Untersuchungen zur Persistenz von Mastomys-natalensis-Papillomvirus im natürlichen Wirt:
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Gießen
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
1 ABKUERZUNGEN 1
2 EINLEITUNG 4
2.1 TAXONONOMIE UND PHYLOGENIE VON PAPILLOMVIREN 4
2.2 AUFBAU UND EIGENSCHAFTEN VON PAPILLOMVIREN 6
2.3 REPLIKATION DER PAPILLOMVIREN 7
2.3.1 DER ZELLZYKLUS 8
2.3.2 DER VIRALE LEBENSZYKLUS 8
2.4 VETERINAERMEDIZINISCHE RELEVANZ VON PAPILLOMVIRUS-INFEKTIONEN 9
2.4.1 DAS BOVINE PAPILLOMVIRUS (BPV) 10
2.4.2 EQUINE SARKOIDE 10
2.4.3 DAS HUNDEPAPILLOMVIRUS 11
2.4.4 DAS PAPILLOMVIRUS DER HAUSKATZE 11
2.5 TIERMODELLE FIIR PAPILLOMVIRUS-INFEKTIONEN 11
2.5.1 DAS BAUMWOLLSCHWANZKANINCHEN 11
2.5.2 DIE VIELZITZENMAUS MASTOMYS COUCHA 12
2.6 PAPILLOMVIRUS-BEDINGTE ERKRANKUNGEN BEIM MENSCHEN 12
2.6.1 DIE MUKOSALEN HPV-TYPEN 13
2.6.2 BEDEUTUNG VON HPV BEIM GEBAERMUTTERHALSKREBS 14
2.6.3 DIE KUTANEN HPV-TYPEN 15
2.6.4 BEDEUTUNG VON KUTANEN HPV-TYPEN BEI HAUTKREBS 16
2.7 TRANSFORMIERENDE EIGENSCHAFTEN DER PAPILLOMVIREN BEI TIEREN 18
2.8 AUSWIRKUNGEN EINER SYSTEMISCHEN IMMUNSUPPRESSION 18
2.9 DAS IMMUNSUPPRESSIVUM CYCLOSPORIN A VERSUS RAPAMYCIN IM HINBLICK AUF
TUMORENTSTEHUNG 19
2.10 PRAEVENTION UND THERAPIE PAPILLOMVIRUS-BEDINGTER ERKRANKUNGEN 20
2.10.1 PROPHYLAXE UND THERAPIE DES ZERVIXKARZINOMS 20
2.10.2 THERAPIE PAPILLOMVIRUS-INDUZIERTER HAUTLAESIONEN 21
2.10.3 BEHANDLUNG MIT IMMUNMODULIERENDEN SUBSTANZEN 21
2.10.4 THERAPIE PAPILLOMVIRUS-BEDINGTER KRANKHEITSBILDER BEIM TIER 21
2.10.5 SCHUTZ GEGEN PAPILLOMVIRUS-BEDINGTE ERKRANKUNGEN DURCH
VAKZINIERUNG 21
2.11 DAS TIERMODELL MASTOMYS COUCHA ZUR UNTERSUCHUNG DER
PAPILLOMVIRUS-INDUZIERTEN
HAUTKARZINOGENESE 23
GESCANNT DURCH
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DIGITALISIERT DURCH
IMAGE 2
INHALTSVERZEICHNIS
2.12 ZIELSETZUNG DIESER ARBEIT 27
3 MATERIAL 28
3.1 CHEMIKALIEN UND REAGENZIEN 28
3.2 ARBEITSMATERIAL 30
3.3 GERAETE 31
3.4 CDNS FUER HYBRIDISIERUNG 31
3.5 PRIMERSEQUENZEN UND LOKALISATION 32
3.5.1 PRIMER FUER PCR-ANALYSEN 32
3.5.2 PRIMER FUER REALTIME-PCR MIT LIGHTCYCLER INSTRUMENT 1,0 (LC) 32
3.5.3 AKTIN-PRIMER 32
3.6 LOESUNGEN 33
4 METHODEN 36
4.1 TIEREXPERIMENTE 36
4.1.1 HALTUNG DER TIERE 36
4.1.2 TOETUNG DER TIERE BZW. AUSSCHEIDEN AUS EINEM VERSUCH 36
4.1.3 VERABREICHUNG DER IMMUNSUPPRESSIVA CYCLOSPORIN A UND RAPAMYCIN 36
4.1.4 ALLGEMEINANAESTHESIE BEI MASTOMYS COUCHA 37
4.1.5 BLUTENTNAHME AUS DEM RETROBULBAEREN VENENPLEXUS 37
