Isolation, Kultivation und Transformation von Protoplasten einer nichtembryogenen Suspensionskultur von Panax ginseng C. A. Meyer und einer embryogenen Suspensionskultur von Digitalis lanata:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Berlin
1992
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| Beschreibung: | 105 Bl. Ill. |
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| adam_text | ISOLATION, KULTIVATION UND TRANSFORMATION VON PROTOPLASTEN EINER
NICHTEMBRYOGENEN SUSPENSIONSKULTUR VON PANAX GINSENG CA. MEYER UND EINER
EMBRYOGENEN SUSPENSIONSKULTUR VON DIGITALIS LANATA DISSERTATION A ZUR
ERLANGUNG DES AKADEMISCHEN GRADES DR. RER. NAT. VORGELEGT DER FAKULTAET
FUER NATURWISSENSCHAFTEN DES WISSENSCHAFTLICHEN RATES DER
MARTIN-LUTHER-UNIVERSITAET HALLE-WITTENBERG VON . UTA REGER GEB. AM 18.
06. 1965 IN HALLE GUTACHTER: FEIT - OFT- D* FE/I (FVBBV V BESCHLUSSDATUM:
INHALT 1. EINLEITUNG 1 2. CHARAKTERISIERUNG DES AUSGANGSMATERIALS 4 2.1.
SUSPENSIONSKULTUREN VON PANAX GINSENG CA. MEYER 4 2.2.
DIGITALIS-LANATA-SUSPENSIONSKULTUR ZELLSTAMM VIII 5 3. ISOLATION VON
PROTOPLASTEN AUS SUSPENSIONSKULTUREH VON PANAX GINSENG ZELLSTAMM B UND
DIGITALIS LANATA STAMM VIII 7 3.1. BESTIMMUNG DER LEBENSFAEHIGKEIT 7
3.2. OPTIMIERUNG DER ISOLATIONSBEDINGUNGEN 8 3.3. REINIGUNG DER
ISOLIERTEN PROTOPLASTEN 11 3.3. CHARAKTERISIERUNG DER ISOLIERTEN
PROTOPLASTEN 12 4. KULTIVATION DER PROTOPLASTEN 12 4.1. EINFLUSS DES
NAEHRMEDIUMS 13 4.2. EINFLUSS ANDERER PARAMETER 16 4.3. KULTIVATION VON
IMMOBILISIERTEN PROTOPLASTEN 18 4.4. VERWENDUNG VON AMMENKULTUREN 21
4.5. ENTWICKLUNG DER VON PROTOPLASTEN STAMMENDEN GINSENGZELLEN 23 4.6.
ISOLATION UND KULTIVATION VON PROTOPLASTEN AUS DEN IZELLSTAEMMEN A, D UND
E 27 4.7. DISKUSSION 29 5. UNTERSUCHUNGEN ZU MEHRKERNIGEN PROTOPLASTEN
UND ZUR AUSLOESUNG DER DIREKTEN EMBRYOGENESE 34 5.1. CHARAKTERISIERUNG
DER MEHRKERNIGEN PROTOPLASTEN 34 5.2. ANREICHERUNG DER MEHRKERNIGEN
PROTOPLASTEN WAEHREND DER PROTOPLASTIERUNG 35 5.3. CHARAKTERISIERUNG DER
EMBRYOGENEN ZELLKULTUR DIGITALIS LANATA STAMM VIII 36 5.4. EINFLUSS DER
KULTIVATION DER ZELLEN AUF DEN ANTEIL MEHRKERNIGER PROTOPLASTEN 37 5.5.
DNA-GEHALT EINKERNIGER PROTOPLASTEN 39 5.6. KULTIVATION VON EIN- UND
MEHRKERNIGEN PROTOPLASTEN 40 5.7. DISKUSSION 42 6. TRANSFORMATION VON
PANAX GINSENG- UND DIGITALIS LANATA-SUSPENSIONSKULTUREN 44 6.1.
TOXIZITAET VON KANAMYCIN UND GENETICIN AUF DIGITALIS- UND PANAX
GINSENG-ZELLEN 45 6.2. KOKULTIVATION . 46 6.2.1. EINFLUSS DER
KOKULTIVATION AUF DIE VON PROTOPLASTEN STAMMENDEN ZELLEN ~ 46 6.2.2.
