Chemie und Biochemie des mikrobiellen EDTA-Abbaus:
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Göttingen
Cuvillier
1996
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| adam_text | Titel: Chemie und Biochemie des mikrobiellen EDTA-Abbaus
Autor: Klüner, Thomas
Jahr: 1996
-1 -
Inhaltsverzeichnis
Symbolverzeichnis III
1 Einleitung 1
2 Komplexbildung und -Stabilität 4
2.1 Komplexbegriff 4
2.2 Chelateffekt 4
2.3 Komplexbildungsgleichgewicht 6
2.4 Individuelle Nebenreaktionskoeffizienten 7
3 Biologische Abbaubarkeit von EDTA 9
3.1 EDTA-mineralisierende Mikroorganismen 9
3.2 EDTA-Abbau durch eine Bakterienmischkultur und das Isolat BNC1 10
4 Einfluß von Metallionen auf den Abbau des Komplexbildners EDTA 13
4.1 Mikrobieller Umsatz verschiedener Metall-EDTA-Chelate 13
4.2 Biologisch abbaubare Metall-EDTA-Komplexe 14
4.3 Abbauinerte Metall-EDTA-Komplexe 17
4.4 Abbaubarkeit von EDTA nach Vorbehandlung von
Schwermetall-EDTA-Komplexen 20
4.5 Biologischer Abbau der Metall-Komplexe anderer Chelatbildner 23
5 Enzymatische Aktivitäten zellfreier Extrakte des Stammes BNC1 25
5.1 Enzymatischer Umsatz von EDTA 25
5.2 Charakterisierung der EDTA-Umsatzaktivität 27
5.2.1 Coenzyme (Cosubstrate und prosthetische Gruppen) 27
5.2.2 Cofaktoren 32
5.2.3 Temperatur- und pH-Wert-Einfluß 33
5.2.4 Einfluß der Substratkonzentration 35
5.3 Intermediate des EDTA-Umsatzes 37
5.3.1 Identität der Metabolite 37
5.3.2 Enzymatischer Umsatz potentieller Intermediate des
EDTA-Abbaus 41
5.4 Unspezifische NADH-verbrauchende Aktivität 44
-n-
6 Substratspektrum und Induktion kataboler Enzyme des EDTÄ-Abbaus 47
6.1 Umsatz potentieller Intermediate des EDTA-Abbaus durch Ruhezellen 47
6.2 Umsatz von EDTA, ED3A und NTA durch zellfreie Extrakte
aus unterschiedlich induzierten Zellen 49
6.3 Umsatz strukturanaloger Verbindungen von EDTA 51
7 Katabolismus von EDTA 54
7.1 Substrataufnahmeenzym 54
7.2 EDTA-Monooxygenase 56
7.3 Spaltung von ED3A 58
7.4 Weitere Sequenzen des EDTA—Abbaus 60
8 Zusammenfassung und Ausblick 62
9 Material und Methoden 65
9.1 Zusammensetzung der Nährmedien 65
9.2 Stammhaltung und Anzucht der Mikroorganismen 68
9.3 Herstellung zellfreier Extrakte 69
9.4 Ultrafiltration zellfreier Extrakte 69
9.5 Nachweis enzymatischer Aktivitäten 69
9.5.1 Substrat-Abnahme 69
9.5.2 EDTA-abhängige NADH-Oxidation 70
9.5.3 Sauerstoffverbrauch 70
9.6 Substrat-Umsatz durch Ruhezellen 71
9.7 Analytische Methoden 71
9.7.1 Nachweis verschiedener Aminopolycarbonsäuren 71
9.7.2 Nachweis von Ethylendiamin und Glycin 72
9.7.3 Konzentration an gelöstem organischen Kohlenstoff 73
9.7.4 Nachweis von Glyoxylat 73
9.7.5 Nachweis von Ammonium 74
9.7.6 Bestimmung von H202 74
9.7.7 Nachweis von Metallionen 74
9.7.8 Proteinbestimmung 74
9.7.9 Biomassebestimmung 75
9.8 Darstellung von ED3A 75
9.9 Isoelektrische Fokussierung 75
10 Literatur 76
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