STREPTOCOCCUS
SUIS
18
2.12.1
"RESTRICTION
ENDONUCLEASE
ANALYSIS"
(REA)
18
2,12.2
"MULTILOCUS
ENZYME
ELECTROPHORESIS"
(MEE)
19
3
MATERIAL UND
METHODEN
20
3.1
BAKTERIENKULTUREN
20
3.2
ANZUECHTUNGSMEDIEN
20
3.3
IDENTIFIZIERUNG
21
3.3.1
HAEMOLYSEFORM
21
3.3.2
CAMP-TEST
21
3.3.3
VORLAEUFIGE
BIOCHEMISCHE
CHARAKTERISIERUNG
22
3.3.3.1
NACHWEIS
DER
AMYLASE-AKTIVITAET
22
3.3.3.2
WACHSTUM
IN
ANWESENHEIT
VON
6,
5%-IGER
KOCHSALZLOESUNG
22
3.3.3.3 ABAU
VON
KOHLENHYDRATEN
22
3.3.4
WEITERGEHENDE
BIOCHEMISCHE
CHARAKTERISIERUNG
23
3.3.4.1
ABBAU
VON
KOHLENHYDRATEN
23
3.3.4.2
SPALTUNG
VON
ARGININ
24
3.3.4.3 HYDROLYSE
VON
AESCULIN
24
3.4
SEROLOGISCHE
GRUPPENBESTIMMUNG
24
3.4.1
EXTRAKTION
DER
GRUPPENANTIGENE
24
3.4.2
NACHWEIS
DER
GRUPPENANTIGENE
25
3.5
SEROTYPISIERUNG
25
3.5.1
IMMUNISIERUNG
25
3.5.2
EXTRAKTION
DER
TYPENANTIGENE
26
3.5.3
PRAEPARATION
TYPENSPEZIFISCHER
ANTISEREN
26
3.5.3.1
ABSORPTION
DER
ANTISEREN
26
3.5.4
NACHWEIS
DER
TYPENANTIGENE
26
3.5.4.2
DOPPELIMMUNDIFFUSION
NACH
OUCHTERLONY
27
3.5.4.3
STAPHYLOKOKKEN-KOAGGLUTINATION
27
3.6
NACHWEIS
DER
PROTEINANTIGENE
MRP
UND
EF
28
3.6.1
ISOLIERUNG
VON
MRP
DURCH
LYSOZYM-EXTRAKTION
28
3.6.2
ISOLIERUNG
VON
EF
DURCH
AMMONIUMSULFATFAELLUNG
28
3.6.3
PROTEINBESTIMMUNG
28
3.6.4
SDS-POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE(PAGE)
29
3.6.4.1
COOMASSIE-FAERBUNG
29
3.OE.4.2
SILBER-FAERBUNG
29
3.6.5
"WESTERN
BLOTTING"
31
3.6.6
NACHWEIS
DER
PROTEINANTIGENE
MRP
UND
EF
AUF
NITROZELLULOSEMEMBRANEN
31
3.6.7
HERSTELLUNG
UND
GEWINNUNG
VON
POLYKLONALEM
ANTISERUM
GEGEN
DAS
PROTEINANTIGEN
MRP
32
3.6.8
NACHWEIS
VON
MRP
UND
EF
NACH
ANZUECHTUNG
DER
KULTUREN
AUFNITROZELLULOSEMEMBRANEN
32
3.7
WEITERE
EIGENSCHAFTEN
VON
STREPTOCOCCUS
SUIS
33
3.7.1
WACHSTUMSEIGENSCHAFTEN
IN
FLUESSIGMEDIUM
33
3.7.2
ANFAERBUNG
MIT
METHYLENBLAU
33
3.7.3
WACHSTUM
IN
SOFT
AGAR
33
3.7.4
HEXADECAN-ADHAERENZ
TEST
34
3.8
HAEMAGGLUTINATIONSTEST
34
3.8.1
HERKUNFT
DER
ERYTHROZYTEN
34
3.8.2
OBJEKTTRAEGERAGGLUTINATION
35
3.8.3
HITZEBEHANDLUNG
35
3.8.4
ENZYMATISCHE
BEHANDLUNG
35
3.9
ADHAERENZ