SELEKTION VON TRANSFORMANDEN 47 6.2.3. ANWENDUNG VON HITZESCHOCK 48
6.2.4. NACHWEIS DER TRANSFORMATION 49 6.3. DIREKTER GENTRANSFER 50 6.4.
DISKUSSION 53 7. GENERALDISKUSSION 56 8. EXPERIMENTELLER TEIL 61 8.1.
NAEHRMEDIEN 61 8.1.1. NAEHRMEDIEN FUER SUSPENSIONSKULTUREN VON DIGITALIS
LANATA UND PANAX GINSENG 61 8.1.2. NAEHRMEDIEN FUER PROTOPLASTEN UND DIE
VON IHNEN STAMMENDEN ZELLEN 64 8.2. KULTIVATIONSBEDINGUNGEN 67 8.2.1.
KULTIVATION DES ZUR PROTOPLASTIERUNG VERWENDETEN AUSGANGSMATERIALS 67
8.2.1.1. KULTIVATION VON PANAX-GINSENG-SUSPENSIONSKULTUREN 67 8.2.1.2.
KULTIVATION VON DIGITALIS-LANATA-SUSPENSIONSKULTUREN ZELLSTAMM VIII 67
8.2.1.3. KULTIVATION DER ZUR ISOLATION VON MEHRKERNIGEN PROTOPLASTEN
VERWENDETEN ZELLEN 67 KULTIVATION VON AGROBACTERIUM TUMEFACIENS 67
KULTIVATION VON PROTOPLASTEN UND DER VON IHNEN STAMMENDEN ZELLEN 68
KULTIVATION IM FLUESSIGEN NAEHRMEDIUM 68 KULTIVATION IN GELEN 69
AMMENKULTUR 69 8.2.2. 8.2.3. 8.2.3. 8.2.3. 8.2.3. 1. 2. 3. 8.2.3.4.
KULTIVATION VON TRANSFORMIERTEN PROTOPLASTEN UND ZELLEN 71 8.2.3.5.
UEBERFUEHRUNG VON REGENERIERTEN KALLI IN SUSPENSION 72 8.3. ISOLATION UND
REINIGUNG DER PROTOPLASTEN 73 8.3.1. VERWENDETE NAEHRLOESUNGEN 73 8.3.2.
ISOLATION DER PROTOPLASTEN 74 8.3.3. ISOLATION VON MEHRKERNIGEN
PROTOPLASTEN 74 8.3.4. REINIGUNG UND ANREICHERUNG VON EIN- UND
MEHRKERNIGEN PROTOPLASTEN 74 8.3.5. EINSTELLEN DER PLATTIERUNGSDICHTE 75
8.4. TRANSFORMATION - - R/ -* - -- ; --.-- 76 8.4.1. KOKULTIVATION
REGENERIERENDER PROTOPLASTEN 7 6 8.4.1.1. VERWENDETE BAKTERIENSTAEMME 76
8.4.1.2. KOKULTIVATION VON AUS PROTOPLASTEN REGENERIERTEN : EINZELZELLEN
77 8.4.2. TRANSFORMATION DURCH DIREKTEN GENTRANSFER 78 8.4.2.1.
VERWENDETE LOESUNGEN 78 8.4.2.2. UEBERTRAGUNG VON DNA DURCH DIREKTEN
GENTRANSFER 78 8.5. ANALYTISCHE METHODEN 79 8.5.1. BESTIMMUNG DER
VITALITAET ;, . _ Z .: *:.- . : :.-.,-..:. 79 8.5.2. BESTIMMUNG DER
TROCKENMASSE 79 8.5.3. BESTIMMUNG DER PLATTIERUNGSEFFEKTIVITAT . . 79
8.5.4. BESTIMMUNG DER OSMOLARITAET 79 8.5.5. GROESSENBESTIMMUNG VON
PROTOPLASTEN 79 8.5.6. KERNFAERBUNG NACH GIEMSA * - 80 8.5.7. KERNFAERBUNG
NACH FEULGEN 80 8.5.8. BESTIMMUNG DES DNA-GEHALTES 80 8.5.9. NACHWEIS
DER TRANSFORMATION 80 8.6. STERILISATIONSVERFAHREN 80 9. ZUSAMMENFASSUNG
82 10.. LITERATUR . 86
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