Analyse der neurotrophen Aktivität der höhermolekularen Isoformen (21 kD und 23 kD) des Fibroblastenwachstumsfaktors-2:
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Hannover
2000
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Autor: Schulze, Anja
Jahr: 2000
INHALT
Seite
Abkürzungen 4
1 Einleitung 6
Morbus Parkinson 6
Substantia nigra 6
Therapie des MP 7
Neue Therapieansätze 7
Neurotrophe Faktoren 8
Entwicklung des Nervensystems 8
Adulter Organismus 8
Nervenwachstumsfaktor 9
Neurotrophe Faktoren für dopaminerge Neurone 10
Fibroblastenwachstumsfaktoren 12
Fibroblastenwachstumsfaktor-2 12
Isoformen des FGF-2 13
In vitro-Untersuchungen 14
In vivo-Untersuchungen 14
Ziel der Arbeit 15
Durchführung 15
2 Versuche: Methoden und Material 17
2.1. Methoden CG 8-Assay
2.1.1 Haltungsbedingungen der Höhnetembryonen 17
2.1.2 Sterilität 17
2.1.3 Präparation und Zeilkultur 17
2.1.4 Mikroskopie und Zellzähiung 21
2.2 Methoden nigrale Kulturen 22
2.2.7 Morphometrie-Analyse 30
3 Versuchsergebnisse 32
3.1 Ergebnisse CG-8-Assay
3.1.1 Etablierung der Kulturbedingungen 32
3. i .2 Oberleben der Ciliarganglienneurone in Anwesenheit
der FGF-2-Isoformen 34
3.1.3 FGF-2-spezifische Antikörper 42
-3-
Seite
3.2 Ergebnisse nigrale Kulturen 46
3.2.1 Zusammensetzung der nigralen Kulturen und Oberleben der
dopaminergen Neurone unter Einfluß der FGF-2-lsoformen
3.2.1.1 Allgemeines 46
3.2.1.2 TH-Immuncytochemie 46
3.2.1.3 MAP-2-Immuncytochemie 53
3.2.1.4 GFAP-Immuncytochemie 53
3.2.2 Zell-ELISA 55
3.2.2.1 Allgemeines 55
3.2.2.2 TH-ELISA 55
3.2.2.3 MAP-2-ELISA 57
3.2.2.4 GFAP-ELISA 59
3.2.3 6-Hydroxydopamin 59
3.2.4 FGF-2-spezifische Antikörper 61
3.2.5 Morphometrie-Analyse 62
3.3 Statistische Auswertung, Allgemeines 68
4 Diskussion 69
4.1 Vorbemerkungen 69
4.2 Diskussion der Methode 70
4.2.1 Kulturmedium 70
4.2.2 Zelldichte 71
4.2.3 Kulturdauer 72
4.2.4 Embryonaltag 72
4.3 Diskussion der Ergebnisse 73
4.3.1 Überleben der Ciliarganglienneurone 73
4.3.2 Zellzählung der TH+-Neurone 73
4.3.3 Zell-ELISA 74
4.3.4 6-OHDA 76
4.3.5 FGF-2-spezifische Antikörper 77
4.3.6 Morphometrie 78
4.4 Abschließende Betrachtung 79
5 Zusammenfassung gl
Summary $3
Literatur 85
Anhang: Tabellen AI-A10 ! bis XXV
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