Die Bedeutung des Sodium-dependent Organic Anion Transporters (SOAT) für den Steroidsulfattransport in der Plazenta und die Pathogenese hormonabhängiger Mammakarzinome:
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Gießen
VVB Laufersweiler
2009
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INHALTSVERZEICHNIS
ABBILDUNGSVERZEICHNIS III
TABELLENVERZEICHNIS IV
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS V
1. EINLEITUNG 1
1.1. MEMBRANTRANSPORTER 1
1.2. DIE SLC 10 FAMILIE 2
1.3. STEROIDSULFATE UND IHR TRANSPORT IM GEWEBE 5
1.4. UNTERTEILUNG VON MAMMAKARZINOMEN 7
1.5. ZIEL DER ARBEIT 8
2. MATERIAL 9
2.1. PRIMER UND ASSAYS 9
2.2. CDNA PANELS UND RNA 10
2.3. AGAROSEGEL ELEKTROPHORESE 11
2.4. FORMALDEHYD GEL ELEKTROPHORESE 11
2.5. KOMMERZIELLE KITS 11
2.6. KLONIERUNGEN 12
2.6.1. BAKTERIENSTAEMME 12
2.6.2. VEKTOREN 13
2.6.3. KULTURMEDIEN FUER BAKTERIEN 17
2.7. ZELLKULTUR 18
2.8. ANTIKOERPER 18
2.9. IMMUNHISTOCHEMIE 20
2.10. ELISA 21
2.11. IMMUNFLUORESZENZ 21
2.12. IN SITU HYBRIDISIERUNG 22
2.13. WESTERN BLOT 25
2.14. PROTEINGEWINNUNG AUS E. COLI 26
2.15. REAGENZIEN 26
2.16. GERAETE 27
2.17. BIOINFORMATIK 28
3. METHODEN 30
3.1. GENERELLE METHODEN 30
3.2. RNA EXTRAKTION 30
3.3. DENATURIERENDE RNA-AGAROSE-GELELEKTROPHORESE 32
3.4. CDNA SYNTHESE 33
3.5. POLYMERASE-KETTENREAKTION PCR 34
3.5.4. RT-PCR 34
3.5.5. RACE-PCR 35
3.5.6. REAL-TIME PCR 36
3.6. KLONIERUNG 40
3.7. ZELLKULTUR 41
3.8. IMMUNHISTOCHEMIE 41
3.9. ELISA 43
3.10. IMMUNFLUORESZENZ 44
3.11. IN SITU HYBRIDISIERUNG 45
3.12. WESTERN BLOT 48
3.13. PROTEINGEWINNUNG AUS E. COLI 50
4. ERGEBNISSE 52
4.1. SOAT EXPRESSION IN HUMANEN GEWEBEN 52
4.2. GENEXPRESSION DES HSOAT IN MAMMAKARZINOMEN 54
4.3. SOAT EXPRESSION IN MAUS UND RATTE 61
4.4. ZELLKULTURVERSUCHE AN MAMMAKARZINOMZELLLINIEN 62
4.5. IMMUNHISTOCHEMIE DES HSOAT-PROTEINS IN HUMANER PLAZENTA 65
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN HTTP://D-NB.INFO/995994498
DIGITALISIERT DURCH
IMAGE 2
4.6. ELISA 67
4.7. IMMUNFLUORESZENZ 68
4.8. IN SITU HYBRIDISIERUNG ISH MIT HSOAT RNA AN HUMANEN PLAZENTA- UND
HODENSCHNITTEN 73
4.9. WESTERN BLOT 75
4.10. PROTEINEXPRESSION DES HSOAT C-TERMINUS IN E. COLI 76
5. DISKUSSION 79
ZUSAMMENFASSUNG 84
SUMMARY 85
LITERATURVERZEICHNIS 86
ANHANG 92
DANKSAGUNG 102
EIDESSTATTLICHE ERKLAERUNG
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