AN
HELA-ZELLEN
36
3.9.1
PRAEPARATION
DER
HELA-ZELLEN
36
3.9.2
MARKIERUNG
DER
BAKTERIEN
MIT
FLUORESCEINISOTHIOCYANAT
36
3.9.3
ADHAERENZVERSUCH
36
3.10
ADHAERENZ
AN
EPITHELZELLEN
37
3.10.1
GEWINNUNG
DER
EPITHELZEILEN
37
3.10.2
MARKIERUNG
DER
BAKTERIEN
MIT
FLUORESCEINISOTHIOCYANAT
37
3.10.3
ADHAERENZVERSUCH
37
3.11
ADHAERENZ
AN
MAKROPHAGEN
38
3.11.1
PRAEPARATION
DER
MAKROPHAGEN
38
3.11.2
MARKIERUNG
DER
BAKTERIEN
MIT
FLUORESCEINISOTHIOCYANAT
39
3.11.3
ADHAERENZVERSUCH
39
3.12
PHAGOZYTOSEVERSUCHE
39
3.12
1
ISOLIERUNG
DER
GRANULOZYTEN
39
3.12.2
ANZUECHTUNG
UND
OPSONISIERUNG
DER
BAKTERIEN
39
3.12.3
PHAGOZYTOSE
40
3.12.4
AUSZAEHLUNG
40
3.13
BINDUNG
VON
PLASMAPROTEINEN
40
3.13.1
MARKIERUNG
MIT
125
J
40
3.13.2
BESTIMMUNG
DES
JODIERUNGSGRADES
41
3.13.3
BINDUNG
DER
125
J-MARKIERTEN
PLASMAPROTEINE
41
3.13
4
ISOLIERUNG
DER
PLASMAPROTEINBINDUNGSSTELLEN
DER
BAKTERIELLEN
OBERFLAECHEN
42
3.13.4
1
ETRAKTION
DURCH
MUTANOLYSINBEHANDLUNG
42
3.13.4.2
HITZE-EXTRAKTION
BEI
SAUREM
PH
42
3.13.4
3
ISOLIERUNG
DER
PLASMAPROTEINBINDUNGSSTELLEN
AUS
DEM
KULTURUEBERSTAND
43
3.13.5
NACHWEIS
DER
PLASMAPROTEINBINDUNGSSTELLEN
43
3
13.6
AUTORADIOGRAFIE
43
3
13.7
NACHWEIS
DER
IGG-BINDUNGSSTELLEN
DES
KULTURUEBERSTANDES
AUF
NITROZELLULOSEMEMBRANEN
44
3.13.8
NACHWEIS
DER
IGG-BINDUNGSSTELLEN
NACH
ANZUECHTUNG
DER
KULTUREN
AUF
NITROZELLULOSEMEMBRANEN
44
3.14
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
DER
ERGEBNISSE
44
4
ERGEBNISSE
46
4.1
IDENTIFIZIERUNG
DER
STREPTOKOKKENKULTUREN
46
4.2
SEROTYPISIERUNG
52
4.3
NACHWEIS
VON
MRP
UND
EF
59
4.4
WEITERE
EIGENSCHAFTEN
VON
STREPTOCOCCUS
SUIS
71
4.5
HAEMAGGLUTINIERENDE
EIGENSCHAFTEN
DER
STREPTOCOCCUS
SNIS-KUITUREN
77
4.6
ADHAERENZ
VON
STREPTOCOCCUS
SUIS
AN
HELA-ZELLEN
82
4.7
BEZIEHUNGEN
ZWISCHEN
HYDROPHOBIZITAET,
ADHAERIERENDEN
EIGENSCHAFTEN
UND
PHAGOZYTOSE
VON
STREPTOCOCCUS
SUIS
90
4.8
BINDUNG
VON
PLASMAPROTEINEN
93
5
DISKUSSION
100
6
ZUSAMMENFASSUNG
111
7
SUMMARY
113
8
RANGKUMAN
114
9
LITERATURVERZEICHNIS
116 |
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