Die Funktion von Juv-p120 im Verlauf der Infektion mit Litomosoides sigmodontis:
Gespeichert in:
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| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Gießen
VVB Laufersweiler
2008
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INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG
2. LITERATURUEBERSICHT 2.1. DIE LYMPHATISCHE FILARIOSE DES MENSCHEN 2.2.
IMMUNREAKTIONEN BEI DER LYMPHATISCHEN FILARIOSE
2.2.1. ZELLULAERE REAKTIONEN
2.2.2. ZYTOKINREAKTIONEN BEI FILARIENINFEKTIONEN
2.2.3. HUMORALE REAKTIONEN BEI FILARIENINFEKTIONEN
2.3. DIE NAGETIERFILARIE L. SIGMODONTIS
2.3.1. ENTWICKLUNG VON L SIGMODONTIS
2.4. IMMUNREAKTIONEN BEI DER L. S/G/NODONT/S-LNFEKTION
2.5. IMMUNMODULATORISCHE EXKRETORISCH/SEKRETORISCHE
PRODUKTE VON FILARIEN
2.6. JUV-P120
3
3
3
3
10
12
13
14
16
18
22
3. MATERIAL UND METHODEN 23
3.1. VERSUCHSTIERE 23
3.1.1. SIGMODON HISPIDUS 23
3.1.2. MASTOMYS COUCHA 23
3.1.3. BALB/C-MAEUSE 23
3.2. LITOMOSOIDES SIGMODONTIS 24
3.2.1. HALTUNG VON LITOMOSOIDES SIGMODONTIS 24
3.2.2. QUANTITATIVE INFEKTION MIT L. SIGMODONTIS 24
3.2.3. BESTIMMUNG DER MIKROFILARIENDICHTE IM BLUT 25
3.2.4. ISOLIERUNG VON L SIGMODONTIS 26
3.2.5. EMBRYOGRAMME 26
3.2.6. STERILE GEWINNUNG VON PRAEADULTEN UND ADULTEN PARASITEN 26
3.2.7. IN VITRO-KULTIVIERUNG DER PARASITEN 27
3.2.8. REINIGUNG UND ANKONZENTRIERUNG DER OBERSTAENDE VON
GESCANNT DURCH
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN HTTP://D-NB.INFO/988285762
