Serumresistinkonzentrationen in adipösen und normalgewichtigen Kindern und Jugendlichen: biochemische Charakterisierung und klinische Bedeutung
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| adam_text | Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung 04
1.1 Adipositas, Insulinresistenz und Diabetes mellitus Typ 2 04
1.2 Resistin als potentielles Bindeglied zwischen Fettleibigkeit und Diabetes 05
1.3 Bedeutung von Resistin im Mausmodell 06
1.4 Resistin beim Menschen 09
1.5 Biochemische Eigenschaften von Resistin 12
1.6 Zielstellung der Arbeit 13
2. Material und Methoden 15
2.1 Materialien 15
2.1.1 Chemikalien 15
2.1.2 Pufferund Lösungen 17
2.1.3 Geräte und Apparaturen 19
2.1.4 Biochemische Messsysteme 19
2.2 Biochemische Methoden 20
2.1.1 Gewinnung von Antiseren 20
2.2.2 Gewinnung der IgG Fraktion aus Antiseren 21
2.2.3 Anreicherung von Resistin aus humanem Plasma 22
2.2.4 Western Blot 24
2.2.5 Biotinylierung von Antikörpern 26
2.2.6 Resistinassay 27
2.2.7 Größenausschlusschromatographie 29
2.2.8 Probenvorbehandlung mit PEG 6000 29
2.2.9 Isolierung von potentiellen Bindungspartnern 29
2.3 Patienten und Bestimmung klinischer sowie biochemischer Parameter 30
2.3.1 Probanden 30
2.3.2 Bestimmung von Labor- und klinischen Parametern 31
2.3.3 Statistische Datenverarbeitung 32
3. Ergebnisse 33
3.1 Etablierung und Validierung eines Resistin IFMA 33
3.1.1 Austestung der Antiseren 33
2
3.1.2 Anreicherung von Resistin aus humanem Serum 35
3.1.3. Aufbau eines Fluoreszenz-Immunoassay zur Bestimmung von Resistin 36
3.1.4. Molekulare Verteilung der Resistinimmunreaktivität im Serum 39
3.1.5. Vergleich zweier Assaysysteme 42
3.2 Untersuchung von Resistinserumwerten bei Kindern und Adoleszenten 43
3.2.1. Ergebnisse bei adipösen Kindern 43
3.2.2. Ergebnisse in der Kontrollgruppe 47
4. Diskussion 50
4.1 Methodische Aspekte 50
4.1.1 Validierung des Resistin-IFMA 50
4.1.2 Molekulare Charakterisierung von Resistin 52
4.1.3 Vergleich zweier Resistin Immunoassays 55
4.2 klinische Aspekte 57
4.2.1 Resistin und Entwicklungsparameter 57
4.2.2 Resistin und Geschlecht 59
4.2.3 Resistin und Adipositas 60
4.2.4 Resistin und Insulinresistenz 61
4.3 Ausblick 62
5. Zusammenfassung 64
6. Literaturverzeichnis 67
7. Abkürzunqsverzeichnis 82
Lebenslauf 84
Erklärung über die eigenständige Abfassung der Arbeit 85
Danksagung 86
3
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Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung 04
1.1 Adipositas, Insulinresistenz und Diabetes mellitus Typ 2 04
1.2 Resistin als potentielles Bindeglied zwischen Fettleibigkeit und Diabetes 05
1.3 Bedeutung von Resistin im Mausmodell 06
1.4 Resistin beim Menschen 09
1.5 Biochemische Eigenschaften von Resistin 12
1.6 Zielstellung der Arbeit 13
2. Material und Methoden 15
2.1 Materialien 15
2.1.1 Chemikalien 15
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2.2 Biochemische Methoden 20
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2.3 Patienten und Bestimmung klinischer sowie biochemischer Parameter 30
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2.3.2 Bestimmung von Labor- und klinischen Parametern 31
2.3.3 Statistische Datenverarbeitung 32
3. Ergebnisse 33
3.1 Etablierung und Validierung eines Resistin IFMA 33
3.1.1 Austestung der Antiseren 33
2
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3.1.4. Molekulare Verteilung der Resistinimmunreaktivität im Serum 39
3.1.5. Vergleich zweier Assaysysteme 42
3.2 Untersuchung von Resistinserumwerten bei Kindern und Adoleszenten 43
3.2.1. Ergebnisse bei adipösen Kindern 43
3.2.2. Ergebnisse in der Kontrollgruppe 47
4. Diskussion 50
4.1 Methodische Aspekte 50
4.1.1 Validierung des Resistin-IFMA 50
4.1.2 Molekulare Charakterisierung von Resistin 52
4.1.3 Vergleich zweier Resistin Immunoassays 55
4.2 klinische Aspekte 57
4.2.1 Resistin und Entwicklungsparameter 57
4.2.2 Resistin und Geschlecht 59
4.2.3 Resistin und Adipositas 60
4.2.4 Resistin und Insulinresistenz 61
4.3 Ausblick 62
5. Zusammenfassung 64
6. Literaturverzeichnis 67
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