Kardiale Expression natriuretischer Peptide in transgenen Mausmodellen verschiedener kardiovaskulärer Peptidsysteme:
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2008
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis
1 LITERATURÜBERSICHT 1
1.1 Das natriuretische Peptidsystem (NPS) 1
1.1.1 Struktur der natriuretischen Peptide 3
1.1.2 Rezeptoren der Natriuretischen Peptide (NPR) 4
1.1.3 Metabolismus der natriuretischen Peptide 9
1.1.4 Physiologie des ANP und des BNP 10
1.2 Das Renin-Angiotensin-Aldosteron-System 16
7.2.7 Biologische Effekte 16
7.2.2 Biosynthese und Metabolismus 18
7.2.3 Renin-Angiotensin-System im Gehirn 20
1.2.4 Einsatz der natriuretischen Peptide in der Klinik 23
1.3 Afas-Protoonkogen 26
7.3.7 Identifizierung des Mas-Protoonkogens 26
7.3.2 Sequenzvergleich 26
7.3.3 Expression des Mas-Gens 27
1.3.4 Funktionen des Mas-Genproduktes 28
2 MATERIAL UND METHODEN 31
2.1 Versuchstiere und Organpräparation 31
2.2 RNA-Isolierung 32
2.3 Generierung der ANP-, BNP- und CNP-Sonden 32
2.3.7 Reverse Transkriptase-Polymerase-Ketten-Reaktion (RT-PCR) 33
2.3.2 Polymerase-Ketten-Reaktion (PCR) 33
2.3.3 Elution der Sonde 35
2.3.4 Ligation 35
2.3.5 Transformation 36
2.3.6 Präparation von Plasmid-DNA 36
2.3.7 Minipräparation 37
2.3.8 Maxipräparation 37
2.3.9 Restriktionsverdau 37
2.3.70 Sequenzierung 38
2.3.11 Linearisierung 38
2.3.72 RNase-Protection-Assay (RPA) 39
2.3.73 GAPDH als „house keeping -Gen 41
2.3.14 Statistische Verfahren 42
2.4 Materialien und Reagenzien 42
3 ERGEBNISSE 47
3.1 kardiale ANP-Expression 47
3.7.7 kardiale ANP-Expression in ATrRezeptor-defizienten Mäusen 48
3.7.2 kardiale ANP-Expression in AT^Rezeptor-defizienten Mäusen 49
3.7.3 kardiale ANP-Expression in Angiotensinogen-defizienten Mäusen 50
3.7.4 kardiale ANP-Expression in NEP-defizienten Mäusen 51
3.7.5 kardiale ANP-Expression in Mas-defizienten Mäusen 52
3.2 kardiale BNP-Expression 53
3.2.7 kardiale BNP-Expression in AT,-Rezeptor-defizienten Mäusen 54
III
3.2.2 kardiale BNP-Expression in ATrRezeptor-defizienten Mäusen 55
3.2.3 kardiale BNP-Expression in Angiotensinogen-defizienten Mäusen 56
3.2.4 kardiale BNP-Expression in Angiotensinogen-überexprimierenden Mäusen 57
3.2.5 kardiale BNP-Expression in NEP-defizienten Mäusen 58
3.2.6 kardiale BNP-Expression in Mas-defizienten Mäusen 59
4 DISKUSSION 60
5 ZUSAMMENFASSUNG DER ARBEIT 68
6 LITERATUR 72
7 DANKSAGUNG 99
8 ERKLÄRUNG ÜBER DIE EIGENSTÄNDIGE ABFASSUNG DER ARBEIT 100
9 LEBENSLAUF 101
IV
Abbildungs- und Tabellenverzeichnis
Abb. 1 Aminosäuresequenzen der 3 humanen Peptide 3
Abb. 2 Schematische Darstellung der Struktur und Selektivität der 7
Rezeptoren des NPS
Abb. 3 Schema des Renin-Angiotensin-Aldosteron-Systems 20
Abb. 4 kardiale ANP-Expression in ATVRezeptor-defizienten Mäusen 48
Abb. 5 kardiale ANP-Expression in AT2-Rezeptor-defizienten Mäusen 49
Abb. 6 kardiale ANP-Expression in Angiotensinogen-defizienten 50
Mäusen
Abb. 7 kardiale ANP-Expression in NEP-defizienten Mäusen 51
Abb. 8 kardiale ANP-Expression in Mas-defizienten Mäusen 52
Abb. 9 kardiale BNP-Expression in ATrRezeptor-defizienten Mäusen 54
Abb. 10 kardiale BNP-Expression in AT2-Rezeptor-defizienten Mäusen 55
Abb. 11 kardiale BNP-Expression in Angiotensinogen-defizienten 56
Mäusen
Abb. 12 kardiale BNP-Expression in Angiotensinogen- 57
überexprimierenden Mäusen
Abb. 13 kardiale BNP-Expression in NEP-defizienten Mäusen 58
Abb. 14 kardiale BNP-Expression in Mas-defizienten Mäusen 59