4.1.6 ENTNAHME VON AUGENABSTRICHEN 37
4.1.7 ENTNAHME VON HAARPROBEN 38
4.1.8 CHIRURGISCHE ENTFERNUNG VON HAUTBIOPSIEN BZW. TUMOREN 38
4.1.9 DAS PROTOKOLL DER ZWEI-STUFEN-KARZINOGENESE 38
4.1.10 SEKTION DER TIERE 39
4.2 WEITERVERARBEITUNG DER ORGANE BZW. DES BLUTES 39
4.2.1 ORGANE 39
4.2.2 BLUT ...39
4.3 DNS 40
4.3.1 ISOLIERUNG VON DNS AUS GEWEBE 40
4.3.2 DNS-EXTRAKTION AUS HAARFOLLIKELN 41
4.3.3 PHOTOMETRISCHE KONZENTRATIONSBESTIMMUNG DER DNS 41
4.3.4 RESTRIKTIONSSPALTUNG VON DNS 42
4.3.5 BEHANDLUNG MIT RNASE A 42
4.3.6 ELEKTROPHORETISCHE AUFTRENNUNG VON DNS IN AGAROSE-HORIZONTALGELEN
42
4.4 DNS-BLOT-HYBRIDISIERUNG NACH SOUTHERN 43
IMAGE 3
INHALTSVERZEICHNIS III
4.4.1 HERSTELLUNG EINER RADIOAKTIVEN SONDE 43
4.4.2 HYBRIDISIERUNG 43
4.5 POLYMERASE-KETTEN-REAKTION (PCR) 44
4.5.1 DESIGN DER PRIMER 44
4.5.2 PRINZIP DER PCR 44
4.5.3 DURCHFUEHRUNG DER PCR-REAKTION 45
4.5.4 BESTIMMUNG DER VIRUSLAST MITTELS REALTIME-PCR 46
4.6 IN SIJM-HYBRIDISIERUNG 47
4.6.1 BIOTIN-NICK-TRANSLATION (ROECHE) 47
4.6.2 DEPARAFFINISIERUNG UND ANTIGEN-RUECKGEWINNUNG 48
4.6.3 VERDAU UND ABSTOPPEN 48
4.6.4 HYBRIDISIERUNG 48
4.6.5 AMPLIFIZIERUNG DES SIGNALS 48
4.6.6 HAEMATOXYLIN-EOSIN-FAERBUNG 49
4.7 ELEKTRONENMIKROSKOPIE 49
4.7.1 PRINZIP DER ELEKTRONENMIKROSKOPIE 49
4.7.2 FIXIERUNG UND EINBETTUNG DES PROBENMATERIALS 49
4.7.3 VORBEREITUNG DER PROBENNETZE 50
4.8 STATISTISCHE AUSWERTUNGEN 50
4.8.1 MITTELWERT 50
4.8.2 MEDIAEN 50
4.8.3 DER LOG RANG-TEST 50
4.8.4 KAPLAN-MAIER-SCHAETZER 50
5 ERGEBNISSE 51
5.1 DAS TIERMODELL MASTOMYS COUCHA 51
5.1.1 BEOBACHTUNGEN DER TUMORENTWICKLUNG 51
5.1.2 ERHOEHTE TUMORINZIDENZ BEI MAENNLICHEN TIEREN 53
5.1.3 AUGENENTZUENDUNGEN - IST MNPV AETIOLOGISCH BETEILIGT? 54
5.1.4 ERHEBUNG VON DATEN UEBER TUMORINZIDENZ UND HAEUFIGKEIT VON
AUGENINFEKTIONEN
ANHAND DER BEOBACHTUNG EINES KOLLEKTIVS 55
5.1.5 TUMORENTWICKLUNG NACH ANWENDUNG DER KLASSISCHEN ZWEI-STUFEN-
KARZINOGENESE 57
5.2 AUSBREITUNG VON MNPV IN VERSCHIEDENEN GEWEBEN 58
5.2.1 DAS RISIKO DER KONTAMINATION BEI DER SEKTION 58
IMAGE 4
INHALTSVERZEICHNIS IV
5.2.2 ERGEBNISSE DER PCR-ANALYSEN 60
5.2.3 ERGEBNISSE DER SOUTHERN BLOT-ANALYSEN 62
5.2.4 MNPV-NACHWEIS IN GEHIRNEN 64
5.2.5 DATEN VON PCR- UND SOUTHERN BLOT-ANALYSEN IM VERGLEICH 66
5.2.6 UEBERTRAGUNGSWEGE VON MNPV 70
5.2.7 IN SIW-HYBRIDISIERUNG 71
5.2.8 DARSTELLUNG VON VIRUSPARTIKELN IM ELEKTRONENMIKROSKOP 74
5.3 INDUKTION EINER SYSTEMISCHEN IMMUNSUPPRESSION BEI MASTOMYS COUCHA
UND EIN
VERGLEICH DER IMMUNSUPPRESSIVA CYCLOSPORIN A UND RAPAMYCIN IM HINBLICK