DIGITALISIERT DURCH
IMAGE 2
PRAEADULTEN UND ADULTEN WEIBCHEN 27
3.2.9. PRAEPARATION VON L. SIGMODONTIS-M KROFI ARIEN UND
MIKROFILARIENANTIGEN 28
3.2.10. PRAEPARATION VON L. SIGMODONTIS-DRITT (L3)- UND
VIERTLARVEN (L4)-ANTIGEN 29
3.2.11. ANTIGEN PRAEADULTER WEIBCHEN 29
3.3. BLUTENTNAHME 30
3.3.1. GEWINNUNG VON PLASMA 30
3.3.2. GEWINNUNG VON SERUM 30
3.4. PROTEINBESTIMMUNG NACH BRADFORD 31
3.5. KOPPLUNG VON PHOSPHO-DIMETHYLAMINOETHANOL 31
(P-DMAE) AN EIN LYSINREICHES (LYS)-PEPTID
3.6. BEHANDLUNGEN VON VERSUCHSTIEREN 33
3.6.1. IMMUNISIERUNG MIT NUEP 33
3.7. POLYACRYLAMIDGEL-ELEKTROPHORESE (PAGE) 34
3.7.1. PAGE ZUR AUFTRENNUNG VON PROTEINEN 34
3.7.2. PAGE FUER DIE AUFTRENNUNG VON DNA-PROBEN 35
3.7.3. GELFAERBUNGEN NACH PAGE-PROTEINELEKTROPHORESE 36
3.7.3.1. SILBERFAERBUNG 36
3.7.3.2. COOMASSIEFAERBUNG 37
3.8. IMMUNOBLOTTING 37
3.8.1. SEMI-DRY-BLOTTING 37
3.8.2. DOT BLOTTING 38
3.8.3 IMMUNFAERBUNGEN 38
3.9. STIMULATION VON MILZZELLEN MIT MITOGEN UND IN-VITRO- UEBERSTAND VON
PRAEADULTEN WEIBCHEN 39
3.9.1. ISOLIERUNG VON MILZZELLEN 39
3.9.2. VITALITAETSBESTIMMUNG UND ZAEHLUNG DER MILZZELLEN 40
3.9.3. STIMULATION DER ZELLEN FUER PROLIFERATIONSASSAYS 41
3.9.4. RADIOAKTIVE MARKIERUNG UND ERNTEN DER STIMULIERTEN ZELLEN 42
3.9.5. STIMULATION UND ERNTE DER MILZZELLEN FUER RNA-ISOLIERUNG 42
3.10. GEWINNUNG VON GESAMT-RNA AUS STIMULIERTEN MILZZELLEN 43
3.10.1. KONZENTRATIONSBESTIMMUNG DER RNA 43
3.11 . REVERSE TRANSKRIPTION DER GESAMT-RNA UND VON
IMAGE 3
PMUS3-RNA MIT DNASE-BEHANDLUNG 44
3.12. POLYMERASE-KETTEN-REAKTION (PCR) 45
3.12.1. UEBERPRUEFUNG UND OPTIMIERUNG DER PMUS3-CDNA-KONZENTRATION 47
3.13. QUANTIFIZIERUNG DER AMPLIFIKATE 47
3.13.1. AUSWERTUNG DER GELE 47
3.13.2. BERECHNUNG DER ZYTOKIN-TRANSKRIPTE 47
3.14. STATISTISCHE AUSWERTUNG 49
4. VORVERSUCHE UND VERSUCHSAUFBAU 50
4.1. VORVERSUCHE 50
4.2. HAUPTVERSUCHE 50
4.2.1. IMMUNISIERUNG 50
4.2.2. PROLIFERATION 51
4.2.3. ZYTOKINMESSUNGEN 51
5. ERGEBNISSE 52
5.1. GEWINNUNG VON JUV-P120 IN VITRO AUS PRAEADULTEN WEIBLICHEN L.
SIGMODONTIS SOWIE ANREICHERUNG 52
5.2. SEROLOGISCHE KREUZREAKTIONEN VON ANTI-JUV
UND P-DMAE-PEPTID 55
5.3. SYNTHESE VON MIT JUV-P120 KREUZREAGIERENDEN
MOLEKUELEN IN VERSCHIEDENEN STADIEN VON L. SIGMODONTIS 55
5.3.1. SYNTHESE IN L3 56
5.3.2. SYNTHESE IN L4 56
5.3.3. SYNTHESE IN WEIBLICHEN ADULTEN L SIGMODONTIS 57
5.4. NACHWEIS VON JUV-P120 IM BLUT L. SIGMODONTIS- INFIZIERTER
BALB/C-MAEUSE 58
5.5. NACHWEIS VON ANTIKOERPERN GEGEN JUV-P120 IN L.
S/G/NODONI/S-INFIZIERTEN BALB/C-MAEUSEN UND M. COUCHA 59
5.6. EFFEKTE EINER IMMUNISIERUNG VON M. COUCHA UND
BALB/C-MAEUSEN MIT JUV-P120 61
5.6.1. PRODUKTION VON ANTIKOERPERN GEGEN JUV-P120
NACH DER IMMUNISIERUNG 61
5.6.2. EINFLUSS DER IMMUNISIERUNG AUF DIE PARASITAEMIE
