Periurethrale Injektion adulter mesenchymaler Stammzellen als neuer Therapieansatz zur Behandlung der Belastungsinkontinenz im Rattenmodell:
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Gießen
VVB Laufersweiler
2009
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Ausgabe: | 1. Aufl. |
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IMAGE 1
INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS VIII
1. EINLEITUNG 1
2. LITERATURUEBERSICHT 3
2.1 INKONTINENZ IN DER HUMANMEDIZIN 3
2.2 VERSCHLUSSAPPARAT DER HARNBLASE (CORPUS VESICAE) 5
2.2.1 MUSKULAERE MECHANISMEN ZUM VERSCHLUSS DER HARNBLASE (ERHALT DER
KONTINENZ)
6
2.3 THERAPIEMOEGLICHKEITEN DER BELASTUNGSINKONTINENZ 7
2.4 STAMMZELLEN UND IHRE BEDEUTUNG FUER DIE REGENERATIONSMEDIZIN 9
2.4.1 MESENCHYMALE STAMMZELLEN (MSZ) 10
2.4.1.1 ZELLBASIERTE THERAPIE DER BELASTUNGSINKONTINENZ MIT MSZ 12
2.5TISSUE ENGINEERING (TE) UND REGENERATIVE MEDIZIN 13
2.5.1 TE 13
2.6 INKONTINENZPROBLEMATIK IN DER TIERMEDIZIN 16
2.6.1 THERAPIE 18
2.7 ZIELSETZUNG DER ARBEIT 20
3. MATERIAL UND METHODEN 21
3.1 TIERE 21
3.1.1 SYNGENES TIERMODELL 21
3.1.2 XENOGENES TIERMODELL 21
3.2 GEWINNUNG DER MESENCHYMALEN STAMMZELLEN (MSZ) 22
3.2.1 GEWINNUNG DER MURINEN MSZ (MMSZ) 22
3.2.2 GEWINNUNG DER HUMANEN MSZ (HMSZ) 23
3.2.2.1 ISOLIERUNG VON HMSZ 23
3.2.3 ZELLKULTUR 24
3.2.3.1 INKUBATION VON ZELLEN 24
3.2.3.2 PASSAGIEREN VON ZELLEN 24
3.2.3.3 INDUKTION EINER MYOGENEN DIFFERENZIERUNG 24
3.2.4 IMMUNCYTOCHEMIE KULTIVIERTER MESENCHYMALER STAMMZELLEN 25
3.2.4.1 ANTIKOERPER 26
V
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN HTTP://D-NB.INFO/994757328
DIGITALISIERT DURCH
IMAGE 2
INHALTSVERZEICHNIS
3.2.4.2 AUSWERTUNG 27
3.2.5 MARKIERUNG DER ZELLEN MIT PKH 26 27
3.3TIER-OP 28
3.3.1 VERSUCHSABLAUF 28
3.3.1.1 SYNGENES TIERMODELL 28
3.3.1.2 XENOGENES TIERMODELL 29
3.3.1.3 ZELLAPPLIKATION 29
3.3.1.4 ENTNAHME DER RATTENBLASEN 30
3.4 AUFARBEITUNG DER RATTENBLASEN 31
3.4.1 FIXIERUNG UND GEWEBESCHNITTE DER RATTENBLASEN 31
3.4.1.1 HISTOLOGISCHER NACHWEIS TRANSPLANTIERTER ZELLEN 32
3.4.2 IMMUNHISTOLOGIE 32
4. ERGEBNISSE 34
4.1 SYNGENES TIERMODELL 34
4.1.1 KULTURERFOLG 34
4.1.2 MYOGENE DIFFERENZIERUNG IN VITRO 34
4.1.2.1 GEGENUEBER 5-AZAZYTIDIN (5-AZA) EXPONIERTE MSZ 34
4.1.2.2 NICHT GEGENUEBER 5-AZA EXPONIERTE ZELLEN - KONTROLLEN 37
4.1.3 NACHWEIS TRANSPLANTIERTER ZELLEN IN DEN HISTOLOGISCHEN SCHNITTEN
40
4.1.4 NACHWEIS MYOGEN DIFFERENZIERTER ZELLEN IN DEN HISTOLOGISCHEN
SCHNITTEN 42
4.2 XENOGENES TIERMODELL 45
4.2.1 KULTURERFOLG 45
4.2.2 MYOGENE DIFFERENZIERUNG IN VITRO 47
4.2.2.1 GEGENUEBER 5-AZA EXPONIERTE MSZ 47
4.2.2.2 NICHT GEGENUEBER 5-AZA EXPONIERTE ZELLEN - KONTROLLEN 51
4.2.3 NACHWEIS DER APPLIZIERTEN ZELLEN IN DEN HISTOLOGISCHEN SCHNITTEN
57
4.2.4 NACHWEIS MYOGEN DIFFERENZIERTER ZELLEN IN DEN HISTOLOGISCHEN
SCHNITTEN 60
5. DISKUSSION 65
5.1 GRUENDE FUER NEUE THERAPIEOPTIONEN DER BELASTUNGSINKONTINENZ 65
5.2 WACHSTUM DER MSZ IN VITRO UND DEREN DIFFERENZIERUNG 65
5.2.1 WACHSTUM 65
VI
IMAGE 3
INHALTSVERZEICHNIS
5.2.2 DIFFERENZIERUNG VON MSZ (MURIN UND HUMAN) 66
5.3 5-AZA UND DESSEN MOEGLICHKEITEN 67
5.4 MOEGLICHKEITEN DER ZELLTRANSPLANTATION UND NACHWEIS DER ZELLEN 70
5.4.1 NACHWEIS DER ZELLEN IN VIVO UND DEREN DIFFERENZIERUNG 71
5.5 PKH 26-MARKIERUNG VON MSZ ZUR INJEKTION IN DEN BLASENHALS 73
5.6 BEHANDLUNG DER BELASTUNGSINKONTINENZ 75
5.6.1 NEUE, ZELLBASIERTE THERAPIEFORMEN 75
5.7 FAZIT UND AUSBLICK 82
6. ZUSAMMENFASSUNG 83
7. SUMMARY 85
8. LITERATURVERZEICHNIS 87
9. ANHANG 110
9.1 NACHWEIS DER PKH26-FLUORESZENZ IM SYNGENEN TIERMODELL (LEWIS
RATTEN). 110
9.2 NACHWEIS DER PKH26-FLUORESZENZ IM XENOGENEN TIERMODELL
(NACKTRATTEN). 111
10. DANKSAGUNG 114
11. ERKLAERUNG 116
VII |
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