AUF DIE
TUMORENTSTEHUNG 75
5.3.1 AUSSCHEIDEN VON TIEREN AUS DEM VERSUCH 75
5.3.2 AUSWIRKUNGEN AUF DIE TUMORENTSTEHUNG 77
5.3.3 AUFTRETEN VON AUGENINFEKTIONEN 79
5.3.4 GESCHLECHTSSPEZIFISCHE UNTERSCHIEDE BEI DER TUMORENTSTEHUNG UND
BEIM
AUFTRETEN VON AUGENINFEKTIONEN 80
5.3.5 BESTIMMUNGEN DER VIRUSLAST IN HAARFOLLIKELN 81
6 DISKUSSION 85
6.1 MASTOMYS COUCHA - EIN TIERMODELL FUER DIE PAPILLOMVIRUS-INDUZIERTE
HAUTKARZINOGENESE 85
6.1.1 LOKALISATION VON TUMOREN 86
6.1.2 UEBERTRAGUNGSWEGE VON MNPV 88
6.1.3 AUSBREITUNG VON MNPV IM ORGANISMUS 88
6.1.4 AUGENINFEKTIONEN 92
6.1.5 TUMORENTWICKLUNG NACH ANWENDUNG DER KLASSISCHEN ZWEI-STUFEN-
KARZINOGENESE 93
6.2 MNPV-INDUZIERTE TUMORENTSTEHUNG UNTER IMMUNSUPPRESSION 93
6.2.1 AUSSCHEIDEN VON TIEREN AUS DEM VERSUCH 94
6.2.2 ZEITPUNKT DES AUFTRETENS ERSTER TUMORE 95
6.2.3 VERGLEICH DER TUMORINZIDENZEN IN DEN GRUPPEN RAPA, CSA UND
KONTROLLE 95
6.2.4 INTERPRETATION DER VIRUSLAST-ANALYSE 96
6.2.5 ANWENDUNG DES IMMUNE-RESPONSE-MODIFIERS IMIQUIMOD 97
6.3 DIE LATENZ DER PAPILLOMVIRUS-INFEKTION 98
6.4 AUSBLICK 98
7 ZUSAMMENFASSUNG 100
IMAGE 5
INHALTSVERZEICHNIS
8 SUMMARY 102
9 LITERATUR 103
10 ANHANG 115
10.1 DATEN UNTERSUCHTER TIERE 115
10.2 DIE SEQUENZ DES MNPV-GENOMS 117
10.3 UNTERSUCHUNGEN UNTER IMMUNSUPPRESSION 121
10.3.1 DATEN DER UNTERSUCHTEN TIERE 121
10.3.2 TUMOR UND AUGENENTZUENDUNG 122
10.3.3 KONTROLLE DER WIRKSTOFFSPIEGEL IM BLUT 124
11 DANKSAGUNG 125
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| spelling | Ibberson, Myriam Verfasser (DE-588)135699258 aut Untersuchungen zur Persistenz von Mastomys-natalensis-Papillomvirus im natürlichen Wirt eingereicht von Myriam Ibberson 1. Aufl. Gießen VVB Laufersweiler 2008 V, 126 S. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Edition scientifique Zugl.: Gießen, Univ., Diss., 2008 mastommys natalensis cabt parasitology cabt papillomavirus cabt Tiermodell (DE-588)4140660-6 gnd rswk-swf Papillomaviren (DE-588)4219886-0 gnd rswk-swf Hautkrebs (DE-588)4140169-4 gnd rswk-swf Carcinogenese (DE-588)4069853-1 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Hautkrebs (DE-588)4140169-4 s Carcinogenese (DE-588)4069853-1 s Papillomaviren (DE-588)4219886-0 s Tiermodell (DE-588)4140660-6 s DE-604 http://library.vetmed.fu-berlin.de/ResourceList/details/167087 Abstract DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=022239858&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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