Tab. 1 Rezeptorselektivität der natriuretischen Peptide in 8
Abhängigkeit der Spezies und des untersuchten Organs nach
Suga
v
|
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Inhaltsverzeichnis
1 LITERATURÜBERSICHT 1
1.1 Das natriuretische Peptidsystem (NPS) 1
1.1.1 Struktur der natriuretischen Peptide 3
1.1.2 Rezeptoren der Natriuretischen Peptide (NPR) 4
1.1.3 Metabolismus der natriuretischen Peptide 9
1.1.4 Physiologie des ANP und des BNP 10
1.2 Das Renin-Angiotensin-Aldosteron-System 16
7.2.7 Biologische Effekte 16
7.2.2 Biosynthese und Metabolismus 18
7.2.3 Renin-Angiotensin-System im Gehirn 20
1.2.4 Einsatz der natriuretischen Peptide in der Klinik 23
1.3 Afas-Protoonkogen 26
7.3.7 Identifizierung des Mas-Protoonkogens 26
7.3.2 Sequenzvergleich 26
7.3.3 Expression des Mas-Gens 27
1.3.4 Funktionen des Mas-Genproduktes 28
2 MATERIAL UND METHODEN 31
2.1 Versuchstiere und Organpräparation 31
2.2 RNA-Isolierung 32
2.3 Generierung der ANP-, BNP- und CNP-Sonden 32
2.3.7 Reverse Transkriptase-Polymerase-Ketten-Reaktion (RT-PCR) 33
2.3.2 Polymerase-Ketten-Reaktion (PCR) 33
2.3.3 Elution der Sonde 35
2.3.4 Ligation 35
2.3.5 Transformation 36
2.3.6 Präparation von Plasmid-DNA 36
2.3.7 Minipräparation 37
2.3.8 Maxipräparation 37
2.3.9 Restriktionsverdau 37
2.3.70 Sequenzierung 38
2.3.11 Linearisierung 38
2.3.72 RNase-Protection-Assay (RPA) 39
2.3.73 GAPDH als „house keeping"-Gen 41
2.3.14 Statistische Verfahren 42
2.4 Materialien und Reagenzien 42
3 ERGEBNISSE 47
3.1 kardiale ANP-Expression 47
3.7.7 kardiale ANP-Expression in ATrRezeptor-defizienten Mäusen 48
3.7.2 kardiale ANP-Expression in AT^Rezeptor-defizienten Mäusen 49
3.7.3 kardiale ANP-Expression in Angiotensinogen-defizienten Mäusen 50
3.7.4 kardiale ANP-Expression in NEP-defizienten Mäusen 51
3.7.5 kardiale ANP-Expression in Mas-defizienten Mäusen 52
3.2 kardiale BNP-Expression 53
3.2.7 kardiale BNP-Expression in AT,-Rezeptor-defizienten Mäusen 54
III
3.2.2 kardiale BNP-Expression in ATrRezeptor-defizienten Mäusen 55
3.2.3 kardiale BNP-Expression in Angiotensinogen-defizienten Mäusen 56
3.2.4 kardiale BNP-Expression in Angiotensinogen-überexprimierenden Mäusen 57
3.2.5 kardiale BNP-Expression in NEP-defizienten Mäusen 58
3.2.6 kardiale BNP-Expression in Mas-defizienten Mäusen 59
4 DISKUSSION 60
5 ZUSAMMENFASSUNG DER ARBEIT 68
6 LITERATUR 72
7 DANKSAGUNG 99
8 ERKLÄRUNG ÜBER DIE EIGENSTÄNDIGE ABFASSUNG DER ARBEIT 100
9 LEBENSLAUF 101
IV
Abbildungs- und Tabellenverzeichnis
Abb. 1 Aminosäuresequenzen der 3 humanen Peptide 3
Abb. 2 Schematische Darstellung der Struktur und Selektivität der 7
Rezeptoren des NPS
Abb. 3 Schema des Renin-Angiotensin-Aldosteron-Systems 20
Abb. 4 kardiale ANP-Expression in ATVRezeptor-defizienten Mäusen 48
Abb. 5 kardiale ANP-Expression in AT2-Rezeptor-defizienten Mäusen 49
Abb. 6 kardiale ANP-Expression in Angiotensinogen-defizienten 50
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Abb. 7 kardiale ANP-Expression in NEP-defizienten Mäusen 51
Abb. 8 kardiale ANP-Expression in Mas-defizienten Mäusen 52
Abb. 9 kardiale BNP-Expression in ATrRezeptor-defizienten Mäusen 54
Abb. 10 kardiale BNP-Expression in AT2-Rezeptor-defizienten Mäusen 55
Abb. 11 kardiale BNP-Expression in Angiotensinogen-defizienten 56
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Abb. 12 kardiale BNP-Expression in Angiotensinogen- 57
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