Prognostische Bedeutung der Expression von Indoleamine-2,3-Dioxygenase (IDO) in Endothelzellen klarzelliger Nierenzellkarzinome:
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2008
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis
1 EINLEITUNG 1
1.1 Das Nierenzellkarzinom (RCC) 1
1.1.1 Epidemiologie 1
1.1.2 Klassifikationen und Prognosefaktoren 1
1.1.3 Symptome und Diagnostik 4
1.1.4 Chirurgische Therapie 5
1.1.5 Strahlen- und systemische Therapie 5
1.1.6 Immune escape Mechanismen 7
1.2 INDOLEAMINE-2.3-DIOXYGENASE (IDO) 10
1.2.1 Molekulargenetische und biochemische Eigenschaften von IDO 10
1.2.2 Der Abbau von Tryptophan 12
1.2.3 IDO und die Rolle im Immunsystem 13
1.2.4 Potentieller Wirkmechanismus von IDO 15
1.2.5 IDO in malignen Gewebe 18
1.3 Zielsetzung der Arbeit 20
2 MATERIALIEN 21
2.1 Patienten 21
2.2 Geräte 22
2.3 häufig verwendete materialien 23
2.4 Chemikalien und biologische Reagenzien 23
2.5 Kits 24
3 METHODEN 25
3.1 Aufarbeitung des Patientenmaterials 25
3.2 Molekularbiologische Methoden 25
3.2.1 RNA-Isolierung aus Gewbe 25
3.2.2 Qualitätskontrolle derRNA 26
3.2.3 Reverse Transkription 29
3.2.4 Polymerasen-Kettenreaktion (PCR) 30
3.2.5 Elektrophorese im Agarosegel 31
3.2.6 Quantitative Real-time-PCR 33
3.3 IMMUNHISTOCHEMISCHE METHODEN 37
IV
Inhaltsverzeichnis
4 ERGEBNISSE 40
4.1 Qualitätskontrolle der RNA 40
4.2 Nachweis von IDO-mRNA im RCC-Gewebe 40
4.2.1 Semiquantitative Bestimmung von IDO-mRNA mittels RT-PCR 40
4.2.2 Quantitative Bestimmung von IDO-mRNA in RCC- und tumorfreiem
Nieren-Gewebe 42
4.3 IMMUNHISTOCHEMIE 45
4.3.1 RCC-Endothelzellen und IDO-Expression 45
4.4 Follow-up 50
5 DISKUSSION 54
5.1 Kontrollmechanismen der IDO-Expression 54
5.2 IDO-Expression in RCC-Zellen 55
5.3 IDO als prognostischer Marker 57
5.4 Therapie mit IDO-Inhibitoren 58
5.5 Vorschlag für weitere Experimente zur Untersuchung der
Rolle von IDO 59
6 ZUSAMMENFASSUNG 61
7 LITERATURVERZEICHNIS 63
8 ABKÜRZUNGSVERZEICHNIS 72
9 DANKSAGUNG 74
10 LEBENSLAUF 75
v
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Inhaltsverzeichnis
1 EINLEITUNG 1
1.1 Das Nierenzellkarzinom (RCC) 1
1.1.1 Epidemiologie 1
1.1.2 Klassifikationen und Prognosefaktoren 1
1.1.3 Symptome und Diagnostik 4
1.1.4 Chirurgische Therapie 5
1.1.5 Strahlen- und systemische Therapie 5
1.1.6 Immune escape Mechanismen 7
1.2 INDOLEAMINE-2.3-DIOXYGENASE (IDO) 10
1.2.1 Molekulargenetische und biochemische Eigenschaften von IDO 10
1.2.2 Der Abbau von Tryptophan 12
1.2.3 IDO und die Rolle im Immunsystem 13
1.2.4 Potentieller Wirkmechanismus von IDO 15
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3.2.1 RNA-Isolierung aus Gewbe 25
3.2.2 Qualitätskontrolle derRNA 26
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3.2.5 Elektrophorese im Agarosegel 31
3.2.6 Quantitative Real-time-PCR 33
3.3 IMMUNHISTOCHEMISCHE METHODEN 37
IV
Inhaltsverzeichnis
4 ERGEBNISSE 40
4.1 Qualitätskontrolle der RNA 40
4.2 Nachweis von IDO-mRNA im RCC-Gewebe 40
4.2.1 Semiquantitative Bestimmung von IDO-mRNA mittels RT-PCR 40
4.2.2 Quantitative Bestimmung von IDO-mRNA in RCC- und tumorfreiem
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4.3 IMMUNHISTOCHEMIE 45
4.3.1 RCC-Endothelzellen und IDO-Expression 45
4.4 Follow-up 50
5 DISKUSSION 54
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5.2 IDO-Expression in RCC-Zellen 55
5.3 IDO als prognostischer Marker 57
5.4 Therapie mit IDO-Inhibitoren 58
5.5 Vorschlag für weitere Experimente zur Untersuchung der
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