Messungen zur epithelialen Barrierefunktion des Darmes bei Patienten mit chronisch entzündlicher Darmerkrankung und Einfluß einer Coronavirus-Infektion:
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| Published: |
Aachen
Shaker
2003
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Inhaltsverzeichnis
1 EINLEITUNG 1
1.1 Erkrankungen durch Coronaviren 2
1.2 Coronaviren und chronisch entzündliche Darmerkrankung 4
1.3 Studienziele 6
1.4 Studienablauf 7
1.4.1 Allgemeine Studienbedingungen 8
1.4.2 Untersuchungsablauf 8
2 MATERIAL UND METHODEN 10
2.1 Versuchskollektiv 10
2.1.1 Patienten (Studie/Verlaufsbeobachtung) 10
2.1.2 Patienten im entzündlichen Schub 11
2.1.3 Kontrollen 11
2.2 Elektronenmikroskopischer Coronavirus-Nachweis 12
2.2.1 Chemikalien und Lösungen 12
2.2.1.1 Chemikalien 12
2.2.1.2 Stabilisatorlösung 12
2.2.1.3 FormvaP-Folienbeschichtung des Kupfemetzes 13
2.2.2 Elektonenmikroskopische Untersuchung 13
2.2.2.1 Aufarbeitung der Stuhlproben 13
2.2.2.2 Elektronenmikroskopische Untersuchung der Stuhlproben 13
2.3 Messung der intestinalen Permeabilität mittels Ussing-Technik...14
2.3.1 Lösungen und Substanzen 14
2.3.2 Meßprinzip der Ussing-Technik 15
2.3.2.1 Vorbemerkung 15
2.3.2.2 Elektrische Meßanordnung 16
2.3.2.3 Erwärmung, Begasung und Umwälzung der Badlösung 18
2.3.2.4 Miniaturisierte Ussing-Kammer. 21
2.3.3 Versuchsablauf 25
2.3.3.1 Leerwertmessungen 25
2.3.3.2 Messung von Spannung, Widerstand und Kurzschlußstrom 25
2.3.3.3 Zangen-Biopsien 26
2.3.4 Wechselstrom-Impedanzanalyse 27
2.3.4.1 Prinzip 27
2.3.4.2 Durchführung 30
IV
2.4 Messung der intestinalen Permeabilität mittels Trinktest 31
2.4.1 Prinzip 31
2.4.2 Trinktest 32
2.4.2.1 Testzuckerlösung: 32
2.4.2.2 Versuchsdurchführung 33
2.4.3 Zuckeranalyse per HPLC 33
2.4.3.1 Geräte und Chemikalien 33
2.4.3.2 Chromatographische Methoden 34
2.5 Statistik 37
3 ERGEBNISSE 38
3.1 coronavirus-lnfektionen 38
3.2 Entzündliche Aktivität in Abhängigkeit vom Coronavirusstatus ...40
3.3 coronavirusinfektion und steroidtherapie im entzündlichen
Schub 48
3.4 Untersuchung der intestinalen Permeabilität 50
3.4.1 In vitro-Permeabilitätsmessungen an Biopsien aus dem Sigma 50
3.4.2 In vivo-Permeabilitätmessung mittels Trinktest 52
4 DISKUSSION 58
4.1 Einleitung 58
4.2 CORONAVIRUS-lNFEKTlONEN 58
4.2.1 Häufigkeit und Dauer von Coronavirus-Infektionen 58
4.2.2 Coronaviren bei Gastroenteritis - Lösen Coronaviren Diarrhöen aus?..59
4.3 Können Coronaviren einen entzündlichen Schub bei Patienten mit
chronisch entzündlicher darmerkrankung auslösen? 61
4.3.1 Andere Mikroorganismen als Schubauslöser bei CED ? 61
4.4 steroidtherapie im entzündlichen schub trotz coronavirus¬
infektion ? 62
4.5 Intestinale Barrierestörungen 63
4.5.1 Intestinale Barrierestörungen bei Patienten mit chronisch entzündlicher
Darmerkrankung 63
4.5.2 Barrierestörung durch Coronaviren bei Patienten mit CED 64
4.5.3 Barrierestörung auch bei Yersinieninfektion, einheimischer Sprue und
HIV mit Diarrhöe 65
4.5.4 Diarrhöe bei chronisch entzündlicher Darmerkrankung 65
V
4.6 In vivo - Permeabilitätsmessungen mittels Trinktest 67
4.6.1 Permeabilitäts-Trinktest bei Patienten mit CED 67
4.6.1.1 Permeabilitäts-Trinktest bei Morbus Crohn 67
4.6.1.2 Permeabilitäts-Trinktest bei Colitis ulcerosa 68
4.6.2 Einsatz des Permeabiliiäts -Trinktests zur Verlaufsbeurteilung 69
5 ZUSAMMENFASSUNG 71
5.1 coronavirusinfektionen bei chronisch entzündlicher
Darmerkrankung 71
5.2 In vivo-Permeabilitätsmessung mittels Trinktest 73
6 SUMMARY 75
6.1 CORONAVIRUS INFECTIONS IN PATIENTS WITH INFLAMMATORY BOWEL
DISEASE 75
6.2 IN VIVO PERMEABILITY TEST 77
7 LITERATURVERZEICHNIS 78
8 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 89
9 TABELLENVERZEICHNIS 90
10 ABKÜRZUNGEN 91
11 ANHANG 92
DANKSAGUNG 101
LEBENSLAUF 103
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