Die Bedeutung von "elevated microsatellite alterations at selected Tetranucleotides" (EMAST), einer neuen Form der Mikrosatelliteninstabilität, und der Expression von "mismatch repair"-Genen beim Prostatakarzinom:
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung 7
1.1 Anatomie und Funktion der Prostata 7
1.1.1 Anatomie 7
1.1.2 Funktion 8
1.2 Epidemiologie des Prostatakarzinoms 8
1.3 Ätiologie des Prostatakarzinoms 9
1.3.1 Ethnographie 9
1.3.2 Diät 9
1.3.3 Genetik 10
1.3.4 Hormonhaushalt 11
14 Klinik des Prostatakarzinoms 12
1.4.1 Symptomatik 12
1.4.2 Diagnostik 13
1.4.3 Metastasierung 14
1.4.4 Therapie 15
1.4.5 Prognose 16
1.5 Pathologie des Prostatakarzinoms 11
1.5.1 Prostatische intraepitheliale Neoplasie (PIN) 1 ^
1.5.2 Lokalisation und Ausbreitung des Prostatakarzinoms 18
1.5.3 Histologische Differenzierung (Grading) 18
1.5.4 Histologisches Grading nach Gleason 19
1.5.5 Tumorklassifizierung (Staging) 21
1.6. Molekulare Pathogenese 22
1.6.1 Hereditäres Prostatakarzinom 23
1.6.2 Sporadisches Prostatakarzinom 24
1.6.3 Genetischeinstabilitäten 29
1.7 Zielsetzung der Arbeit 3!
2. Material und Methoden 33
2.1 Gewebeproben und klinisch pathologische Daten 33
2.1.1 Patientendaten 33
2.1.2 Verteilung der Tumoren nach Stage 34
2.1.3 Gleason Score der Tumoren 34
2.1.4 PSA Wcrt vor radikaler Prostatcktomic 35
2.2 Gewinnung von DNA aus Paraffinmaterial 35
2.2.1 Herstellung von Paraffinschnitten 36
2.2.2 Entparaffinieren der Gewebeschnitte 37
2.2.3 HE Färbung der Schnitte 37
2.2.4 Mikrodissektion der Tumorareale 38
2.2.5 Proteinase K Verdau und DNA Isolierung 40
23 Technik für MSI , EMAST und TP53alu Analyse 42
2 3.1 PCR Amplifikation 42
2.3.2 Polyacrylamid Gelelcktrophorcsc 47
2.3.3 Silberfärbung der Polyacrylamid Gcle 50
2.3.4 Interpretation der Bandenmuster 51
2.4 Anfertigung der Tissue Microarrayi 52
2.5 Immunhistochemic 53
2.5.1 p53 54
2.5.2 hMLHI.hMSH2 55
2.6 Statistische Auswertung 56
2.7 Verwendete Laborgerate 57
2.8 Verwendete Chemikalien 58
3. Ergebnisse 60
3.1 Ergebnisse der Mikrosatellitenanalyse 60
3.1.1 EMAST Analyse 61
3.1.2 TP53alu Analyse 62
3.1.3 MDMSI Analyse 62
3.2 Ergebnisse der immunbistochemischen Untersuchung 65
3.2.1 p53 Analyse 65
3.2.2 hMLHl Analyse 66
3.2.3 hMSH2 Analyse 66
4. Diskussion 6g
5. Literaturverzeichnis 74
6. Bildquellennachweis 86
7. Abkürzungsverzeichnis 87
8. Danksagung 89
9. Lebenslauf 90
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Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung 7
1.1 Anatomie und Funktion der Prostata 7
1.1.1 Anatomie 7
1.1.2 Funktion 8
1.2 Epidemiologie des Prostatakarzinoms 8
1.3 Ätiologie des Prostatakarzinoms 9
1.3.1 Ethnographie 9
1.3.2 Diät 9
1.3.3 Genetik 10
1.3.4 Hormonhaushalt 11
14 Klinik des Prostatakarzinoms 12
1.4.1 Symptomatik 12
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1.4.3 Metastasierung 14
1.4.4 Therapie 15
1.4.5 Prognose 16
1.5 Pathologie des Prostatakarzinoms 11
1.5.1 Prostatische intraepitheliale Neoplasie (PIN) 1 ^
1.5.2 Lokalisation und Ausbreitung des Prostatakarzinoms 18
1.5.3 Histologische Differenzierung (Grading) 18
1.5.4 Histologisches Grading nach Gleason 19
1.5.5 Tumorklassifizierung (Staging) 21
1.6. Molekulare Pathogenese 22
1.6.1 Hereditäres Prostatakarzinom 23
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1.6.3 Genetischeinstabilitäten 29
1.7 Zielsetzung der Arbeit 3!
2. Material und Methoden 33
2.1 Gewebeproben und klinisch pathologische Daten 33
2.1.1 Patientendaten 33
2.1.2 Verteilung der Tumoren nach Stage 34
2.1.3 Gleason Score der Tumoren 34
2.1.4 PSA Wcrt vor radikaler Prostatcktomic 35
2.2 Gewinnung von DNA aus Paraffinmaterial 35
2.2.1 Herstellung von Paraffinschnitten 36
2.2.2 Entparaffinieren der Gewebeschnitte 37
2.2.3 HE Färbung der Schnitte 37
2.2.4 Mikrodissektion der Tumorareale 38
2.2.5 Proteinase K Verdau und DNA Isolierung 40
23 Technik für MSI , EMAST und TP53alu Analyse 42
2 3.1 PCR Amplifikation 42
2.3.2 Polyacrylamid Gelelcktrophorcsc 47
2.3.3 Silberfärbung der Polyacrylamid Gcle 50
2.3.4 Interpretation der Bandenmuster 51
2.4 Anfertigung der Tissue Microarrayi 52
2.5 Immunhistochemic 53
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2.6 Statistische Auswertung 56
2.7 Verwendete Laborgerate 57
2.8 Verwendete Chemikalien 58
3. Ergebnisse 60
3.1 Ergebnisse der Mikrosatellitenanalyse 60
3.1.1 EMAST Analyse 61
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4. Diskussion 6g
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