IMAGE 4
NACH BELASTUNGSINFEKTION 63
5.6.2.1. EFFEKTE BEI M. COUCHA 63
5.6.2.2. EFFEKTE BEI BALB/C-MAEUSEN 64
5.6.3. EINFLUSS DER IMMUNISIERUNG AUF DIE ANZAHL ADULTER L.
SIGMODONTIS NACH BELASTUNGSINFEKTION 64
5.6.3.1. EFFEKTE BEI M. COUCHA 62
5.6.3.2. EFFEKTE BEI BALB/C-MAEUSEN 65
5.6.4. EINFLUSS DER IMMUNISIERUNG AUF INTRAUTERINE ENTWICKLUNGSSTADIEN
VON L. SIGMODONTIS NACH BELASTUNGSINFEKTION 66
5.6.4.1. EFFEKTE BEI M. COUCHA 66
5.6.4.2. EFFEKTE BEI BALB/C-MAEUSEN 67
5.7. STIMULIERBARKEIT VON MILZLYMPHOZYTEN (PROLIFERATIONSASSAY)
L. S/GMODONF/S-INFIZIERTER BALB/C-MAEUSE UND M. COUCHA
AUF STIMULATION MIT CONA, JUV-P120 UND P-DMAE-PEPTID
SOWIE BEEINFLUSSUNG DER CONA-STIMULATION DURCH
JUV-P120 UND P-DMAE-PEPTID 68
5.7.1. VORVERSUCHE ZUR ERMITTLUNG GEEIGNETER KONZENTRATIONEN
VON JUV-P120 UND P-DMAE-PEPTID 68
5.7.2. WURMBUERDE DER VERSUCHSTIERE 70
5.7.2.1. M. COUCHA 70
5.7.2.2. BALB/C-MAEUSE 71
5.7.3. REAKTION VON MILZLYMPHOZYTEN AUF STIMULATION MIT
CONA UND JUV-P120 IM INFEKTIONSVERLAUF 72
5.7.3.1. M. COUCHA 72
5.7.3.2. BALB/C-MAEUSE 74
5.7.4. EINFLUSS VON JUV-P120 UND P-DMAE-PEPTID AUF DIE
CONA-INDUZIERTE PROLIFERATION VON MILZLYMPHOZYTEN 76
5.7.4.1. LYMPHOZYTEN AUS M. COUCHA 76
5.7.4.2. LYMPHOZYTEN AUS BALB/C-MAEUSEN 82
5.8. EFFEKTE VON CONA UND JUV-P120 AUF DIE TRANSKRIPTION
AUSGEWAEHLTER ZYTOKINGENE BEI DER BALB/C-MAUS IM
VERLAUF DER L. SIGMODONTIS-LNFEKTION 88
5.8.1. VORVERSUCHE 88
5.8.2. IFN-Y-GENTRANSKRIPTION 89
IMAGE 5
5.8.3. IL-2-GENTRANSKRIPTION 92
5.8.4. IL-4-GENTRANSKRIPTION 94
5.8.5. IL-5-GENTRANSKRIPTION 96
5.8.6. IL-10-GENTRANSKRIPTION 98
5.8.7. IL-13-GENTRANSKRIPTION 100
6. DISKUSSION 102
7. ZUSAMMENFASSUNG 112
8. SUMMARY 115
9. LITERATURVERZEICHNIS 117
10. ANHANG 135
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| spelling | Erhorn, Frauke Verfasser (DE-588)134075668 aut Die Funktion von Juv-p120 im Verlauf der Infektion mit Litomosoides sigmodontis eingereicht von Frauke Erhorn 1. Aufl. Gießen VVB Laufersweiler 2008 138 S. graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Edition scientifique Zugl.: Gießen, Univ., Diss., 2008 helminths cabt litomosoides cabt infections cabt parasitology cabt filarioidae Litomosoides sigmodontis (DE-588)4581523-9 gnd rswk-swf Filariose (DE-588)4154338-5 gnd rswk-swf Protein Juv-p120 (DE-588)7626531-6 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Filariose (DE-588)4154338-5 s Litomosoides sigmodontis (DE-588)4581523-9 s Protein Juv-p120 (DE-588)7626531-6 s DE-604 http://library.vetmed.fu-berlin.de/ResourceList/details/167068 Abstract DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=022239626&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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